Anti-Flag亲和纯化凝胶 ——IP/蛋白纯化好帮手

Anti-Flag亲和纯化凝胶（20584ES）由高质量的鼠源IgG2b单克隆抗体与4%高度交联的琼脂糖凝胶通过供价偶联制备，本产品具有较高的Flag标签融合蛋白加载容量（至少为1.1 mg protein/mL凝胶），杂蛋白非特异结合少，可用于带有Flag标签的融合蛋白免疫沉淀（IP）和纯化。

Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel（Anti-Flag亲和纯化凝胶）可结合Met修饰的N端Flag融合蛋白（Met-FLAG–Protein），N端Flag融合蛋白（FLAG–Protein），C端Flag融合蛋白（Protein-FLAG）。

高特异性：选用高质量的鼠源IgG2b单克隆抗体，能够特异性吸附Flag蛋白序列。

高收率，高纯度：得到高纯度的Flag标签蛋白

高结合载量：载量≥1.1mg蛋白/mL凝胶

结合蛋白类型多：Met-FLAG-Protein，N端FLAG-Protein，C端FLAG-Protein

用途广泛：可用于蛋白质纯化或IP

1）产品性能验证：Anti-Flag亲和纯化凝胶(20584ES)纯化原核表达的Met修饰的N端Flag融合蛋白，N端Flag融合蛋白，C端Flag融合蛋白。

 图1.Yeasen Anti-Flag亲和纯化凝胶纯化结果跑胶图

a：Flag-N    b：Flag-M    c：Flag-C

M：蛋白Marker;1：发酵菌破碎上清原液；2：发酵菌破碎上清柱后穿透；3：洗脱（pH2.7洗脱1）；4：洗脱（pH2.7洗脱2）；5：洗脱（pH2.7洗脱3）；6：洗脱（pH2.7洗脱4）；7：纯化后凝胶（pH2.7洗脱）；8：洗脱（pH12洗脱1）；9：洗脱（pH12洗脱2）；10：洗脱（pH12洗脱3）；11：洗脱（pH12洗脱4）；12：纯化后凝胶（pH12洗脱）

2）翌圣Anti-Flag亲和纯化凝胶(20584ES)与国外进口品牌S*纯化对比测试。

图2.Yeasen（a) PK进口品牌S*(b)Anti-Flag凝胶对比测试跑胶图

M：蛋白Marker；1：Flag-N蛋白柱前原液；2：Flag-N蛋白柱后穿透；3：洗脱（pH2.7洗脱）；4：洗脱（pH12洗脱）

图3.Yeasen（a) PK进口品牌S*(b)Anti-Flag凝胶每ml凝胶纯化蛋白得率对比测试结果

结论：与国外竞品sigma对品,20584ES的载量和目的蛋白得率均明显高于竞品。

3）翌圣Anti-Flag亲和纯化凝胶(20584ES)与品牌G*纯化低表达量蛋白对比测试。

图4.Yeasen Anti-Flag亲和纯化凝胶纯化低表达量蛋白结果跑胶图

a：Flag-N    b：Flag-M    c：Flag-C

M：蛋白Marker；1：Flag-C蛋白柱前原液；2：Flag-C蛋白柱后穿透；3：洗脱（pH2.7洗脱）；4：洗脱（pH12洗脱）5：洗脱（1×Flag多肽洗脱）;6：纯化后凝胶（pH2.7洗脱）；7：纯化后凝胶（pH12洗脱）；8：纯化后凝胶（1×Flag多肽洗脱）

图5.Yeasen（a) PK品牌G*(c)Anti-Flag凝胶对比测试跑胶图

M：蛋白Marker；1：Flag-C蛋白柱前原液；2：Flag-C蛋白柱后穿透；3：洗脱（pH2.7洗脱）；4：洗脱（pH12洗脱）5：洗脱（1×Flag多肽洗脱）;6：纯化后凝胶（pH2.7洗脱）；7：纯化后凝胶（pH12洗脱）；8：纯化后凝胶（1×Flag多肽洗脱）

结论：在目的蛋白表达量极低的条件下，我们凝胶得到的目的蛋白纯度明显优于竞品。