碱裂解提取质粒DNA可以酶切吗

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  lqqqianqi 2017-01-26 00:00:00

  碱裂解法是提取质粒的Z常用也Z有效的方法，是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异达到分离目的. 原理：高pH使质粒DNA和染色体DNA变性，同时沉淀蛋白质.再将pH值调至中性，质粒DNA较小，很容易复性成双链.而染色体DNA较大，缠结成网状不溶物质，从而可以通过离心除去. 方法：依次加入下面三种溶液: 溶液1：葡萄糖 50 mmol/L，EDTA 100 mmol/L，Tris-Cl 25 mmol/L，溶菌酶5mg/ml，pH 8.0 溶液2：NaOH 0.2 mol/L，SDS 1% 溶液3：5 mol/L KAc 60 ml，冰乙酸 11.5 ml，重蒸水 28.5 ml 其中溶液1作用主要是悬浮菌体，溶液2作用是裂解菌体，释放胞内物质，溶液3是沉淀染色体DNA

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