检测尿激酶的纤维蛋白平板制作方法
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我要做一个检测尿激酶的纤维蛋白平板,可不知道怎么做?希望在这里能够有人回答我的问题,告诉我具体的操作方法,我将会非常感谢你的支持。... 我要做一个检测尿激酶的纤维蛋白平板,可不知道怎么做?希望在这里能够有人回答我的问题,告诉我具体的操作方法,我将会非常感谢你的支持。 展开
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- 仙仙0146 2013-05-17 00:00:00
- 这里有rtPA的平板检测方法,尿激酶要比这个简单,请酌情修改。 配制母液 1. Tris-HCl缓冲液 50mM Tris-HCl, pH7.5, 100mM NaCl Tris Base: HCl =50:40; Tris base 2000mM (dd H2O) NaCl : 1000mL× 0.1 M×58.44 = 5.84 g/L 115℃×10min 高压蒸气灭菌。 2. 1.0% Agar 1000mL10g Agar条状物,以500mL 50mM Tris-HCl, pH7.5, 100mM NaCl 加热溶解,微波加热辅以煤气加热,注意不要沸出, 待完全溶化透明后以50mM Tris-HCl, pH7.5, 100mM NaCl 定容至1000mL,继续加热至刚好沸腾,摇匀,于90-100℃抽滤。抽滤时加一层Φ6-10cm 定性滤纸进行真空抽滤, 大约200mL换一层滤纸。按计算的倾倒体积分装至100mL以去离子水充分洗干净的三角烧瓶中,115℃×10min 高压蒸气灭菌。……………… 详细资料请参考:on http://product.bio1000.com/100228/
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平板接种仪怎么检测:提升微生物检测精度的关键
平板接种仪作为微生物检测中的重要工具,广泛应用于食品、药品以及环境检测领域。其主要功能是将微生物样本均匀接种于培养基表面,为微生物的生长与分析提供合适的条件。在日常使用中,如何确保平板接种仪的精度和可靠性,成为影响实验结果的关键因素。本文将深入探讨平板接种仪的检测方法及其在微生物检测中的重要性,帮助实验人员更好地理解其工作原理及应用要求。
一、平板接种仪的工作原理
平板接种仪是通过机械装置将微生物悬液精确地分布到培养基表面,以形成单一菌落。接种仪通常由自动或手动控制的装置组成,通过精细控制接种量和均匀度,确保每次接种的准确性。其工作原理基于微生物的生长特性,依靠平板培养基为微生物提供营养,借助接种仪的均匀分布,确保微生物能够在适当的环境中形成分离的菌落,便于后续的检测和分析。
二、平板接种仪的检测方法
1. 接种量的检测
接种量直接影响到微生物的检测结果。过多的接种量可能导致菌落的交叉生长,影响分离度,而接种量不足则可能导致菌落无法形成。因此,在每次接种前,需对接种仪的性进行检查。通常使用标准菌液进行接种测试,比较实际接种量与预期接种量的误差,确保接种量的准确性。
2. 接种均匀性的检测
接种的均匀性是影响微生物生长和后续分析的另一个关键因素。为了确保接种均匀性,可以采用培养基的显微镜观察法或染色法,通过观察接种后的培养基表面,检查微生物是否均匀分布。如果发现接种不均匀,可以调整接种仪的转速、压力或喷头位置等参数。
3. 精度校准与重复性测试
平板接种仪的精度直接影响检测结果的可靠性。在长时间使用过程中,接种仪可能因机械磨损、环境变化或操作不当导致性能衰退。为了保证接种精度,需要定期进行精度校准,通常采用标准菌株进行重复接种实验,检测每次接种的误差范围。如果误差过大,需要对接种仪进行调校或更换相关部件。
4. 仪器的温控与环境监测
平板接种仪的性能不仅仅取决于机械部分,环境条件也对微生物的接种结果产生重要影响。温度过高或过低都可能影响微生物的生长速度和培养效果,因此需要定期监测接种仪的环境温度,并确保温控系统稳定运行。使用温湿度计和环境监控设备可以有效确保接种环境的稳定性。
三、平板接种仪检测的重要性
准确的平板接种是微生物实验中的基础,任何细小的误差都可能导致检测结果的不准确,进而影响实验结论。在实际应用中,平板接种仪的检测不仅有助于提高实验的可重复性,还能够减少因操作不当带来的错误,确保微生物分析结果的可靠性。
随着微生物检测需求的不断提升,平板接种仪的检测技术也在不断发展。现代技术如自动化检测系统、计算机辅助分析等正在逐步应用于平板接种仪的性能监测中,使得仪器的操作更加智能化和精确化。这些技术的应用为提高微生物检测效率和准确性提供了有力支持。
四、总结
平板接种仪在微生物检测中的应用无疑是不可或缺的,而其检测精度和可靠性直接关系到实验结果的准确性。在使用过程中,通过定期的检测、均匀性评估、精度校准和环境监测,可以确保平板接种仪的正常运行,从而提高微生物分析的质量与效率。随着技术的不断进步,平板接种仪的性能将得到进一步提升,为微生物检测领域带来更多的突破与创新。
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- 使用UHPLC-SEC色谱柱优化尿激酶分析方法
尿激酶是从新鲜人尿中提取的,或从人肾组织培养中获得的一种酶蛋白,是临床上一种常用的溶解血栓的药物。它由高分子量尿激酶 (Mw=54000) 和低分子量尿激酶 (Mw=33000) 组成的混合物。
为使尿激酶达到ZJ分离效果,本应用使用粒径2 µm的TSKgel UP-SW2000超GX液相尺寸排阻色谱柱与G2000SWXL色谱柱,对尿激酶进行了对比分析。
溶液的配制
色谱流动相配制:0.2 mol/L磷酸二氢钠水溶液,用磷酸调pH至3.0 。
样品:尿激酶测试方法优化溶液浓度:2.5 mg/mL
分析条件
仪器:Thermo Ultimate3000
色谱柱1:TSKgel UP-SW2000 (2µm, 4.6 mmI.D.×30cm)
色谱柱2:TSKgel G2000SWXL (5µm, 7.8 mmI.D.×30cm)
流速:0.18 mL/min for UP-SW2000、0.5 mL/min for G2000SWXL
柱温:25℃
样品盘温度:10℃
进样量:10 µL
检测器:紫外检测器@280nm
分析结果
图1. UP-SW2000色谱柱分离谱图
图2. G2000SWXL色谱柱分离谱图
结果与讨论:
相较于G2000SWXL色谱柱,TSKgel UP-SW2000对多聚体、高分子量尿激酶、低分子量尿激酶的分离度均有所提高。
同时对比了等量溶质不同进样体积,高浓度样品小进样量,分离度较好一些。UP-SW2000色谱柱可满足药典要求:高分子量尿激酶峰面积占90%以上,且与低分子量尿激酶分离度大于1.0。
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