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- 【导读】中性粒细胞(PMNs)的吞噬作用在抵御细菌、真菌等病原微生物感染过程中发挥重要作用。吞噬作用过程包括几个主要阶段:趋化,黏附,内吞,胞内氧依赖性(呼吸爆发)和氧非依赖性的杀伤。正常...
中性粒细胞(PMNs)的吞噬作用在抵御细菌、真菌等病原微生物感染过程中发挥重要作用。吞噬作用过程包括几个主要阶段:趋化,黏附,内吞,胞内氧依赖性(呼吸爆发)和氧非依赖性的杀伤。正常条件下细菌感染后,机体PMNs被激活,PMNs吞噬和氧化功能增强是机体重要的天然免疫防御机制。因此通过观察PMNs的活化状态可以帮助了解机体细菌感染的状况。
爱必信(Absin)提供的试剂盒采用流式细胞仪(FMC)检测PMNs功能,用PMA作为GX刺激剂,以二氢若丹明作为荧光底物。中性粒细胞受刺激后产生反应性氧化物,氧化二氢若丹明为可发出荧光的若丹明123。这个反应可以由溶血素终止。产生的反应性氧化物可以用荧光强度来表示。PMNs活化和机体的天然免疫能力。可用于研究在各种病理情况下如感染、自身免疫疾病、应急、肿瘤、手术等中中性粒细胞的功能改变及药物的效果评价。该试剂盒不仅用于人,还可以用于小鼠、大鼠、兔、狗、牛等其他种属。
操作步骤:1.无菌肝素抗凝的全血50ul,加刺激剂(如PMA)50ul,37°C孵育15分钟。2.加二氢若丹明25ul,37°C避光孵育5分钟3.溶血素用无菌去离子水1:10稀释,加稀释后的溶血素1ml,室温避光溶血15分钟4.PBS洗涤2次,1500rpm离心5分钟,去上清液5.加0.5mlPBS重悬细胞,上流式细胞仪检测实验结果示例图:图1前向角、侧向角点状图谱图2静止、活化中性粒细胞FL1荧光柱状图谱仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
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- 2004-08-23 09:23:04
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