在肠道微生态、环境沉积物及污泥体系中,大量关键功能微生物属于严格厌氧或兼性厌氧类型。这些微生物在碳循环、代谢调控及微生态平衡中发挥核心作用,但其分离与培养长期面临技术瓶颈。
一方面,许多厌氧菌对氧气极为敏感,短时间暴露即可导致活性下降甚至失活;另一方面,在混合样本中它们往往丰度较低、生长缓慢,传统扩培方式难以稳定获得纯培养。因此,如何在维持无氧环境的前提下,实现单细胞级精准分选与后续培养验证,成为厌氧菌研究的关键技术需求。
围绕这一问题,基于PRECI SCS 可视化单细胞分选仪与HoneyArray微阵列分选芯片的组合平台,构建了一套适用于严格厌氧菌的单细胞分选培养方案。
原文链接:PRECI SCS 可视化单细胞分选仪
原文链接:长光辰英单细胞分选仪系列耗材——精准分选 · 活性保障 · 全流程解决方案
在实际验证中,以严格厌氧菌Bifidobacterium longumNCC 2705为模型菌株,在厌氧条件下完成样本处理、单细胞分选及培养。通过显微确认目标细胞后,采用LIFT技术进行单细胞定点转移,并直接衔接厌氧培养体系。结果显示,单细胞分选得率接近100%,培养成功率达到90%,经16S rDNA验证确认获得目标菌株。
严苛厌氧菌单细胞分选、培养
严苛厌氧菌单细胞分选培养后的16S rDNA扩增和测序验证
该结果表明,在严格无氧条件下实现单细胞级分选与扩培是稳定可行的。
在厌氧菌研究中,分选过程是否会影响细胞活性,是决定培养成功率的关键因素。
PRECI SCS 采用激光诱导向前转移(LIFT)技术,在显微视野下实现单细胞定点转移。分选激光作用于芯片薄膜层,通过瞬时能量驱动实现细胞转移,与目标细胞本身不直接接触,从物理层面降低分选过程中对单细胞的损伤风险。
配套的HoneyArray 微阵列分选芯片通过有序微单元结构维持细胞处于液态环境,有助于保持厌氧菌的生理状态,并提高后续培养成功率。
这种“可视确认+ 无接触转移 + 液态维持”的组合模式,使厌氧单细胞分选在保证精准性的同时,更好地兼顾细胞活性与后续扩培需求。
长光辰英厌氧单细胞前处理和分选平台
厌氧微生物的研究价值日益凸显,但其分离与培养始终是制约功能解析的重要环节。通过PRECI SCS 可视化单细胞分选仪与HoneyArray微阵列分选芯片的组合,并结合成熟的厌氧操作平台搭建经验,研究者能够在严格无氧条件下完成单细胞级精准分选与活体扩培,为肠道微生物、环境功能菌及难培养微生物研究提供稳定可靠的技术支持。
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