做好腐蚀极化曲线测试实验需要注意哪些关键因素

　　做ELISA实验需要注意哪些问题?

　　Elisa实验中应该注意的问题,包括样品稀释、试剂盒平衡、样品和试剂的混匀、加样、温育等问题.Elisa试剂盒有着准确性高、灵敏度高、特异性强的诸多优点,深受广大用户朋友的喜爱.然而,在实验过程中,也需要注意很多问题.对此,上海哈灵生物提醒你您,需要遵守一些规则,才能更好地进行实验,取得较好的实验成果.

　　Elisa方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定.在Elisa测定中影响因素较多,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果.引起ELISA测定错误结果的原因主要有：标本因素;试剂因素;操作因素.

　　1.样品稀释

　　一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试验的灵敏度和特异性.酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应,如果血清不稀释,不可避免会产生很强的非特异性反应,出现假阳性.

　　2.试剂盒平衡

　　Elisa中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20～30分钟以上.平衡时间太短会造成试剂混匀不够,样品孵育时间相对缩短,ELISA反应不够充分.冬季室温低,可将试剂盒置37℃温箱20分钟.

　　3.样品和试剂的混匀

　　在稀释前、后的样品必须充分混匀,所有试剂在加样前也须摇匀,以保证试验的均一性.

　　4.加样

　　加样是一项很重要的步骤.加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡.加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性.加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附.

　　5.温育

　　温育是ELISA测定中影响测定成败为关键的一个因素.ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间.

　　6.洗板

　　固相免疫测定技术是一种非均相免疫测定技术,需以洗涤操作将特异结合于固相的抗原或抗体与反应温育过程中吸附的非特异成份分离开来,以保证ELISA测定的特异性.洗液尽量不要溢出孔外;加洗液后要静置1分钟,甩去板孔中洗液后,一定要大力拍干;及时更换吸水纸,尤其是拍过酶标记物的吸水纸一定要弃去,否则可能影响试验结果.

　　7.显色

　　显色一定要控制时间,根据试剂盒说明操作即可.一般来说,显色时间过短,结果偏低;显色时间过长,空白增高或者非特异性显色增加.

　　8.比色

　　比色要注意波长的选择.以TMB为底物和以OPD为底物的试剂盒均有使用,而前者比色波长为450nm,后者为492nm,滤光片需根据要求随时更换.因此,容易出现滤光片错用的问题.

　　做ELISA实验需要注意哪些问题? 我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成，于为生命科学研究域提供产品，为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

冲击试验机是对试样施加冲击试验力，进行冲击试验的材料试验机。从做试验的材料上分为金属试验机和非金属试验机；从试验方式上分为摆锤冲击试验机和落锤冲击试验机，是重要的试验设备。

在日常试验中，为了确保试验结果的准确性和设备的使用寿命，需要做好冲击试验机的日常维护工作。如何维护，下面为您简单介绍下：

1、保持设备清洁，严禁剧烈振动、碰撞，不得随意拆卸，搬运时倾斜不得大于45°。

2、装入试样盒的试样要擦洗干净，避免铁屑等遗物带入冷却槽中，以免堵塞循环管路。

3、每周检查各部件是否有松动现象，发现后及时拧好。

4、试验机每年由计量部门检定一次，保证设备达到精度要求。

5、定期清理和维护设备，保证设备的清洁、润滑性良好、防腐良好。

6、冷却介质要定期更换，尽量降低杂质含量和含水量，否则会因循环欠佳从而影响制冷效果及温度精度。

        液相色谱仪动辄几十万，是非常昂贵的仪器，不仅是仪器本身昂贵，仪器耗材同样也非常昂贵。当你使用液相色谱仪时，某些关键操作因素没注意，损坏色谱耗材事小，损坏昂贵的色谱仪可得不偿失了。本文一一告诉你哪些关键因素需要特别注意！赶紧记下来！

