食品添加剂TBHQ、BHT的HPLC检测方案
TBHQ和BHT属于食品添加剂中的抗氧化剂,能防止或延缓油脂或食品成分氧化分解、变质,提高食品稳定性的物质。但抗氧化剂的添加必须符合我国食品卫生法的规定,过量添加会损害人体健康。例如BIA对大鼠前肖有致癌作用,BHT有YZ人体呼吸酶活性等嫌疑并且可在人体内蓄积。而根据国家标准GB2760相关规定,特丁基对苯二酚(简称“TBHQ”)和二丁基羟基甲苯(简称“BHT”)两种食品添加剂不能添加到糕点或糖果类食品中。
亿鑫仪器推出梯度GX液相色谱仪对油脂食品中常用的抗氧化剂BHA(丁基羟基茴香醚)、BHT(二丁基羟基甲苯)、PG(没食子酸丙酯)和TBHQ (叔丁基对苯二酚)的检测方法,详细方法如下。
1、仪器与试剂
1.1 仪器
梯度液相色谱仪
Vertex色谱柱 4.6 mm×250 mm×5 μm
旋转真空蒸发仪
Millipore Express 反渗透纯水系统
25 ml具塞玻璃离心管
1.2 试剂
正己烷:分析纯
乙腈:色谱纯
异丙醇:分析纯
甲醇:色谱纯
乙酸:分析纯
2、色谱条件
色谱柱:VertexC18(4.6 mm×250 mm×5 μm)
柱温:40℃
流动相:1.5%(体积分数)乙酸-甲醇溶液(A),1.5%(体积分数)乙酸-水溶液(B),
洗脱梯度:0m in-5m in,流动相A为30%,5m in-20m in,流动相A从30%线性增至80%, 20 min-30 min,流动相A为80%;
流速为:1.0mL/min
进样量:25μL
检测波长为:280 nm
3、实验原理
油脂样品用正己烷溶解,用乙睛提取其中的抗氧化剂。提取液经浓缩后,用异丙醇定容,用带紫外检测器的GX液相色谱仪测定,外标法定量。
4、试样溶液的制备
量取样品1g于离心管中,加入5ml乙腈饱和的正己烷盖上盖后于旋涡混合器上充分混匀,再加入10m正己烷饱和的乙腈于旋涡混合器上充分混匀,静置分层,用胶头吸管将乙睛层转人浓缩瓶内,如上操作再用正己烷饱和的乙腈提取两次,合并提取液。
乙腈提取液在40℃下,用旋转真空蒸发器浓缩至约1m L,将浓缩液转至5m L刻度管中,用异丙醇定容至2 mL,用0. 45 um微孔滤膜过滤后进样25 ul测定。
5、抗氧化剂标准溶液谱图
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