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为什么标准蛋白应用微量凯氏定氮法测定浓度

风追剑客 2016-11-25 06:11:45 740  浏览
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全部评论(1条)

  • 打发发达248 2016-11-25 23:57:41
    《蛋白质的定量测定——微量凯氏定氮法》实验原理:生物材料的含氮量测定在生物化学研究中具有一定的意义,如蛋白质的含氮量约为16%,测出含氮量则可推知蛋白含量。生物材料总氮量的测定,通常采用微量凯氏定氮法。凯氏定氮法由于具有测定准确度高,可测定各种不同形态样品等两大优点,因而被公认为是测定食品、饲料、种子、生物制品、药品中蛋白质含量的标准分析方法。

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1 前言

豆乳是黄豆加水、磨成汁后再煮熟的饮料。豆乳饮料营养非常丰富,且易于消化吸收,它是数百种天然植物中Z受营养学家推荐的食物。本文参照《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》标准,对某品牌浓香豆乳进行蛋白质含量的测定。

2 仪器与试剂

2.1 仪器

K1160 全自动凯氏定氮仪,SH420F 石墨消解仪,分析天平。

2.2 试剂

硫酸(分析纯),催化剂片(分析纯无水硫酸钾 3g 和分析纯无水硫酸铜 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,40%氢氧化钠。

3 实验方法

3.1 取样

称取样品 3.0g(精确值 0.1mg)左右,加入消化管。加入混合催化剂 3gK2SO4、0.2gCuSO4,加入 10mL 浓硫酸。

3.3 消解

利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,消化过程采用曲线升温模式,设定消解参数如表 1:

表 1 消解参数设置

             阶段            温度/℃          保持/min              备注
               1             200               20 不加排废罩,挥发水分
               2             230               20
               3             350               20
               4             420               90

3.4测试

将消化管放置于凯氏定氮仪上,定氮仪参数设置如表 2:

表 2 定氮仪参数设置

      硼酸    稀释水      碱液    蒸馏量  蛋白系数   蒸汽流量   滴定酸
     25mL     30mL     40mL      5min      6.25     0.1169mol/L

4 测试结果

4.1 实验结果

       名称   样品重量 g     氮含量%蛋白质含量%     平均值%       RSD%



       豆乳

      3.1171     0.4887     3.0541



      3.0592



        0.13

      3.0504     0.4901     3.0632
      3.1046     0.4899     3.0617
      3.1745     0.4892     3.0578

4.2 结论

通过实验数据可以看出,测定该豆乳样品的粗蛋白平均值为 3.0592%。

豆乳样品包装袋上营养成分表中蛋白质标示值为 3.0g/100g,样品测定的蛋白质平均值符合《GB 28050-2011 食品安全国家标准 预包装食品营养标签通则》要求的食品中蛋白质的允许误差范围≧80%标示值。

参考文献

[1] GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定[S]. [2] GB 28050-2011 食品安全国家标准 预包装食品营养标签通则[S].


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