烘箱的解决方法

 在液相色谱上遇到的问题有很多，例如HPLC 色谱柱的一些常见问题时有出现，可能会令很多实验员感到非常沮丧。那么今天，恒谱生带您了解这些是什么以及如何解决它们可以让您避免数小时的挫败感。

一、无峰值：

       可能有多种因素会导致 HPLC 输出中不出现峰或出现非常小的峰。正常读数应该又大又细的峰值，高度也是会有不一样的。小峰或没峰可能代表检测器灯已关闭，没有流动相流量和样品丢失或变质，或者检测器、积分器、进样器阀或记录器这些有问题存在。

     其实先要确保探测器是打开状态，然后检查所有连接情况。确保自动进样器样品瓶中有足够的液体和样品中无气泡情况出现，并使用新的标液重新进行系统的检查。

二、无流量：

       如果没有出峰，很有可能是HPLC 色谱柱中没有流量；也可能意味着泵已关闭或流量因某种原因中断或受阻；同时泵头中也可能存在泄漏或空气滞留。

       如果泵关闭，需要启动泵并检查储液器中的流动相液位和整个系统的流量情况。检查样品环是否有其他障碍物或气塞，并确保流动相组分可混溶且流动相是否能够进行正常脱气。继续检查系统松动情况，检查泵是否有泄漏等其他问题。

三、压力问题：

      要是压力低于平常或无压力这有可能是系统某处发生泄漏或空气滞留；要是系统压力过高，那么泵、进样器、在线过滤器、保护柱、分析柱或管路都可能有问题。

      如果是检查发现是低压，那就要检查整个色谱系统是否存在泄漏、泵密封件故障或阀门损坏的情况等。如果是高压的话，先从移除保护柱和分析柱，并用接头替换，将进样器重新连接到检测器。以 2-5 mL/min 的速度运行泵，并开始查找原因，。如果问题是出现在分析柱上，请在分析柱与检测器断开连接时反转，并冲洗色谱分析柱；在必要的时候更换入口滤芯或更换柱子。

四、裂峰：

       如果发现峰出现在中间下降形成M形，那么可能是分析柱入口可能存在一些污染；也可能在色谱柱入口处有筛板被堵塞了或存在了不均匀的空隙；还有可能是样品溶剂与流动相不相容。

       如果是入口处有污染，请反转并冲洗色谱柱，并在需要时更换筛板。还可以用具有相同键合相功能的薄膜颗粒重新填充色谱柱顶部，并继续以反向流动方向使用色谱柱；如果是问题出在样品上，请调整流动相中的样品，因为样品和流动相中的 pH 值差异会导致分峰。

五、尾峰和前峰：

       发现峰不是直线上升和下降，而是开始在前面或后面就形成轻微的倾斜，则称为前端或尾部。这通常可能是保护柱或分析柱受损或是色谱柱过载。如果有拖尾峰，请先移除保护柱并尝试分析，必要时就需要更换。如果需要恢复或更换分析柱。一定要检查流动相的组成和色谱柱的性能。有前峰的话，请尝试注入更小的体积或稀释样品；如果溶剂有问题请调整溶剂，并使用 50 柱体积的 HPLC 级乙酸乙酯以标准流速的两倍或三倍冲洗极性键合相柱，然后在开始分析之前使用中等极性溶剂。

