收藏备用 | 液相色谱峰分离度变差？别慌！这份超全解决指南为您奉上→

1.色谱柱/保护柱使用时间久了，填料逐渐老化，自然而然柱效下降。

2.色谱柱/保护柱使用过程中，特别是流动相不过滤、样品没有净化和不过滤，流动相中的残留物和样品中强保留物逐步堆积在色谱柱上造成色谱柱/保护柱污染，让色谱柱柱效下降。

3.使用过程中操作不当，流动相溶剂选择不当会加快柱床塌陷，从而使得色谱柱柱效下降，分离度变差。

再生或更换色谱柱：反向冲洗（若允许），或用适当溶剂清洗（如高比例有机相、稀酸/碱）。 

1.样品配置浓度过大或者进样量过大超过色谱柱载量，使得峰过载，比较宽，从而造成分离度变差。

2.样品没有使用流动相溶解，而使用溶剂强度过高的溶剂溶解样品，造成溶剂效应，导致峰形展宽或分裂，分离度变差。

3.样品没有经过前处理，干扰杂质多，不能分开，使得分离度变差。  

1.柱温设定不对 ，特别是温度比较敏感物质，改变温度使得在色谱柱的保留能力变化，分离度变差。

2.输液泵比例设定不对 ，比例不一样，物质的保留能力也不一样，这样也会造成分离度变差。

建立方法需保存，调用方法时仔细。

1.使用梯度洗脱程序时，做完一次样品后需要进行重新平衡，保持物质出峰试剂一致，如果平衡时间不足，组分会提前出峰，使得分离度变差。

2.安装色谱柱时选择错误，安装错误的色谱柱，使得分离度变差。