使用离心机进行样品纯化的方法介绍
离心是在离心机上利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或浮力密度的差异进行分离、浓缩和提纯的一种方法。离心机技术已经广泛应用于化工、医药、食品、煤炭、生物工程、核原料提纯等多个领域。可分为超速、高速、低速,多功能,大容量,微量,等不同型号的离心机,是生物化学和分子生物学不可缺少的技术手段,广泛应用于生物大分子、细胞、病毒、细胞器,核酸、蛋白质,纳米颗粒等不同样品的分离纯化。
●离心方法概述:
1.差分离心:利用不同大小和不同密度的颗粒沉降速度的差异进行分离。
2.速率-区带离心:混合样品以很薄的一层铺在梯度液的上部,在离心过程中由于不同组份“颗粒”在梯度液中沉降速率的差别,而在离心的某一时刻形成了数个“区带”。离心过程在“Z垂”的样品(或者说沉降得Z快的样品)形成沉淀前就停止了,属于不完全的离心,在合适的时间停止离心。样品是在沉降过程中,不是在形成沉殿后来分离样品,并要求梯度液的Zda密度必须少于样品颗粒的密度。该方法使用的转速低,适用于密度相似,但分子量/形状不同的样品的分离纯化
3.等密度梯度离心:等密度离心是依赖于样品颗粒的不同密度来分离的,密度梯度可以预形成,也可以自形成,是Z 高纯度分离的主要手段之一。样品Z 后停止在与其相同的等密度区,是属于完全的离心,所需转速高,离心时间长,适用于分子量相似,密度不同的样品分离。
●无论是哪种样品,都可以使用如下himac离心机,或Dynamica台式离心机,NuAire台式离心机进行上述不同方法及样品的离心纯化:
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