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《食品安全国家标准 食品微生物学检验 乳酸菌检验》2023版与2016版新旧对比
发布：深圳逗点生物技术有限公司浏览次数：82在过去的9月份，食品安全标准与监测评估司官网发布了GB?4789.35-2023《食品安全国家标准?食品微生物学检验乳酸菌检验》等85项食品安全国家标准和3项修改单的公告。
据悉，新标准将代替GB4789.35-2016《食品安全国家标准?食品微生物学检验乳酸菌检验》，并于明年3月6日起正式实施。
与2016版标准相比，2023版新标准主要变化如下▼：
往下滑?为您总结主要变化
一、范围
本标准规定了含乳酸菌食品中乳酸菌(lactic acid bacteria)的检验方法。本标准适用于含活性乳酸菌的食品中乳酸菌的检验。
无变化
2014年公布的《可用于食品的菌种名单》中还有乳球菌属和片球菌属。现在不少乳品生产企业在发酵乳产品中添加了这些球菌。因此，进行发酵乳制品的乳酸菌检验时，无法避免这两类球菌造成的干扰。
二、术语与定义
2.1 乳酸菌lactic acid bacteria
一类可发酵糖主要产生大量乳酸的细菌的通称，不能液化明胶、不产生咧喋、革兰氏阳性、无运动、无芽孢、触酶阴性、硝酸还原酶阴性及细胞色素氧化酶阴性反应的细菌。本标准中乳酸菌主要为乳杆菌属,双歧杆菌属和嗜热链球菌。
变化解析
在2023版新标准中，修改了乳酸菌的定义，并增加其生化现象的描述。
三、设备与材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,2023版新标准中其他设备和材料列举如下：
SDC-3000-D
多管旋涡混匀仪
TC65
便携式恒温培养箱
变化解析
1）增加设备：厌氧装置、涡旋混匀仪、实时定量PCR仪、恒温水浴锅或金属浴、离心机、微量移液器和灭菌吸头、无菌平皿、PCR管等；
2）电子天平精度由0.01g改为0.001g；主要是为了保证对于那些活菌菌种制品的称量准确性；
3）冰箱温度范围由2℃~5℃改为2℃~8 ℃。
四、培养基和试剂
4.1 稀释液:见附录A中 A.1（此为新增）
4.2 MRS琼脂培养基:见附录A中A.2。
4.3 莫匹罗星锂盐和半胱氨酸盐酸盐改良MRS琼脂培养基:见附录A中A.3。
4.4 MC培养落(Modified Chalmers 培养基):见附录A中A.4。
4.5 0.5%蔗糖发酵管:见附录A中A.5。
4.6 0.5%纤维二糖发酵管:见附录A中A.5。
4.7 0.5%麦芽糖发酵管:见附录A中A.5。
4.8 0.5%甘露醇发酵管:见附录A中A.5。
4.9 0.5%水杨苷发酵管:见附录A中A.5。
4.10 0.5%山梨醇发酵管:见附录A中A.5。
4.11 0.5%乳糖发酵管:见附录A中A.5。
4.12 七叶苷发酵管:见附录A中A.6。
4.13 革兰氏染色液:见附录A中A.7。
4.14 生理盐水:见附录A 中A.8。
4.15 DNA提取液:见附录A中 A.9（此为新增）
4.16 10XPCR缓冲液:见附录A中 A.10（此为新增）
4.17 莫匹罗星锂盐(C26HIx;O,- Li):化学纯。
4.18 半胱氨酸盐酸盐(C: I1;ClNO,S):纯度99 %。
4.19 dNTPs（此为新增）
4.20 Taq DNA聚合酶:5 U/ pL（此为新增）
4.21 七种乳酸菌引物探针（此为新增）
4.22 灭菌去离子水（此为新增）
变化
在2023版新标准中，增加了培养基：稀释液；这样尽可能避免减少乳酸菌复苏数量；
实时荧光PCR检测用试剂：DNA提取液、10XPCR缓冲液、dNTPs、Taq DNA聚合酶、七种乳酸菌引物探针、灭菌去离子水等。
五、检验程序
变化
2023版中检验程序的修改点是增加了乳杆菌计数，可以看上图红色方框提示部分?
六、操作步骤
6.1 样品制备
变化解析
在2023版新标准中，明显可见的变化是
1）增加了稀释液预热的操作；
2）增加特除技术处理的乳酸菌食品样品的前处理要求；
3）在液体样品处理步骤中，增加拍打均质器的操作。
HN08拍打式均质器
该装置可以有效地分离被包含在固体样品内部和表面的微生物样品，确保无菌袋中混合的样品具有充分的代表性。
6.2 稀释及培养
6.3乳酸菌计数
6.3.1 乳酸菌总数
乳酸菌总数计数培养条件的选择及结果说明见表1。
针对双歧杆菌、嗜热链球菌和乳杆菌的计数，2023版新标准规定如下：
变化解析
1.在2023版新标准中，培养基温度和倾注的培养基量均改为一定范围；
2.培养时间根据培养生长特性可以培养48h至72h。
6.4菌落计数
见GB 4789.2菌落计数部分。
6.5结果的表述
见GB 4789.2计算方法部分。
6.6菌落数的报告
见 GB 4789.2菌落总数的报告部分。
七、结果与报告
根据菌落计数结果出具报告,报告单位以CFU/g(mL)表示。
八、乳酸菌的鉴定（可选做）
2023-10-13相关仪器- 免责声明
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