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紫外分析仪分为很多系列,有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列,不同的紫外分析仪有不同的用途。紫外分析仪采用不同波长引进电泳分析、检测,PCR产物检测,DNA指纹图谱分析,纸层分析或薄层分析等。
解决方法
质量产物呈弥散状
1、检查凝胶的制备是否使用了正确的缓冲液。
2、电泳时保持比较低的电压。
3、将DNA浓度降低。
4、将凝胶上样量减少。
5、将循环数减少。
带谱重复
仅对主要条带进行考虑。
染色后太强的凝胶背景
1、产物在更高浓度的琼脂糖凝胶、专业纯凝胶或聚丙烯酰胺凝胶上进行分离
2、将染色时间减少。
3、延长凝胶脱色时间。
没有扩增或扩增偏差
1、对母液重新配制,将引物浓度提高或者使用不同的引物。
2、在PCR程序中的第二部分将退火时间延长,或者将升温转换步骤之间的速率降低。
3、将每个反应中的Taq聚合酶的浓度提高。
4、将新的组分补充加入,使用高压将该灭菌的灭菌。
5、某一组分在部分或全部管中缺少,为了对所有的PCR组分都已加入进行确定,重复少量几个反应。
6、PCRYZ物能够和DNA一起纯化,使得DNA的浓度发生改变。
7、将一个清洗步骤(如苯酚抽提)加入到DNA分离中。
8、对新的DNA溶液进行稀释。
单一带
对引物序列不是回文结构进行确认,使用不同的引物。
很难分辨结果
1、对Taq聚合酶活性进行检查
2、对DNA浓度进行改变。
3、对Taq聚合酶缓冲液进行更换。
4、对引物进行检查
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