仪器网(yiqi.com)欢迎您!

| 注册 登录
网站首页-资讯-专题- 微头条-话题-产品- 品牌库-搜索-供应商- 展会-招标-采购- 社区-知识-技术-资料库-方案-产品库- 视频

问答社区

细胞培养的具体步骤和要求以及注意事项

蒋理勋 2011-11-28 03:49:46 552  浏览
  •  

参与评论

全部评论(2条)

  • 猪猪猪农场 2011-11-29 00:00:00
    这个嘛!!自己上网查

    赞(19)

    回复(0)

    评论

  • 东方龙无悔 2017-09-05 06:11:25
    一、 复苏 1. 把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。 2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。 3. 把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。 4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴壁后换培养基。 5. 3天换一次培养基。 二、 传代 1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。 2. 把原有培养基吸掉。 3. 加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化1-2分钟。 4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。 5. 用移液枪吹打细胞,把细胞都悬浮起来。 6. 把细胞吸到15ml的离心管中,1000转离心5分钟。 7. 倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。 8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般,癌细胞分5个,正常细胞传3个。继续培养。 三、 冻存 把细胞消化下来并离心(同上)。用配好的冻存液把细胞悬浮起来,分装到灭菌的冻存管中,静止几分钟,写明细胞种类,冻存日期。4℃ 30min,-20℃ 30min,-80℃过夜,然后放到液氮灌中保存。 冻存液的配制: 70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加,边滴边摇。 要注意的就是无菌操作!

    赞(14)

    回复(0)

    评论

获取验证码
我已经阅读并接受《仪器网服务协议》

热门问答

细胞培养的具体步骤和要求以及注意事项
 
2011-11-28 03:49:46 552 2
急求:做鼠细胞培养实验的具体步骤
Z好是鼠肝细胞或者肺细胞。。。。。越详细越好。。。谢谢!!在线等。。。。。。。
2011-03-14 14:26:02 369 2
有谁知道凯氏定氮的具体步骤,注意事项,!!
想知道凯氏定氮的步骤,注意事项,Z好有视频的,谢谢大家帮忙... 想知道凯氏定氮的步骤,注意事项,Z好 有视频的 ,谢谢大家 帮忙 展开
2009-05-13 01:11:20 944 4
细胞培养的步骤及注意事项

  细胞培养的步骤及注意事项

  一、 复苏

  1. 把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。

  2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。

  3. 把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。

  4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴壁后换培养基。

  5. 3天换一次培养基。

  二、 传代

  1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。

  2. 把原有培养基吸掉。

  3. 加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化1-2分钟。

  4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。

  5. 用移液枪吹打细胞,把细胞都悬浮起来。

  6. 把细胞吸到15ml的离心管中,1000转离心5分钟。

  7. 倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。

  8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般,癌细胞分5个,正常细胞传3个。继续培养。

  三、 冻存把细胞消化下来并离心(同上)。用配好的冻存液把细胞悬浮起来,分装到灭菌的冻存管中,静止几分钟,写明细胞种类,冻存日期。4℃ 30min,-20℃ 30min,-80℃过夜,然后放到液氮灌中保存。 冻存液的配制: 70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加,边滴边摇。

  细胞培养的步骤及注意事项,先和大家介绍到这,如果想要了解更多离心管的信息,可以关注天津本生生物,业给生物医药客户提供生物实验室检测耗材,欢迎广大客户来询。

2022-03-02 14:57:20 532 0
微波炉如何微核桃仁,要求具体步骤
 
2013-03-31 08:59:22 322 2
细胞培养用多少培养基一般培养瓶和培养皿以及六孔
 
2017-04-16 19:14:35 436 1
磁翻板液位计安装以及注意事项
 
2011-12-13 05:37:14 251 3
细胞培养的步骤及注意事项您需知

  细胞培养的步骤和注意事项您需知


  一、 复苏

  1. 把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。

  2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。

  3. 把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。

  4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴壁后换培养基。

  5. 3天换一次培养基。

  二、 传代

  1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。

  2. 把原有培养基吸掉。

  3. 加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化1-2分钟。

  4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。

  5. 用移液枪吹打细胞,把细胞都悬浮起来。

  6. 把细胞吸到15ml的离心管中,1000转离心5分钟。

  7. 倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。

  8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般,癌细胞分5个,正常细胞传3个。继续培养。

  三、 冻存

  把细胞消化下来并离心(同上)。用配好的冻存液把细胞悬浮起来,分装到灭菌的冻存管中,静止几分钟,写明细胞种类,冻存日期。4℃ 30min,-20℃ 30min,-80℃过夜,然后放到液氮灌中保存。

