八宝粥中黄曲霉毒素B1的测定 -SPE-UPLC-MS/MS法

内容节点: 概述; 实验/设备条件; 样品提取; 实验/操作方法; 实验结果/结论; 仪器/耗材清单

方法：

SPE-UPLC-MS/MS法

基质：

八宝粥

应用编号：

102452

化合物：

黄曲霉毒素B1

固定相：

——

SPE柱：

——

色谱柱：

Leapsil C18 2.7μm 100 x 2.1mm

样品前处理：

1、标准品配制

单标标准储备液：准确吸取一定量的20 ug/mL标准储备液（甲苯：乙腈=98：2配），用乙腈配制成50 ng/mL和500 ng/mL的标准储备液。

2、提取

取5 g八宝粥于50 mL离心管中，加入2 mL水、20 mL乙腈，振荡20 min，加入2 g氯化钠，振荡2 min，6000 rpm离心2 min，取全部乙腈层，待净化。

3、净化

ProElut AFT-3 12mL (Cat#:65915）

(1)上    样：

将待净化液加入柱中，收集流出液；

(2)洗    脱：

加入5 mL乙腈，合并流出液；

(3)重新溶解：

将流出液在40 ℃水浴下减压蒸干，用初始流动相定容至1 mL，混匀，过0.22 umPTFE滤膜，供LC-MS/MS分析。

注：同方法制备基质匹配标准溶液，此方法无需活化小柱。

色谱条件：

4.1 UPLC 条件：

色谱柱：Leapsil C18，100×2.1 mm，2.7 μm (Cat#：86005)

流速：0.3 mL/min     进样量：10 μL      柱温：40 ℃

流动相： A：0.1%甲酸水   B：乙腈

梯度设置：

Time（min）

0

6

7

15

A（%）

90

30

90

90

B（%）

10

70

10

10

4.2 质谱条件：

电离模式：ESI            扫描方式：正离子扫描

检测方式：多反应监测    电喷雾电压：5500 V

雾化气压力：50 psi       辅助气压力：50 psi

气帘气压力：20 psi       离子源温度：500 ℃

定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表

药物名称

定性离子对

定量离子对

碰撞气能量/eV

去簇电压/V

（m/z）

（m/z）

(母离子/子离子)

(母离子/子离子)

黄曲霉毒素B1

313.0/241.0

313.0/241.0

51

78

文章出处：

天津应用实验室

关键字：

八宝粥、黄曲霉毒素B1、SPE-UPLC-MS/MS法

摘要：

本方法适用于八宝粥中黄曲霉毒素B1的检测，定量限0.1ug/kg。

DM-P-141八宝粥中黄曲霉毒素B1的测定-SPE-UPLC-MS/MS法

黄曲霉毒素是毒素较强的一类生物毒素，也是强致癌物。它是由黄曲霉菌和寄生曲霉菌等多种真菌产生的一类代谢产物，一群结构相似的化合物。Z为常见的有 B1、B2、G1 、G2、M1 ，其中 B1的存在量与毒性都是Zda的。作为一种天然生物毒素，其广泛存在于粮油食品中，其中以花生、玉米和大米的污染Z为严重，八宝粥是一种由多种谷类和豆类混合的食品，作为ZG的传统食品，历史悠久，目前关于八宝粥中黄曲霉毒素B1的检测方法报道较少。迪马科技开发的《八宝粥中黄曲霉毒素B1的测定-SPE-UPLC-MS/MS法》采用净化柱净化样品，定量限0.1 μg /kg。

本方案具有：前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好、净化效果优异等特点；避免了免疫亲和柱容易受环境影响而引起黄曲霉毒素回收率低和净化效果不好的弊端，保证了实验结果的重现性和准确性；过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低，能被很多企事业单位采用。

专用柱优势

ProElut AFT-3柱由2种吸附剂按照一定的比例分层填装而成，采用不同作用机理去除杂质，同时对黄曲霉毒素没有不可逆吸附，保证了样品的净化效果及回收率；本产品是商品化的成品柱，吸附剂稳定性好，不受外界环境因素影响，保证实验结果的重现性和准确性；过柱过程操作步骤简单，节省时间，提高了工作效率。

图谱：

(1)上样：	将待净化液加入柱中，收集流出液；
(2)洗脱：	加入5 mL乙腈，合并流出液；
(3)重新溶解：	将流出液在40 ℃水浴下减压蒸干，用初始流动相定容至1 mL，混匀，过0.22 umPTFE滤膜，供LC-MS/MS分析。

药物名称	定性离子对	定量离子对	碰撞气能量/eV	去簇电压/V
	（m/z）	（m/z）
	(母离子/子离子)	(母离子/子离子)
黄曲霉毒素B1	313.0/241.0	313.0/241.0	51	78