       一、仪器本身

        除了仪器本身的质量问题意外，对于仪器本身最重要的就是校验工作，需要定期对仪器进行一次的内部校验，保证仪器的正常可运行状态。

        二、操作人员

        作为液相色谱仪的使用操作人员，一定要认真学习阅读液相色谱仪的说明书，掌握基础的使用操作注意事项，了解并定期进行仪器的维护保养，懂得一些基础故障问题的发现与处理技巧。色谱仪是昂贵的仪器，很多时候其实就是操作人员的使用不当造成色谱柱不可逆堵塞损坏、系统压力过大、鬼峰异常等故障。使用仪器时要认真，负责，对于操作步骤按部就班，不要嫌繁琐而少做或漏做，使用完仪器后要清洗溶剂滤头，溶剂瓶等，保持下一次的正常使用。

         三、操作使用过程中

        流动相不过滤

        我们要预先除去流动相的杂质、颗粒物和细菌等，因为这些杂质、颗粒物和细菌都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀。并且未经过滤处理的溶剂和溶剂瓶没有及时更换清洗产生的微生物都会降低溶剂进样口过滤头的寿命，还会影响泵的性能。一般是3个月左右进行更换溶剂滤头，或者当你发现没有溶剂或只有很少量的溶剂从管中滴出时，你的溶剂滤头就需要更换了，因为已经堵塞了。

        溶剂滤头主要起过滤杂质，颗粒物，细菌等作用，所以长时间的使用会导致堵塞，并且如果溶剂滤头的进样效率不高，也会造成溶剂的浪费。恒谱生2μ,5μ,10μ,20μm溶剂进样口吸滤头保护泵 、单向止回阀、进样器、色谱柱免受有害颗粒污染物的破坏。吸滤阻力较小，较大的圆柱形筛板表面积，几乎没有背压和形成空。吸滤头尺寸较小，可用于多种小瓶口的存储池容器。它不会将空气引入系统，无气泡进入流动相管路，储液瓶溶剂抽取利用率可达99%以上，大大减少瓶底溶剂因无法净真空吸取而造成的浪费。

        泵使用工作时

        泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环，导致漏液。泵的工作压力决不要超过规定的压力范围，否则会使高压密封环变形，也会产生漏液。

        使用后没有及时清洗泵

        流动相中不可以含有任何具有腐蚀性的物质或者杂质，含有缓冲液的流动相不应保留在泵内，尤其长时间停留在泵里。必须在泵中加入纯水将泵充分清洗后保存好，等下次使用。

        流动相

        流动相应该先脱气，以免在泵内产生气泡从而影响流量的稳定性，如果有大量气泡，泵就无法正常工作了。如果没有流动相流出，又无压力指示怎么办？可能是泵内有大量气体，这时可打开泄压阀，使泵在较大流量（如5ml/min）下运转，将气泡排尽，也可用一个50ml针筒在泵出口处帮助抽出气体。另一个可能原因是密封环磨损，需更换。

        以上，就是一些液相色谱仪操作中需要注意的关键因素。当然，液相色谱仪是一个复杂的分析仪器，由许多配件组成，不仅仅只有以上因素需要注意。但是查看说明书，不断学习掌握更多的使用要点，才是正确使用操作液相色谱仪的途径。而且不仅是操作手段的问题，很多时候我们可以借助一些色谱耗材配件来保护我们的仪器，解决很多故障的产生。比如如何避免产生鬼峰？我们可以使用恒谱生鬼峰捕集柱，将鬼峰捕集柱安装在梯度混合器和自动进样器之间，不仅能够去除流动相中的杂质，还可以有效捕集管路和混合器中的杂质。详情可点击查看液相色谱也会“撞鬼”？

        深圳市恒谱生科学仪器有限公司是致力于研发制造高质量色谱耗材的高科技生产厂家，我们在UHPLC超高压在线过滤器、色谱保护柱、液相色谱柱、色谱填料、鬼峰捕集柱、无气泡高净化能力的溶剂滤头、0.1μ高光内表粗糙度柱管等领域具有多年的生产经验和较强大的制造能力。恒谱生主要产品系列有保护柱系列、在线过滤器系列、柱前在线过滤器筛板系列、色谱柱柱管系列、色谱柱头筛板系列、溶剂吸滤头系列、气阻系列等。