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- 619CZY 2016-12-30 00:00:00
- 有没有办法可以测定细胞内ATP含量 ATP检测试剂盒(ATP Assay Kit)可以用于检测普通溶液、细胞或组织内的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。细胞和组织样品一步裂解即可完成样品制备,检测灵敏度高达1nmol/L,化学发光可以持续稳定达30分钟,并且获得的样品还可以同时进行Western检测。 ATP,作为Z重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP水平的改变,会影响细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。 样品制备非常简单。本试剂盒提供了可以用于细胞和组织裂解的ATP检测裂解液,简单裂解后即可用于ATP检测。无需进行高氯酸或三(TCA)抽提,或样品裂解后的煮沸等繁琐操作。
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酱腌菜就是指以水果蔬菜为关键原料,经由酱、盐、糖、醋等腌制工艺流程制造而成的各种各样蔬菜制品的统称。酱腌菜不但风味具有特色,口感鲜脆,也可以有效缓解瓜果蔬菜淡季供货不足,并且其自身带有多种营养有机物,具备促进消化、消油腻感、调节肠胃等功效。二氧化硫因具备防腐、漂白、抗氧化性等作用在酱腌菜制造过程中一般以亚硫酸盐形态被普遍采用,然而摄取过多的二氧化硫会对身体功能造成不利影响。某研究所工程师开展了离子色谱法测定酱腌菜中的二氧化硫含量的实验。
测定方法
样品加入盐酸后采用水蒸气蒸馏,以过氧化氢溶液吸收蒸馏释放出的二氧化硫,通过0.45 μm 滤膜和Ag 柱去除杂质,采用阴离子交换色谱柱分离,以KOH淋洗液洗脱,用电导检测器测定。
主要仪器
离子色谱仪
测定仪器工作条件方法
分析柱:阴离子色谱柱(250 mm×4 mm),保护柱(50 mm×4 mm);淋洗液:KOH 溶液,由淋洗液自动发生器在线产生,浓度20 mmol/L,流量为1.0 mL/min; 阴离子YZ器:ASRS 300–4 mm 型,YZ电流为50 mA ;电导检测器;池温:35℃;柱温:30℃;进样体积:25 μL。
标准溶液配制
系列硫酸根标准工作溶液:用超纯水将硫酸根标准溶液逐级稀释至质量浓度分别为1.80,3.60,7.20,14.40,18.00 mg/L 的系列硫酸根标准工作溶液。
二氧化硫标准溶液:称取0.196 9 g 无水亚硫酸钠,加入2 mL 甲醛,加水溶解并定容至100 mL 容量瓶中。吸取10.00 mL 亚硫酸钠溶液于250 mL碘量瓶中,加入100 mL 水,准确加入20.00 mL 浓度为0.1 mol/L 的碘溶液和5 mL 冰乙酸,摇匀,放置于暗处,2 min 后以硫代硫酸钠(0.1 mol/L) 标准溶液滴定至淡黄色,再加入0.5 mL 淀粉指示液,继续滴定至无色。同时做试剂空白试验。按公式X=(V0–V1)×cN×32.03/10,其中cN 为Na2S2O3 的浓度,计算得到二氧化硫标准溶液的浓度。
样品处理
称取10 g 粉碎、混匀后的样品置于全玻璃蒸馏装置的圆底烧瓶中,加入30 mL 水,摇匀,沿瓶壁加入10 mL 盐酸溶液(1+1),迅速密塞,接入水蒸气蒸馏。馏出液导入100 mL 容量瓶中,吸收管下端插入吸收液液面以下,以20 mL 3% 过氧化氢溶液为吸收液,将释放出的二氧化硫转化成硫酸根,收集馏出液约100 mL,取下定容至标线。取部分馏出液经0.45 μm滤膜和IC Guard Ag 固相萃取小柱过滤(小柱使用前分别用10 mL 去离子水活化),弃去3 mL初滤液,续滤液收集到样品瓶中,待测。
计算公式
样品中二氧化硫含量按下式 计算:
式中:W——样品中二氧化硫的含量,mg/kg ;
c1——硫酸根的质量浓度,mg/L ;
V——定容体积, mL ;
m1——样品的质量,g。
测定结果
在优化的色谱条件下,硫酸根标准溶液的质量浓度在1.80~18.00 mg/L 范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.999 7,硫酸根的检出限为0.006 mg/L。样品的加标回收率为76.9%~92.3%,测定结果的相对标准偏差小于10%(n=6)。
(来源:青岛普仁仪器有限公司)
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