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一篇在线发表于《细胞》杂志的论文介绍了一项重要突破：来自韩国的研究团队***在线粒体DNA中实现A碱基到G碱基的转换，为基因编辑技术填补上一块***关重要的拼图，也带来了治愈多种线粒体遗传病的希望。

从上世纪60年代***发现***性内切酶，到1985年发明PCR技术，再到***近十年CRISPR技术诞生、用于活体生物的基因编辑，短短半个世纪，人类在一次又一次的突破中实现了操纵DNA能力的巨大飞跃。其中，CRISPR的出现更是让科学家能高效编辑基因组中的致病突变，为众多遗传病提供全新的方案。

不过，还有一朵乌云长期笼罩在基因编辑领域的上空，这就是线粒体DNA的编辑。

作为参与能量代谢的重要细胞器，线粒体中也含有少量来自母系的DNA。如果这部分基因发生突变，则可能导致多种与代谢相关的遗传疾病。

例如，Leber遗传性视神经病变（LHON）可能导致患者失明，这种凶险的疾病就是由线粒体DNA的点突变导致的。线粒体DNA突变还可能导致某些线粒体脑肌病，患者的大脑遭受损伤，可能出现癫痫、精神行为异常等症状。平均每5000个人里，就有一个人患上线粒体点突变导致的遗传病。

尽管基因编辑工具***近十年迎来爆发式发展，但面对线粒体遗传病时，这些工具却总是难以奏效。例如，当下***为盛行的CRISPR-Cas系统就因为向导RNA不能穿越线粒体膜，因而无法用于线粒体疾病。

线粒体DNA的编辑，可以说是基因编辑领域***后一块未经涉足的土地，而这个难题也成为治愈多种遗传疾病必须跨越的障碍。

2020年，一项***性的突破到来。Broad研究所的刘如谦教授团队开发了一款名为DdCBE的基因编辑工具，可以直接修改双链DNA上的碱基，实现从C碱基到T碱基的转换，这也是科学家***在人体细胞中进行线粒体DNA的编辑。

不过，作为线粒体DNA编辑的开拓性成果，DaCBE也有不足之处：其只能高效地进行TC-TT序列的转换，在90个已知的致病线粒体突变位点中，只有9个能得到修复。

而在这90个突变位点中，有多达39个都可以通过A-G碱基的转换来修复。如果能找到实现A-G转换的手段，那么包括上述两种疾病在内，多种线粒体遗传病都有望迎来治愈的方法。

在这项发表于《细胞》的***新研究中，来自韩国基础科学研究所基因编辑中心的研究团队终于完成了这项“不可能的任务”，他们开发出一款全新的基因编辑平台，命名为转录激活因子样效应物相关脱氢酶（transcription activator-like effector-linked deaminases，简称TALED）。

▲TALED编辑线粒体DNA的示意图

论文***作者CHO Sung-Ik表示：“我们设计的新型碱基编辑器极大地拓展了线粒体DNA编辑的范围，这不仅有助于构建疾病模型，还将帮助人们开发新疗法。”

TALED到底是什么？接下来我们将看到，TALED由3个功能各异的主要部分组成，它们环环相扣、共同协作，***终完成这项基因编辑任务。

***个部分，可以看作TALED的向导。前面说到，常见的基因编辑系统无法进入线粒体。为了解决这个问题，TALED与刘如谦团队开发的DaCBE一样，使用了转录激活因子样效应物（TALE）。作为一种DNA结合蛋白，TALE蛋白能够靶向特异的DNA序列，其在线粒体靶向序列（MTS）的引导下进入线粒体，并且与特定的线粒体DNA序列结合。

到这里，TALED就被带到了工作场所。在这里，轮到TALED的第二个部分登场。研究团队需要找到合适的脱氢酶，在这里实现A-G碱基的转换。为此，他们选择是名为TadA8e的腺嘌呤脱氢酶，其由大肠杆菌的腺嘌呤脱氢酶改造而来。

这个选择颇具创意，因为TadA8e被认为是一种专门对单链DNA起作用的蛋白，但在这里，它需要在线粒体的双链DNA中进行碱基编辑。

这篇论文的通讯作者，基因编辑中心主任KIM Jin-Soo教授说：“没有人想过用TadA8e在线粒体中进行碱基编辑，因为它被认为只对单链DNA起作用。正是这个跳出传统框架的想法，帮助我们发明了TALED。”

而帮助TadA8e做到这一点的，是TALED的***后一个主要部分：胞嘧啶脱氢酶DddAtox。DddAtox使得双链DNA可以短暂地解开，而TadA8e正是抓住了这个转瞬即逝的时间窗口，在人类细胞的线粒体中高效催化A-G碱基的转换，编辑频率可高达49%。

▲TALED实现了A-G碱基的转换

通过对TALED的调整，研究团队分别开发出能同时实现A-G以及C-T碱基转换的技术，以及仅进行A-G转换的技术。

当然，作为一项开创性的技术，TALED仍有不***之处，例如在进行碱基编辑时，可能会造成与目标位点相邻的核苷酸也发生转换；此外，TALED是否会在哺乳动物细胞中产生脱靶效应也有待观察。

但毫无疑问，TALED技术的出现让我们又多了一种***潜力的基因编辑工具，展望这项技术的未来应用场景，研究团队希望能提升TALED的编辑效率与特异性，***终能够分别在胚胎、新生儿与成年患者体内修正致病的线粒体突变。我们期待，那些受困于线粒体遗传病的人们终将迎来治愈的一刻。

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