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- 巨蟹king87 2012-03-06 00:00:00
- 我用的是伯乐的一套双向电泳系统,关于蛋白浓度的问题得视你自己的样品来定,其实手册上给的参考蛋白浓度有点低,有时候甚至低了1倍,这需要你通过上样量实验来确定你的样品到底上多少浓度Z合适
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- wyp6203 2011-02-25 00:00:00
- 要看楼主你所有的仪器和IEF strip的要求吧?我用过的是这家公司的GE Healthcare。他们的蛋白质浓度要求就写在使用手册里面。 http://www.gelifesciences.com/aptrix/upp01077.nsf/Content/2d_electrophoresis~2delectrophoresis_handbook 一般来说浓度高些没关系,上样时反正会加缓冲液。上样是根据蛋白质总量来上的,所以浓度太低时,仪器又限制了上样总容积,会加不上去足够的蛋白质量,Z后胶拿出来染色,蛋白质点淡得看不见,拿去测序就更没戏了。 2D步骤很多,需要优化,楼主如果没有足够的厂商技术支持或者前辈带着,自己慢慢摸索有得你受的。
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