目前,大约70-80%的抗体使用Protein A、Protein G亲和层析进行纯化。Protein A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质,它含有5个可以和抗体IgG分子的Fc段特异性结合的结构域,能特异性地与人和哺乳动物抗体(主要是IgG)的Fc区结合。Protein G是一种源自链球菌G族的细胞表面蛋白,为三型Fc受体。其通过类似于Protein A 的非免疫机制与抗体的Fc段结合。像Protein A一样,Protein G可以与IgG的Fc 区域特异性结合。
将Protein A、Protein G共价偶联在固体载体如琼脂糖珠或丙烯酸树脂小珠上,直接用以做免疫沉淀(IP)或者免疫共沉淀(Co-IP)来进行蛋白功能相关研究,或者直接装在层析柱上来纯化单克隆或者多克隆抗体。在抗体纯化中,洗涤是很关键的一步,直接关系到纯化蛋白的量和纯度。目前,市场上绝大部分重组Protein A、Protein G柱纯化时所用的洗脱液一般为pH=8.0的PBS溶液反复洗涤。艾美捷在此为您推荐abbkine的耐碱性Protein At亲和填料,该填料可以耐受0.1-0.5 M NaOH进行在位清洗,节约洗涤时间和试剂成本。
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当然,除了耐碱性的填充柱,艾美捷还能为您提供更多其他优质的亲和纯化柱和试剂盒,以后会一一给诸位童鞋介绍哟。大家都知道,在洗脱的时候,较低的pH会使得收集的蛋白质很有可能变性,或者是复性困难。在此,艾美捷也为大家推荐一款Immunoreagents公司的LigaTrap亲和纯化产品。
LigaTra技术开发了一种新颖的ZL系列亲和配体,专用于纯化来自各种物种的单克隆和多克隆免疫球蛋白。除了物种特异性配体之外,优点包括在比蛋白A和G(pH≤3.0)更高的pH(pH 4.0)下洗脱抗体的能力,因此降低了pH敏感性抗体沉淀和失活的可能性。
如果童鞋们对这些个产品有兴趣的话,可以跟艾美捷联系,更多更全的产品资料,就等您过来啦。

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