在腺病毒的生产过程中，会含有宿主细胞蛋白、游离DNA、血清蛋白等杂质，这些杂质不仅会影响感染性重组腺病毒(rAds)的质量及外源基因的表达，也有细胞毒性和免疫反应。因此，对粗制的腺病毒载体进行纯化是必要的，但是目前开发一种简单、快速的方法纯化稳定的 rAds 仍然是一个挑战。
来自日本筑波研究所和中国科学院生物化学与细胞生物学研究所的研究人员分享了一种快速纯化用于体内和体外基因功能研究的 5 型感染性腺病毒（Ad5）的方法：使用氯化铯密度梯度超速离心法，4°C， 604,000 xg，离心 15 分钟，然后进行切向流过滤。
其中，密度梯度超速离心使用的是 Himac 微型超速离心机老古董 CS120GX（1990 年问世，是 CS150NX 的前身）。
纯化方法及操作流程图如下：
▲ 纯化流程图
通过分析收集到的各组分 Ad5 腺病毒滴度、纯化倍数及回收率等条件，可以看出，通过密度梯度超速离心和 TFF 超滤相结合的方法可以得到高质量的 Ad5 腺病毒，病毒感染滴度几乎不受影响，且回收率超过 60%。
▲ 各组分腺病毒样品结果分析
一般说来，使用传统方法纯化腺病毒需要耗时 2~3 天的时间，本文中的方法使用密度梯度超离和 TFF 超离相结合的方法，在不影响病毒活性的同时，可以在 2h 内完成感染性腺病毒的高质量纯化。此方法对于实验室腺病毒纯化及基因治疗药物的临床前研究都很有帮助。
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