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Geno/Grinder高通量组织研磨机用于细菌裂解

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概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单


HG-600(原2010)Geno/Grinder

高通量可编程组织研磨机

Geno/Grinder专为快速细胞破碎、细胞裂解、组织匀浆和 QuEChERS方法量身定制,速度快,通量大,可一次同时研磨 576 个样品。研磨样品包括植物的根、茎、叶、花、果、种子和某些动物组织; 由于Geno/Grinder?独特的垂直摇动运动非常强烈,许多种子和其他形式的植物组织也可以在滴定板、罐子、试管或小瓶中粉碎,每个孔、罐子、管子或小瓶需要一到两个磨球。彩色触屏控制面板,角度可调方便操作,可编辑运行时间、速率、间隔、循环数等参数以适应不同样品,可存储多达500 种研磨方法。


本文旨在对Geno/Grinder进行测试,以确定该技术是否可用于裂解细菌或其他细胞。

对Geno/Grinder进行测试,以确定该技术是否可用于裂解细菌或其他细胞。

标准96孔板与400-600μL二氧化硅研磨珠配合使用。研磨珠可以用多种方式放入到96孔滴定板中。在这种情况下,用研磨珠将微量移液管尖端填充到标记处,并将每个移液管头倒入滴定板孔中。在本应用中将每个孔加入约0.4g硅珠。其他类型研磨珠也可在市场轻松购买到。

实验步骤:

  1. 本次实验用250-500mL细菌进行。一种是革兰氏阴性耐盐单胞菌,另一种是革兰阳性杆菌;

  2. 这两种细菌都在37℃下生长到晚熟状态;

  3. 以7000RPM离心10分钟;

  4. 向每个孔中加入0.4g二氧化硅珠,并密封板;

  5. 在Geno/Grinder中以每分钟1450次的垂直震荡速度处理样品;

  6. 在1-12分钟时间内研磨96孔板,以1分钟为间隔取样;

  7. 在260nm波长下测量研磨后培养滤液的吸收率;

  8. 以下数据由三组独立的96孔板研磨后测定结果平均值组成。



结论

Geno/Grinder能够用400-600μL二氧化硅研磨珠作为研磨介质,在96孔滴定板中破碎细菌细胞。随着研磨时间的增加,培养滤液的吸光度明显增加,表明研磨过程中核酸的释放。6至9分钟的研磨时间似乎适合于产生可测量量的核酸。




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