  冻存液的配制: 70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加,边滴边摇。

  细胞培养的步骤和注意事项 先和大家介绍到这,如果想要了解更多细胞培养的信息,可以关注天津本生生物,专业给生物行业客户提供生物实验室检测耗材,欢迎广大客户来询。


2022-03-30 09:29:24 442 0
农残检测仪的工作原理 以及注意事项
 
2012-06-18 19:26:37 312 2
冰川的微生物取样以及注意事项
冰川的微生物取样以及注意事项... 冰川的微生物取样以及注意事项 展开
2016-03-08 06:22:50 802 1
洗鼻过程,以及注意事项
是用盐水洗鼻好,还是生理性海水洗鼻好?网上各有定论。... 是用盐水洗鼻好,还是生理性海水洗鼻好?网上各有定论。 展开
2018-11-28 06:52:31 370 0
分光光度计、红外探测器、光电倍增管的应用领域以及注意事项。
 
2008-05-09 02:38:39 403 1
发动机油压测量的步骤以及注意事项
 
2015-10-13 20:04:03 490 1
液相色谱仪的使用方法以及注意事项有哪些?!
 
2015-04-30 21:46:51 378 2
96孔板振荡器使用方法以及注意事项!

  96孔板振荡器使用方法以及注意事项!


  在生物实验室中,96孔板振荡器是一种比较常用的器材。下面,BUNSEN本生小编就来教给大家,96孔板振荡器是如何使用的?以及使用时,有哪些相关的注意事项?

  一、96孔板振荡器的使用和注意事项:

  该96孔板振荡器结构紧凑,占地面积小,可应用于各种实验,如免疫测定和染色实验。由DC无刷电机驱动,可用于低温环境或培养箱。它主要用于溶液中,如酶联免疫吸附试验板、细胞培养板和1.5%BUNSEN本生离心管中混合和振荡。

  二、96孔板振荡器使用方法:

  1.安装试剂瓶并保持平衡。如果是双功能模式,请设置振荡模式。

  2.打开电源,根据机器的表面刻度设定时间。如果您需要长时间工作,请将计时器调整到常开位置。

  3.打开电源开关,设置恒温。当加热到您需要的温度时,加热会自动停止,绿色指示灯会亮起。 当测试室内的温度低于您设定的温度时,新的热量将再次开始。

  4.打开振荡装置:打开控制面板上的振荡开关,并将振荡速度旋钮调节到所需的振荡频率。

  5.完成工作后,关闭电源,将速度控制旋钮和温度控制旋钮设置到Z大值的低点。

  6.清洁机器并保持清洁。

  三、96孔板振荡器应考虑事项:

  1.电器应放置在相对坚固的操作台上,环境应干净且通风良好。

  2.用户提供的电源插座应有良好的接地措施。

  3.正常工作时严禁移动机器,严禁撞击机器。

  4.为了防止事故发生,严禁儿童进入机器。

  5.更换保险丝之前,请确保电源已关闭。

  6.用后请清洗机器。不要留下任何水滴或污垢残留物,保持机器干净整洁,下次使用。


  96孔板振荡器使用方法以及注意事项!本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。

2022-05-17 11:14:53 272 0
涡街流量计的安装要求及注意事项
 
2018-11-21 05:56:58 202 0
提车注意事项以及验车的步骤
 
2017-12-14 22:47:03 244 2
示波器测量电压的方法以及使用注意事项

示波器测电压的方法有哪些?我们利用示波器可以观察到各种不同信号幅度随时间变化的波形曲线,同时还能测量各种不同的电量,比如电压、电流等等。示波器(数字示波器)的显示电路包括示波管及其控制电路两部分,其中示波管是一种特殊的电子管,由电子枪、荧光屏和偏转系统3部分组成,是示波器的重要组成部分。利用示波器所作的任何测量都可以看做对电压的测量,本文主要介绍了示波器测电压的方法及其使用注意事项。

一、示波器测电压的方法

直接测量法

所谓直接测量法,就是直接从屏幕上量出被测电压波形的高度,然后换算成电压值。定量测试电压时,一般把Y轴灵敏度开关的微调旋钮转至“校准”位置上,这样,就可以从“V/div”的指示值和被测信号占取的纵轴坐标值直接计算被测电压值。所以,直接测量法又称为标尺法。