       今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

高纯氮气发生器采用的色谱分离方法技术可以连续产生高纯度的氮气，将空气压缩泵供给的气体导入分子筛，氧气、二氧化碳、水份及其他杂质在通过分子筛除去，只允许氮气通过分子筛并进入蓄气池，在储气罐里调节合适的压力和流速后就可以直接使用。分子筛筒采用自动可再生装置，分子筛无需进行更换。
　　高纯氮气发生器的常见问题解决方法：
　　1、运行中出现响声：
　　解决方法：用扳手对仪器上螺母适当调整松紧度，不要太紧；若不行，需拆开仪器外壳，对内部进行清洗(响主要是因内部有杂质)，若清洗完还不行，须更换新的。
　　2、在氮气压力达不到设定值时，应观察流量表，若流量显示比平时偏大，基本上就可以断定整个体系存在漏气的问题：
　　解决方法：先关闭电源，卸下气路，氮气出口需要用密封螺帽封紧，然后打开氮气发生器电源，看压力能否达到设定值，并看流量显示能否达到“000”，如果流量显示能回零，说明仪器本身不存在漏气，之后就请检查气体输出口以后的管路，及用气设备是否漏气。若流量显示不能回零，则存在漏气点，请用皂液检查干燥管是否存在漏气现象。
　　3、开机无法工作，显示板无显示：
　　解决方法：先检查电源是否有点，插头等是否插好，然后再检查保险是否完好，仪器显示板排线插件是否插好。保险位于仪器后面电线插座内，用小“一”字改锥或尖的金属工具向外撬即可取出，看仪器内电路板指示灯是否亮，若不亮，检查电路板上保险是否烧掉，若烧掉须换保险3A，换后仍不显示，须换电源。
　　4、开机10分钟后显示数字有但不升压，无气体输出：
　　解决方法：检查插件是否脱落松动，用表对插件进行测量，若没有220V电压，需更换电源。

氮气发生器是集氮、氢、空发生器为一体的仪器，它是在高纯氮发生器、高纯氢发生器和低噪音空气泵的基础上，融合现代，为适应市场的需要而开发、设计并向市场推出的一代产品。氮气发生器以崭新的结构设计，简单的工作程序，竭诚为操作者提供更加便捷、可靠的工作条件。采用的开关电源，提高了电解效率。操作简便，只需启动电源开关，仪器即可产气，输出压力稳定，氮、氢、系统设有流量显示，更醒目直观。不消耗电解质，电解质只起离子转换作用并不消耗，所以只需补充蒸发和电解损失的少量蒸馏水。设有多级保护装置，是、可靠、方便的结合。即可间断使用，又可连续使用且产气稳定、不易衰减。可取代高压钢瓶，使化验室仪器化。

氮气发生器可以根据用户使用气量的大小来进行自动控制排水；采用了航空材料作为二次减震装置，大大降低了仪器的噪音问题。氢气电解分离池采用了进口不锈钢316L材质，氢电解分离池电解面积大为325cm2，采用了贵金属作为电解材料及特殊材料作为分离膜加大了电解速率提高了气体纯度。

再好的设备也会有故障的时候，下面就来说说氮气发生器的常见故障及解决方法：

1、当氢气部份压力达不到设定值时，先观察流量表，如流量显示较平时偏大，基本可断定整个体系有漏气点。

处理方式：关闭电源，卸下气路，将氢气出口用密封螺帽封紧，开启电源，看压力能否达到设定值，并看流量显示能否达到“000”，如果流量显示能回零，说明仪器本身不存在漏气，请检查气体输出口以后的管路，及用气设备是否漏气。如流量显示不能回零，则仪器存在漏气点，请用皂液检查干燥管是否存在漏气现象。

2、当空气部份压力达不到设定值时，频繁启动时，可能存在漏气。

处理方式：关闭电源，卸下气路，将出口用密封螺帽封紧，开启电源，当压力上升，空压机停止工作后观察空压机是否会在30分钟内再次启动，如果空压机未在短时间内启动，说明仪器本身不存在漏气，请检查气体输出口以后的管路，及用气设备是否漏气。

氮气发生器的轴承损坏原因有很多，如灰尘侵入、安装不当或湿气侵入等，这是轴承早期损坏的常见原因。以下是对一些大型轴承常见损坏原因的分析及相应的解决方法，以延长轴承的使用寿命。

1、偏心率：偏心率、倾斜度或过大载荷可能导致几何应力集中或表面剥落。解决方法：轴承座和挡肩的精密加工。

2、润滑不足：润滑不足或不当可能导致部件磨损或轴承严重变形。解决方法：改善润滑系统，定期适当补充或更换润滑剂。

4、电流：当轴承旋转时，带电可能导致沟槽或刻痕。当轴承静止时，电气操作的不正确接地将导致轻微的防烧伤措施：在焊接除轴承以外的零件之前，减少或防止电流通过合适的聚酯连接件流过轴承。

