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- 梅眉辣挤诱犊 2017-10-03 00:00:00
- 庞大洛沙、未十二等、鲁特热斯、格利克斯。 其他还有潘那利番茄(Lyopersicon pennellii),类番茄茄和里基茄(Solanum lycopersicvudes Dun,产量高。果实整齐,为大型果、粉红、黄三种颜色。植株生长势强、苹果青质粒dna的碱裂解法提取与纯化在什么地方应用 耐干旱、耐湿能力弱,不耐低温和弱光,喜肥沃的沙质土壤,具有红,适合集约栽培。它的品种主要有卡德大红、世界一、武昌大红、粉红甜肉、桔黄佳辰
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- 请哪位高人帮忙找道这篇的中文:PreparationofPlasmidDNAbyAlkalineLysiswithSDS:Minipreparation(题)或者帮忙翻译一下,要求不要用电脑直接翻译,总之通顺准确即可。急需截止25号。... 请哪位高人帮忙找道这篇的中文:Preparation of Plasmid DNA by Alkaline Lysis with SDS: Minipreparation(题) 或者帮忙翻译一下,要求不要用电脑直接翻译,总之通顺准确即可。急需截止25号。 原文如下: 1. Inoculate 2 ml of rich medium (LB, YT, or Terrific Broth) containing the appropriate antibiotic with a single colony of transformed bacteria. Incubate the culture overnight at 37°C with vigorous shaking. 2. Pour 1.5 ml of the culture into a microfuge tube. Centrifuge at maximum speed for 30 seconds at 4°C in a microfuge. Store the unused portion of the original culture at 4°C. 3. Remove the medium by aspiration, leaving the bacterial pellet as dry as possible. 4. Resuspend the bacterial pellet in 100 μl of ice-cold Alkaline lysis solution I by vigorous vortexing. 5. Add 200 μl of freshly prepared Alkaline lysis solution II to each bacterial suspension. Close the tube tightly, and mix the contents by inverting the tube rapidly five times. Do not vortex! Store the tube on ice. 6. Add 150 μl of ice-cold Alkaline lysis solution III. Close the tube and disperse Alkaline lysis solution III through the viscous bacterial lysate by inverting the tube several times. Store the tube on ice for 3-5 minutes. 7. Centrifuge the bacterial lysate at maximum speed for 5 minutes at 4°C in a microfuge. Transfer the supernatant to a fresh tube. 8. (Optional) Add an equal volume of phenol:chloroform. Mix the organic and aqueous phases by vortexing and then centrifuge the emulsion at maximum speed for 2 minutes at 4°C in a microfuge. Transfer the aqueous upper layer to a fresh tube. 9. Precipitate nucleic acids from the supernatant by adding 2 volumes of ethanol at room temperature. Mix the solution by vortexing and then allow the mixture to stand for 2 minutes at room temperature. 10. Collect the precipitated nucleic acids by centrifugation at maximum speed for 5 minutes at 4°C in a microfuge. 11. Remove the supernatant by gentle aspiration as described in Step 3 above. Stand the tube in an inverted position on a paper towel to allow all of the fluid to drain away. Use a Kimwipe or disposable pipette tip to remove any drops of fluid adhering to the walls of the tube. 12. Add 1 ml of 70% ethanol to the pellet and invert the closed tube several times. Recover the DNA by centrifugation at maximum speed for 2 minutes at 4°C in a microfuge. 13. Remove all of the supernatant by gentle aspiration as described in Step 3.Take care with this step, as the pellet sometimes does not adhere tightly to the tube. 14. Remove any beads of ethanol that form on the sides of the tube. Store the open tube at room temperature until the ethanol has evaporated and no fluid is visible in the tube (5-10 minutes). 15. Dissolve the nucleic acids in 50 μl of TE (pH 8.0) containing 20 μg/ml DNase-free RNase A (pancreatic RNase). Vortex the solution gently for a few seconds. Store the DNA solution at -20°C. 展开
2008-11-19 03:37:39
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