粪便DNA进行PCR扩增不出条带！！！！！
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我改进了一下酚氯仿法提取得到了猪粪便的DNA，吸光度比值在1.8左右，浓度也达到几百，这些条件已经满足了PCR的要求，但是一直就是扩增不出东西（引物应该没问题）！我就觉得应该是粪便中YZPCR的成分没有去除干净，进行了YZ反应验证，证实确实是YZ物的作... 我改进了一下酚氯仿法提取得到了猪粪便的DNA，吸光度比值在1.8左右，浓度也达到几百，这些条件已经满足了PCR的要求，但是一直就是扩增不出东西（引物应该没问题）！我就觉得应该是粪便中YZPCR的成分没有去除干净，进行了YZ反应验证，证实确实是YZ物的作用，所以请问大家粪便中有哪些YZPCR的成分？？？？怎样才能完全去除粪便中YZPCR的成分？？？ 展开
全部评论(3条)
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- 白巧克力0603 2013-07-09 00:00:00
- 那请问你Z后有p出来吗？我现在在做，也p不出来
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- 天天听音乐go 2012-12-06 00:00:00
- 把提取到的DNA过柱纯化一下试试。 有家公司的粪便DNA试剂盒能用，好像叫simgen的，是过柱法的，师兄在用，PCR扩增成功。
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- cuichaoqun92 2010-09-16 00:00:00
- 一、直接基因组上胶跑，确定有基因组带 二、充分稀释基因组模板，其中的YZ成分，比如盐类的作用就可以被淡化至可忽略。一般 10ul PCR体系有个6-10ng DNA模板就可以P得很好（当然Z好用质量好效率高的Taq酶）。可以做个梯度稀释。
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