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　　本生PCR板—96孔板铺板的小技巧

　　96孔板进行铺板的?当细胞用96孔板接种时，细胞经常是不均匀分布。第二天就会发现有些地方出现堆积性生长，而还有不少地方细胞则很稀疏，细胞密集的地方因细胞与细胞之间的接触抑制影响细胞的生长，这样就很难评价干预因素对细胞的作用。因此，将96孔板种均匀也是进行后续实验的提，现将以用的老办法和用的新方法比较一下，以让大家看看各自优缺。

　　1、老方法：植板后，用手拿起96孔板，左右摇动，然后来回摇动几次，但这种方法通常在2-3个细胞的5口井中分布不均匀。 在大多数情况下，中间的孔会出现成堆的分布，会让人感到一阵麻烦。 再一次，看到一位老师将电路板放在振动器上并摇动几分钟。 结果更糟。 细胞都在中间。

　　通常，会在96孔板的每个孔上，加入100微升的细胞悬浮液。把它从左边加到洞底。加入一半板材后，与未加入的细胞悬浮液混合，然后继续加入剩余的一半板材。盖上盖子后，用左手轻轻握住木板的左边，然后用右手轻拍木板的右边缘。注意力集中在力量上(通常敲击它三次)。太多或太多次会导致细胞堆积。顺时针转动盘子(逆时针方向不好) ，将剩下的三面逐一拍打，静置5分钟左右，然后放入37度的培养箱中。本生荧光定量PCR板

　　2、新方法：这种方法是非常好，非常均匀播种。使用等速吸引吸取细胞，然后吸移嘴对孔(注意尖不接触孔枪头底部)的侧壁上，然后再慢慢敲除细胞吸管定植后，不要摇晃板，它只是可以直接在显微镜下被放置，这个方法可以被说成是有效的。

　　补充：从6孔板到96孔板，细胞应均匀分布分散。用培养基进行稀释细胞，然后将培养板放置在适当的位置。添加一个细胞时和之后，请勿移动能力培养板;如果在空气中没有介质吹入，但是不要移动培养板，加入细胞后，静置20-30分钟，然后可以将其移入培养箱。这样，细胞结构通常具有均匀生长。当然，提是细胞消化系统良好。

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　　天津本生-全黑全白96孔板铺板技巧

　　刚开始用96孔板种细胞   时细胞总是分布不均匀，第二天就会发现有些地方出现堆积性生长，而还有不少地方细胞则很稀疏，细胞密集的地方因细胞与细胞之间的接触抑制影响细胞的生长，这样就很难评价干预因素对细胞的作用，因此将96孔板种均匀也是进行后续实验的前提，现将天津本生小编以前用的旧法和用的新法比较一下，以让大家看看各自优缺。

　　1、旧法：种过板子后，用手将96孔板平拿起，左右晃动几下，然后再前后晃动几下，不过这种方法5个复孔中总有2-3个孔中细胞分布不均匀，多数情况下是孔的中间出现成堆分布，为此苦恼了一阵子。还又一次见一师姐将种好的板子放在摇床上摇了几分钟，结果更惨了，细胞全部跑到中间了。

　　一般96孔板我每孔是加100微升细胞悬液，从孔的左边靠近底部加入，加完半边板后，将未加的细胞悬液混一下再，继续加剩余的半边板子，都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度(我一般轻巧敲三下)，太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转(逆时针效果不好)，依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养  箱。

　　2、新法：这种方法简直是太好了，种的很均匀。先用移液枪将吹打均匀的细胞吸起来，让后将枪头紧贴着孔的一侧壁(注意枪头的尖不要接触孔底)，然后将枪头中的细胞缓缓的打下去，种好之后千万不要摇晃板子，直接放到显微镜  下看就可以了，此方法可以说是100%的有效吧。 希望对大家有帮助。

　　补充：从6孔板到96空板要细胞分散均匀，先用培养基把细胞稀释好，再把培养板放在适当的位置，加入细胞时和加入细胞后不移动培养板;如果空中有的地方没有培养基可吹打，但不要移动培养板，加入细胞后静置20-30分钟再移入培养箱。这样细胞一般都能长的很均匀。当然，前提是细胞消化的很好。

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