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- 啝伱1起菿咏玖 2017-01-01 00:00:00
- 紫外--可见分光光度法:是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长(频率小)的光线能量小,波长短(频率大)的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。 测定法 测定时,除另有规定外,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用1cm的石英吸收池,在规定的吸收峰波长±2nm以内测试几个点的吸收度,或由仪器在规定波长附近自动扫描测定,以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确,除另有规定外,吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内,并以吸光度Z大的波长作为测定波长。一般供试品溶液的吸收度读数,以在0.3~0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度,否则测得的吸收度会偏低;狭缝宽度的选择,应以减小狭缝宽度时供试品的吸收度不再增大为准,由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收,因此测定供试品的吸光度后应减去空白读数,或由仪器自动扣除空白读数后再计算含量。当溶液的pH值对测定结果有影响时,应将供试品溶液和对照品溶液的pH值调成一致。 (1) 鉴别和检查 分别按各品种项下的方法进行。 (2) 含量测定 一般有以下几种。
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1、方法原理:
PHMB分子在236nm处有紫外吸收,吸收强度与PHMB含量成正比。根据朗伯-比尔定律对其进行定量分析。
2、主要仪器及试剂
1)紫外可见光分光光度计:上海仪电分析仪器有限公司;
2)分析天平:万分之一;
3)容量瓶:100mL、1000mL;
4)PHMB标准品:Vantocil ⅠB,20% w/w;
5)PHMB待测样。
3、实验步骤
3.1样品制备:
称取样品0.50±0.02g(精确到0.1mg)于100mL容量瓶中,用纯水稀释至刻度,摇匀。再移取此溶液1mL于100mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。测定步骤同上。待测样品测得的吸光度,根据标准曲线计算得出待测样品中PHMB的浓度含量。
3.2标准曲线绘制
(1)100 ppm标准储备液:精密称取PHMB标准品0.50±0.02g(精确到0.1mg)于1000mL容量瓶中,用纯水稀释至刻度,摇匀。
(2)标准工作液系列:2、5、10、15、20ppm;
(3)在236nm波长处,用10mm比色皿,以蒸馏水为参比,一一测定对应的吸光度,以PHMB的浓度对吸光度绘制曲线。
3.3标准系列及曲线
4、分析结果的计算
4.1 样品中有效成分计算公式
ω=ρ*v/m*100%
式中:ω——样品中有效成分PHMB的质量分数,%;
m——样品的称取量,mg;
ρ——从标准曲线上得到待测溶液的质量浓度,μg/mL;
V——待测样品的定容体积,mL。
4.2 样品含量检测结果
称取样品0.5118g,超纯水定容至100mL。再取1.0mL,超纯水定容至100mL。上机测定,检测结果为8.027μg/mL。即15.68%。
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