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SCIEX微流高分辨质谱系统助力乳制品蛋白质组学研究

来源:SCIEX(爱博才思) 更新时间:2026-01-08 14:30:25 阅读量:6
导读:SCIEX微流高分辨质谱系统助力乳制品蛋白质组学研究

牦牛是高海拔地区如青藏高原的主要畜牧物种之一,为当地牧民提供必需的生活资源,包括肉类、乳制品和皮革等,在高原畜牧业中占据重要地位。牦牛奶作为一种独特的乳制品资源,其营养价值高于牛奶、山羊奶及其他乳制品。牦牛奶中的主要蛋白质成分包括酪蛋白、乳清蛋白(α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、血清白蛋白和免疫球蛋白)以及乳脂球膜(MFGM)蛋白。


研究表明,牦牛奶具有多种功能特性,包括抗炎、抗氧化、抗菌、抗癌、缓解疲劳、耐缺氧、降血压和降胆固醇等作用。然而由于牦牛的生长环境、气候条件和饲养方式的限制,牦牛奶的产量相对较低。犏牛作为黄牛与牦牛的杂交后代,产奶量比牦牛显著提高,然而目前对于牦牛奶和犏牛奶之间蛋白质组成差异,尤其是功能性蛋白质的研究仍然有限。


中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所陈爱亮团队在《Food Chemistry》上发表文章,基于SCIEX M5微升液相和TripleTOF? 6600高分辨质谱系统,利用蛋白质组学方法,比较了两种奶中乳清蛋白和乳脂球膜(MFGM)蛋白的差异。结果显示,犏牛奶中大多数上调的差异表达蛋白(DEPs)更多地参与促进钙吸收、免疫调节和肠道健康,这些都是婴儿生长发育所必需的营养物质。值得注意的是,对于重要的功能性蛋白,如乳铁蛋白和骨桥蛋白,犏牛奶中的含量分别比牦牛奶高8.03倍和3.44倍。该研究为犏牛奶的潜在优势提供了新的见解,并提供了科学依据。


牦牛奶和犏牛奶蛋白鉴定结果


经过高pH反相分级后,使用DDA采集模式,牦牛奶(yak)和犏牛奶(cattle-yak)一共鉴定到865种蛋白质和9011条肽段。使用SWATH采集方法分析了牦牛奶和犏牛奶的蛋白质组成,分别在牦牛奶和犏牛奶中鉴定出423种和433种蛋白质。进一步分析显示,牦牛奶和犏牛奶分别鉴定出196种和194种乳清蛋白,以及227种和239种MFGM蛋白。在两组中,有184种乳清蛋白和200种MFGM蛋白是共有的,表明牦牛奶与犏牛奶在蛋白质组成种类上没有显著差异。


牦牛奶和犏牛奶蛋白鉴定结果韦恩图


尽管两种奶中蛋白质的种类相似,主成分分析(PCA)仍能区分这两种奶。两组蛋白质的定量结果主成分分析如图所示。同一组内的样品聚集很好,而组间的分离程度更高,这表明两种奶中共有蛋白质的含量存在显著差异。


牦牛奶和犏牛奶蛋白质主成分分析图


牦牛奶和犏牛奶差异蛋白质分析


以犏牛奶和牦牛奶比较进行蛋白质相对定量分析,t检验后选择p<0.05且差异倍数(FC)>1.2或<0.83的蛋白质作为显著差异表达蛋白(DEPs)。在乳清蛋白中,鉴定出34种差异蛋白,其中14种在犏牛奶中显著上调,20种下调。在乳脂球膜(MFGM)蛋白中,发现44种差异蛋白,其中23种在犏牛奶中上调,21种下调,火山图和热图如图所示。


牦牛奶和犏牛奶差异蛋白分析的火山图和热图


关键蛋白的靶向验证


乳铁蛋白和骨桥蛋白是牛奶中研究最广泛的生物活性蛋白,两种蛋白质都已被开发为食品添加剂,并广泛用于婴儿配方奶粉。因此,本研究特别关注牦牛奶和犏牛奶中这两种蛋白质的差异,SWATH定量结果发现犏牛奶中的乳转铁蛋白和骨桥蛋白含量分别是牦牛奶的8.03倍和3.44倍。通过MRMHR方法进行靶向验证,显示的趋势与SWATH方法一致,确认了分析数据的可靠性和准确性。


SWATH和MRMHR定量结果比较


总结


本文介绍了基于SCIEX M5微升液相和TripleTOF? 6600高分辨质谱系统进行牦牛奶和犏牛奶蛋白质组学的研究,使用SWATH技术比较了两种奶的乳清蛋白和乳脂球膜蛋白的差异表达,并用MRMHR技术对目标蛋白进行了靶向验证,显示的趋势与SWATH技术一致。该研究结果为进一步探索犏牛的育种及犏牛奶中的功能性蛋白提供了基础,有助于高原畜牧业的可持续发展。


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参考文献:

Chen X, Zhang J, Liu C, Sun X, Pang X, Qu S, Wu K, Lv X, Chen A. Proteomics-based study for evaluation crossbreeding advantages of cattle-yak milk. Food Chem. 2025 Dec 1;494:146188.


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