3、操作不当：安装、操作或拆卸不当可能导致保持架变形或缺陷。解决方法：使用适当的操作、安装和拆卸工具。

5、生锈和腐蚀：与水接触可能导致轴承部件的腐蚀和生锈。轴承的腐蚀损坏可能导致运行中的防剥落措施：定期检查密封，确保良好的密封效果，正确存放轴承。

6、外部材料：磨粒污染和碎屑侵入可能导致轴承工作表面磨损、擦伤和凹陷。解决方法：清除侵入的颗粒和碎屑，更换润滑剂，并检查密封系统。

高纯氮气发生器采用先进的色谱分离方法技术可以连续产生高纯度的氮气，将空气压缩泵供给的气体导入分子筛，氧气、二氧化碳、水份及其他杂质在通过分子筛除去，只允许氮气通过分子筛并进入蓄气池，在储气罐里调节合适的压力和流速后就可以直接使用。分子筛筒采用自动可再生装置，分子筛无需进行更换。
高纯氮气发生器的常见问题解决方法：
1、运行中出现响声：
解决方法：用扳手对仪器上螺母适当调整松紧度，不要太紧；若不行，需拆开仪器外壳，对内部进行清洗(响主要是因内部有杂质)，若清洗完还不行，须更换新的。
2、在氮气压力达不到设定值时，应观察流量表，若流量显示比平时偏大，基本上就可以断定整个体系存在漏气的问题：
解决方法：先关闭电源，卸下气路，氮气出口需要用密封螺帽封紧，然后打开氮气发生器电源，看压力能否达到设定值，并看流量显示能否达到“000”，如果流量显示能回零，说明仪器本身不存在漏气，之后就请检查气体输出口以后的管路，及用气设备是否漏气。若流量显示不能回零，则存在漏气点，请用皂液检查干燥管是否存在漏气现象。
3、开机无法工作，显示板无显示：
解决方法：先检查电源是否有点，插头等是否插好，然后再检查是否完好，仪器显示板排线插件是否插好。位于仪器后面电线插座内，用小“一”字改锥或尖的金属工具向外撬即可取出，看仪器内电路板指示灯是否亮，若不亮，检查电路板上是否烧掉，若烧掉须换3A，换后仍不显示，须换电源。
4、开机10分钟后显示数字有但不升压，无气体输出：
解决方法：检查插件是否脱落松动，用表对插件进行测量，若没有220V电压，需更换电源。

氢气发生器作业原理：

一、用电解法发生氢气，以氢氧化钾水溶液为电解液，以贵金属做电极，釆用新的膜别离技能将氢气和氧气彻底别离，并在电解池中釆用了过渡族金属催化技能，使产氢纯度含氧量小于 3PPM。

二、氢气发生器程序釆用了高灵敏度、模糊操控主动盯梢系统，取消了稳压阀，完成了主动恒流、恒压、使压力安稳精度规模小于0.001MPa并可根据色谱仪所需氢气用量巨细完成0-300ml/min全主动调节，当用户中止用气时，仪器主动中止产氢，因此杜绝了体系超压的现象，以确保安全。

氢气发生器选用膜渗透技能和液位差自流式电解池，一步提纯到位,纯度高达99.999%以上，选用先进技能科学地解决了返液现象，是实验室运用的抱负氢气发生器。

由于氢气的纯净度、流量和压力对色谱仪的正常运行影响非常大，因此氢气发生器的故障应及时排除。

三、氢气发生器工作原理：

氢气发生器的工作原理是以电解的方法产生氢气，以贵金属做电极，采用新的XY膜分理技术，特制的电解液体在分离池阴极上的电解产生高纯氢气，阳极产生氧气，氧气释放到大气中，氢气经过净化，干燥后输出。

氢气发生器的程序控制采用了高灵敏度压力控制系统和流量自动跟踪系统，使压力的稳定性小于0.001Mpa。流量自动跟踪系统可根据用气设备所需氢气的用量大小自动跟踪调节。当用气设备停止用气时，仪器会自动停止产气，杜绝了系统超压现象，以保安全使用。

