鸡精和味精中酸性橙Ⅱ号的检测 SPE-HPLC法-ProElut NH2+Diamonsil C18(2) 参考《SN/T 3536-2013 出口食品中酸性橙Ⅱ号的检测方法》

内容节点: 概述; 实验/设备条件; 样品提取; 实验/操作方法; 实验结果/结论; 仪器/耗材清单

方法：

SPE-HPLC法

基质：

鸡精和味精

应用编号：

102406

化合物：

酸性橙Ⅱ号

固定相：

——

SPE柱：

ProElut NH2 500mg / 6mL 30/pk

色谱柱：

Diamonsil C18(2) 5μm 250 x 4.6mm

样品前处理：

1、标品配制

(1) 储备液100 mg/mL，准确称取各标准品，用水配制成100 ug/mL的储备液。

(2) 中间液10 ug/mL，分别吸取各单标标准储备液，用水配制成10 ug/mL的中间液。

2、提取

(1) 2 g样品，加入20 mL 氨水乙醇溶液，超声提取10min，振荡5 min， 6000 rpm离心2 min，收集上清液；

(2) 下面残渣再用20 mL氨水乙醇溶液重复提取一次，合并两次上清液；

(3) 取出20mL上清液，40℃下减压蒸至低于5mL，用水定容至10 mL，混匀，准备净化。

3、净化

ProElut 500 mg/6 mL NH₂（Cat#63305）

(1)活    化：

依次向柱中加入6 mL甲醇、6 mL2%甲酸水，弃去流出液；

(2)上    样：

将待净化液加入柱中，弃去流出液；

(3)淋    洗：

(4)洗    脱：

向柱中一次加入6 mL2%甲酸水和6 mL甲醇，弃去流出液；

向柱中加入6mL10%氨水甲醇，收集流出液；

(5)定    容：

将洗脱液在50℃下氮吹近干，用水定容至1 mL，上机分析。

色谱条件：

色谱柱：Diamonsil C18(2) 250×4.6 mm，5 μm（Cat.#：99603）

流速：1.0 mL/min，进样量：20 μL，柱温：35 ℃，

检测器：UV 484 nm

流动相：甲醇：0.02 mol/L乙酸铵=65:35

文章出处：

天津应用实验室

关键字：

鸡精和味精、酸性橙Ⅱ号、 SPE-HPLC法-、ProElut NH2、Diamonsil C18(2) 、《SN/T 3536-2013 出口食品中酸性橙Ⅱ号的检测方法》

摘要：

迪马科技开发的《鸡精和味精中酸性橙Ⅱ号的检测》，依据《SN/T 3536-2013 出口食品中酸性橙Ⅱ号的检测方法》，采用氨水乙腈提取、ProElut NH2固相萃取柱净化、GX液相色谱法检测。本方案具有：前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好、净化效果优异等特点；定量限是0.1 mg/kg，与标准方法一致；过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低

图谱：

(1)活化：	依次向柱中加入6 mL甲醇、6 mL2%甲酸水，弃去流出液；
(2)上样：	将待净化液加入柱中，弃去流出液；
(3)淋洗： (4)洗脱：	向柱中一次加入6 mL2%甲酸水和6 mL甲醇，弃去流出液；向柱中加入6mL10%氨水甲醇，收集流出液；
(5)定容：	将洗脱液在50℃下氮吹近干，用水定容至1 mL，上机分析。