自动细胞计数仪替代手工计数能显著提高计数实验的效率，但是在处理复杂样本时总会遇到一些难题:
单视野取样可能存在系统误差
单视野是从局部视野获取信息，如果样本中存在分布不均匀的情况，单视野计数的结果可能会因取样不均的不同而产生偏差，但可以通过充分混匀样品和多次上样计数取平均值减少系统误差的影响。
自动聚焦可能存在波动
自动对焦依赖算法和软件控制，当视野中的细胞较少或状态较复杂时，自动对焦的稳定性可能会受到干扰；如果细胞样本的浓度适中且形态均一性较好，那么自动聚焦的计数仪也能出色完成计数实验。
单荧光激发光源应用局限性
市面上部分荧光计数仪采用单荧光激发光源设计，一定程度降低了成本使价格更友好，但是在处理双荧光信号或弱荧光信号时就会出现较大误差。
对于实验人员而言，通常用以下三个指标评价细胞计数仪的准确性
1
对比细胞原图与机器识别后的圈选图，检查细胞识别的精准度；
2
开展多次重复计数实验，检查组间CV值（变异系数）；
3
将计数仪与流式仪或人工计数结果对比；
为了提高细胞计数的准确性，在瑞沃德C200FL智能荧光细胞计数仪的设计过程中，我们聚焦于成像稳定性、成像清晰度、算法解析能力这三大关键产品性能，进行了深度开发与升级。想知道这背后究竟蕴含着哪些突破性的核心技术吗？答案就在下文，精彩不容错过！
多视野成像减少误差
为了减少单视野成像造成的系统误差，C200FL型计数仪选择三视野计数，有更大的计数面积，总计数面积达到7mm2；三视野分散计数减少单点采样误差，也能更好地掌握细胞分布规律。
CHO细胞计数线性度（R2＞0.999）
293细胞多次计数重复性（CV＜5%）
固定焦距设计提升成像和计数稳定性
C200FL型计数仪采用固定焦距采集图片，有效减少系统自动聚焦波动的同时还能大幅度缩短计数时间，保证多次成像的稳定性，进一步缩小CV变异系数。清晰且稳定的成像是算法精准识别细胞的良好基础。
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智能边缘分辨算法提升细胞识别精准度
除了常规的直径、圆度、荧光阈值等参数外，我们还设立了细胞边界解读参数，精准识别细胞边缘，使聚团细胞识别更精准！
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注:黄色圈表示聚团
超灵敏荧光检测系统应用场景更广泛
瑞沃德计数仪系列皆采用独立双荧光通道光路设计，C200FL型计数仪更是配置了高性能光学元器件以及背景纯化算法，能出色地捕捉微弱荧光信号并有效排除背景噪声干扰，得到背景纯净的荧光画面。我们与流式细胞仪进行了对比测试，二者转染率检测结果相差不超过10%。
外周血PBMC细胞AOPI荧光计数
（绿色为AO荧光染色的活细胞，红色为PI荧光染色的死细胞）
实验名称 | 孔位序列 | C200FL转染率结果（%） | 流式仪检测结果（%） |
293-GFP | 1 | 88.86 | 91.29 |
2 | 90.54 | ||
3 | 91.64 | ||
4 | 90.22 | ||
5 | 91.18 | ||
6 | 88.29 | ||
平均值 | 90.12 | ||
与流式偏差结果 | -1.28% |
实验名称 | 孔位序列 | C200FL转染率结果（%） | 流式仪检测结果（%） |
293-RFP | 1 | 89.52 | 93.99 |
2 | 92.24 | ||
3 | 89.50 | ||
4 | 91.78 | ||
5 | 91.74 | ||
6 | 87.76 | ||
平均值 | 90.42 | ||
与流式偏差结果 | -3.79% |
瑞沃德C200FL智能荧光细胞计数仪
凭借多视野成像、高性能的光学结构设计和精准细胞识别算法等核心技术，突破传统计数仪的局限，为实验人员提供高效、精准的细胞计数解决方案，满足行业对高精度数据的需求。
且其软件设计符合FDA 21CFR PART11要求，满足企业用户对电子记录和权限管理的需求。
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