四、氢气发生器的安装与使用：

1、将氢气发生器从包装箱中取出，观察氢气发生器的表面有无运输造成的损伤，并核对装箱单上的品名数量是否齐全。

2、氢气发生器安放场所应符合以下几点要求：具有良好的通风性；远离散热器或暖气管道等热源区域；无震动、阳光直射、粉尘、腐蚀性气体、环境干燥。

五、氢气发生器不能启动时：

故障原因：

(1)电路没有接通；

(2)氢气开关电源损坏；

(3)在压力为0空载运行时电解池烧坏。

检查方法：

(1)检查电路；

(2)用万用表测量电解池的电压是否在2.3V左右。

排除方法：

(1)修理电源；

(2)更换损坏的氢气开关电源；

(3)更换电解池。

　　细胞培养常见问题的原因及解决方法

　　1. 培养液pH值变化太快：

　　CO2张力不对。培养瓶盖拧得太紧。NaHCO3缓冲系统缓冲力不足。培养液中盐浓度不正确。细菌、酵母或真菌污染。

　　按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2浓度，2.0g/L到3.7g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为5%到10%。(2)改用不依赖CO2培养液。

　　松开瓶盖1/4圈。

　　加HEPES缓冲液至10到25mM终浓度。

　　在CO2培养环境中改用基于Earle’s盐配制的培养液，在大气培养环境中培养改用Hank’s盐配制的培养液。

　　丢弃培养物或用抗生素除菌。

　　2. 培养液出现沉淀，但pH值不变：

　　用洗涤剂清洗后残留磷酸盐将培养基成分沉淀下来。冰冻保存培养液。

　　用去离子水反复冲洗玻璃器皿，然后除菌。

　　将培养液加热到37℃，摇动使其溶解如沉淀仍然存在，丢弃培养液。

　　3. 培养液出现沉淀，同时pH 发生变化：

　　细菌或真菌污染。

　　丢弃培养物或用抗生素除菌。

　　4. 培养细胞不贴壁：

　　胰蛋白酶消化过度;支原体污染;培养液中无贴壁因子。

　　缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度。

　　分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。

　　5. 悬浮细胞成簇：

　　培养液中含钙、镁离子。支原体污染。蛋白酶过度消化使得细胞裂解释放DNA。

　　用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞，轻轻吹吸细胞获得单细胞悬液。

　　分离培养物，检测支原体。如发现支原体污染，丢弃培养物。

　　用DNase I处理细胞。

　　6. 原代细胞培养物污染：

　　原代培养组织在进入培养前已污染

　　培养前用含高浓度抗生素的平衡盐溶液反复冲洗组织。

　　7. 培养细胞死亡：

　　培养箱内无CO2。培养箱内温度波动太大。细胞冻存或复苏过程中损伤。培养液渗透压不正确。培养液种有毒代谢产物堆积。

　　检测培养箱内CO2

　　检查培养箱内温度

　　取新的保存细胞种

　　检测培养液渗透压。注意：大多数哺乳动物细胞能耐受渗透压为260–350mOsm/kg。加入额外试剂如HEPES或药物都有可能影响培养液渗透压。

　　换入新鲜培养液

　　8. 培养细胞生长减慢：

　　由于更换不同培养液或血清。培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏。培养物中有少量细菌或真菌污染。试剂保存不当。

　　比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清支持细胞生长实验。

　　增加起始培养细胞浓度。

　　让细胞逐渐适应新培养液。

　　换入新鲜配制培养液。

　　补加谷氨酰胺或生长因子。

　　用无抗生素培养液培养，如发现污染，丢弃培养物。或用抗生素除菌。

　　血清需保存在-5℃ 到-20℃。培养液需在2–8℃避光保存。含血清培养液在2–8℃保存，并在2周内用完。

　　接种细胞起始浓度太低，细胞已老化，支原体污染。

　　增加接种细胞起始浓度。

　　换用新的保种细胞。

　　分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。

　　细胞培养常见问题的原因及解决方法，我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成，于为生命科学研究域提供产品，为广大科研工作者提供服务。   既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。