(1)直流电压的测量

将Y轴输入耦合开关置于“地”位置,触发方式开关置“自动”位置,使屏幕显示一水平扫描线,此扫描线便为零电平线。

将Y轴输入耦合开关置“DC”位置,加入被测电压,此时,扫描线在Y轴方向产生跳变位移H,被测电压即为“V/div”开关指示值与H的乘积。

直接测量法简单易行,但误差较大。产生误差的因素有读数误差、视差和示波器的系统误差(衰减器、偏转系统、示波管边缘效应)等。

(2)交流电压的测量

将Y轴输入耦合开关置于“AC”位置,显示出输入波形的交流成分。如交流信号的频率很低时,则应将Y轴输入耦合开关置于“DC”位置。

将被测波形移至示波管屏幕的ZX位置,用“V/div”开关将被测波形控制在屏幕有效工作面积的范围内,按坐标刻度片的分度读取整个波形所占Y轴方向的度数H,则被测电压的峰-峰值VP-P可等于“V/div”开关指示值与H的乘积。如果使用探头测量时,应把探头的衰减量计算在内,即把上述计算数值乘10。例如示波器的Y轴灵敏度开关“V/div”位于0.2档级,被测波形占Y轴的坐标幅度H为5div,则此信号电压的峰-峰值为1V。如是经探头测量,仍指示上述数值,则被测信号电压的峰-峰值就为10V。

比较测量法

比较测量法就是用一已知的标准电压波形与被测电压波形进行比较求得被测电压值。

将被测电压Vx输入示波器的Y轴通道,调节Y轴灵敏度选择开关“V/div”及其微调旋钮,使荧光屏显示出便于测量的高度Hx并做好记录,且“V/div”开关及微调旋钮位置保持不变。

去掉被测电压,把一个已知的可调标准电压Vs输入Y轴,调节标准电压的输出幅度,使它显示与被测电压相同的幅度。此时,标准电压的输出幅度等于被测电压的幅度。比较法测量电压可避免垂直系统引起和误差,因而提高了测量精度。

二、示波器使用注意事项

为了仪器操作人员的安全和仪器安全,仪器在安全范围内正常工作,保证测量波形准确、数据可靠,应注意:

1、用户如须要测量开关电源(开关电源初级,控制电路)、UPS(不间断电源)、电子整流器、节能灯、变频器等类型产品或其它与市电AC220V不能隔离的电子设备进行浮地信号测试时,必使用DP100高压隔离差分探头;

2、通用示波器通过调节亮度和聚焦旋钮使光点直径较小以使波形清晰,减小测试误差;不要使光点停留在一点不动,否则电子束轰击一点宜在荧光屏上形成暗斑,损坏荧光屏;

3、通用示波器的外壳,信号输入端BNC插座金属外圈,探头接地线,AC220V电源插座接地线端都是相通的。如仪器使用时不接大地线,直接用探头对浮地信号测量,则仪器相对大地会产生电位差;电压值等于探头接地线接触被测设备点与大地之间的电位差。这将对仪器操作人员、示波器、被测电子设备带来严重安全危险;

4、测量系统-例如示波器、信号源;打印机、计算机等设备等。被测电子设备-例如仪器、电子部件、电路板、被测设备供电电源等设备接地线必须与公共地(大地)相连;

5、TDS1000/TDS2000系列泰克示波器配合探头使用时,只能测量(被测信号-信号地就是大地,信号端输出幅度小于300VCATII)信号的波形。不能测量市电AC220V或与市电AC220V不能隔离的电子设备的浮地信号。(浮地是不能接大地的,否则造成仪器损坏,如测试电磁炉。

其他注意事项

1、热电子仪器一般要避免频繁开机、关机,示波器也是这样;

2、如果发现波形受外界干扰,可将示波器外壳接地;

3、关机前先将辉度调节旋钮沿逆时针方向转到底,使亮度减到Z小,然后再断开电源开关;

4、在观察荧屏上的亮斑并进行调节时,亮斑的亮度要适中,不能过亮;

5、“Y输入”的电压不可太高,以免损坏仪器,在Z大衰减时也不能超过400V.“Y输入”导线悬空时,受外界电磁干扰出现干扰波形,应避免出现这种现象。

示波器测电压的方法有哪些呢?在使用时又要注意哪些事项呢?相信在小编的详细介绍下,大家对示波器的这两个问题都有了更深的认识吧。我们知道虽然示波器分类好几类,型号也是各有不同,但是除了在频带宽度及输入灵敏福等不完全相同外,其使用方法基本是一样的。

希望以上的内容可以帮助到大家,更多有关仪器知识内容欢迎访问西安安泰测试。

2020-06-19 11:14:36 1067 0
氮气吹扫仪的原理、优点、使用.、应用以及注意事项

氮吹仪的原理
加快蒸发有两个方法:加强它周围的空气流动和它的温度。氮气还是一种不活泼的气体,也能起到隔绝氧气的作用,防止氧化。氮吹仪就是通过这些原理达到了浓缩的目的。它将氮气快速、连续、可控地吹到加热样品表面,实现大量样品的快速浓缩。
氮吹仪的优点
1.一次可处理多个样品,在多因素、多水平的重复实验中优势更为明显。
2.实验操作简洁、灵活。可以不受约束地注册会计随时调节浓缩的进程。
3.实验中不需要操作者长时间的维护,节省人力。
4.旋转蒸发仪在溶剂沸腾时可能会造成样品的损失,而氮吹仪在浓缩时准确、灵敏可避免样品损失。
氮吹仪的使用
氮吹仪安装好后,底盘支撑在恒温水浴内,打开水浴电源,设定水浴温度,水浴开始加热。提升氮吹仪,将需要蒸发浓缩的样品分别安放在样品定位架上,并由托盘托起,其中托盘和定位架高低可根据培训样品试管的大小调整。打开流量计针阀,氮气经流量计和输气管到达配气盘,配气后送往各样品位上方的针阀管(安装在配气盘上)。然后,通过网校调节针阀管针阀,氮气经针阀管和针头吹向液体样品试管,可通过调整锁紧螺母可以上下滑动针阀管,调整针头高度,以样品表面吹起波纹,样品又不溅起为好。后,将氮吹仪放于水浴中,直到蒸发浓缩完成。
氮吹仪的应用
农残分析:如蔬菜、水果、谷物、植物组织
环境分析:如饮引用水、地下水和污染水水样
生物分析:如血清、血浆、 血液、尿液
商品检验:如检验克罗夫特等
食品饮料:如牛奶、酒、啤酒等
制药药检:如中药制药
氮吹仪注意事项
(1) 不将氮吹仪用于燃点低于100℃的物质。
(2) 使用氮吹仪时, 应当保护手和眼睛。
(3) 氮吹仪应当在通风橱中使用, 以保证通风良好。
(4) 加热时不要移动氮吹仪, 以防烫shang。
(5) 用三线接地电源使用。
(6) 不要带电打开水浴外壳, 以防触电。
(7) 氮吹仪的维修应当由人员进行,元器件替换不当可能引起氮吹仪损坏或产生安全隐患。
(8) 像石油醚等的高易燃物质不要使用氮吹仪。
(9) 不要使用酸性或碱性物质, 否则将会损毁氮吹仪。

2021-12-27 16:21:32 414 0
氮气吹扫仪的原理、优点、使用.、应用以及注意事项

氮吹仪的原理
加快蒸发有两个方法:加强它周围的空气流动和它的温度。氮气还是一种不活泼的气体,也能起到隔绝氧气的作用,防止氧化。氮吹仪就是通过这些原理达到了浓缩的目的。它将氮气快速、连续、可控地吹到加热样品表面,实现大量样品的快速浓缩。
氮吹仪的优点
1.一次可处理多个样品,在多因素、多水平的重复实验中优势更为明显。
2.实验操作简洁、灵活。可以不受约束地注册会计随时调节浓缩的进程。
3.实验中不需要操作者长时间的维护,节省人力。
4.旋转蒸发仪在溶剂沸腾时可能会造成样品的损失,而氮吹仪在浓缩时准确、灵敏可避免样品损失。
氮吹仪的使用
氮吹仪安装好后,底盘支撑在恒温水浴内,打开水浴电源,设定水浴温度,水浴开始加热。提升氮吹仪,将需要蒸发浓缩的样品分别安放在样品定位架上,并由托盘托起,其中托盘和定位架高低可根据培训样品试管的大小调整。打开流量计针阀,氮气经流量计和输气管到达配气盘,配气后送往各样品位上方的针阀管(安装在配气盘上)。然后,通过网校调节针阀管针阀,氮气经针阀管和针头吹向液体样品试管,可通过调整锁紧螺母可以上下滑动针阀管,调整针头高度,以样品表面吹起波纹,样品又不溅起为好。后,将氮吹仪放于水浴中,直到蒸发浓缩完成。
氮吹仪的应用
农残分析:如蔬菜、水果、谷物、植物组织
环境分析:如饮引用水、地下水和污染水水样
生物分析:如血清、血浆、 血液、尿液
商品检验:如检验克罗夫特等
食品饮料:如牛奶、酒、啤酒等
制药药检:如中药制药
氮吹仪注意事项
(1) 不将氮吹仪用于燃点低于100℃的物质。
(2) 使用氮吹仪时, 应当保护手和眼睛。
(3) 氮吹仪应当在通风橱中使用, 以保证通风良好。
(4) 加热时不要移动氮吹仪, 以防烫shang。
(5) 用三线接地电源使用。
(6) 不要带电打开水浴外壳, 以防触电。
(7) 氮吹仪的维修应当由人员进行,元器件替换不当可能引起氮吹仪损坏或产生安全隐患。
(8) 像石油醚等的高易燃物质不要使用氮吹仪。
(9) 不要使用酸性或碱性物质, 否则将会损毁氮吹仪。

2021-12-30 16:13:01 446 0

5月突出贡献榜

推荐主页

最新话题