人参皂苷的提取方法

[ACE UltraCore SuperC18色谱柱]中药人参皂苷的UHPLC-MS/MS研究

Conditions

Column: ACE UltraCore 2.5 SuperC18
Dimensions: 150 x 3.0 mm
Part Number: CORE-25A-1503U
Mobile Phase: 

A: 0.1% formic acid in H2O
B: 0.1% formic acid in MeCN
Gradient:

Flow Rate: 0.4 mL/min
Injection: 2 μL
Temperature: 45 °C
Detection: AB SCIEX 5500 Qtrap MS ESI in negative ion mode
Source temperature: 450 °C
Sprayer voltage: -4500 V
Stepwise MRM mode for[M + HCOO]- > [M – H]- ion transitions Mass range 501 – 1250 u (step size 2 u)
Analytes
1. Ginsenoside Re(m/z 991 945)
2. Ginsenoside Rg1(m/z 845 799)
3. Ginsenoside Rf(m/z 845 799)
4. Ginsenoside Rb1(m/z 1153 1107)
5. Ginsenoside Rc(m/z 1123 1077)
6. Ginsenoside Ro(m/z 1001 955)
7. Ginsenoside Rb2(m/z 1123 1077)
8. Ginsenoside Rg2(m/z 829 783)
9. Ginsenoside Rh1(m/z 683 637)
10. Ginsenoside Rd(m/z 991 945)
11. Ginsenoside F1(m/z 683 637)
12. Ginsenoside F2(m/z 829 783)
13. Ginsenoside Rg3(m/z 829 783)

[ACE UltraCore SuperC18色谱柱]人参皂甙分析

Conditions
Column: ACE UltraCore 2.5 SuperC18
Dimensions: 100 x 3.0 mm; 2 x 100 x 3.0 mm (coupled); 3 x 100 x 3.0 mm (coupled)
Part Number: CORE-25A-1003U
Mobile Phase: 

A: 0.1% formic acid in H2O
B: 0.1% formic acid in MeCN

Gradient:

Flow Rate: 0.8 mL/min
Injection: 2 μL (100 x 3.0 mm); 4 μL (200 x 3.0 mm); 6 μL (300 x 3.0 mm)
Temperature: 80 °C
Detection: UV, 203 nm
Sample: 5 x 75 mg tablets ground to fine powder and extracted with 10.0 mL MeCN/H2O (1:1 v/v) for 15 minutes with ultrasonication. 100 μL supernatant diluted with 300 μL water and filtered using a Whatman Mini-Uniprep syringeless filter
System: Chromaster Ultra Rs

芍药苷主要来源于芍药科植物芍药根，具有KY、抗氧化等多种生物活性，广泛应用于化妆品和医药行业中。

连翘苷是木犀科植物连翘的干燥果实的提取物。连翘酯苷A是从连翘中分离得到的苯乙醇苷类成分。在化妆品、护肤品里主要作用是抗 炎剂，保湿剂，抗氧化剂。

2019年6月，国家标准委批准发布了9项化妆品检测相关的新国标。新标准已于2020年1月正式实施。本应用是参照GB/T 37628-2019中GX液相色谱法，采用C18色谱柱TSKgel ODS-100V对化妆品中的芍药苷、连翘苷和连翘酯苷A进行了定量分析。

01 芍药苷的测定

仪器：Thermo Ultimate 3000  

色谱柱：TSKgel ODS-100V（4.6 mm I.D.×15 cm, 5μm）

流动相：0.1%磷酸水溶液 : 乙腈=85 : 15

流速：1.0 mL/min

柱温：25 ℃

进样量：10 μL

检测器：UV@232nm

样品：芍药苷（177.9 mg/L）

芍药苷的色谱图

芍药苷的校准曲线

02 连翘苷和连翘酯苷A的测定

仪器：Thermo Ultimate 3000  

色谱柱：TSKgel ODS-100V（4.6 mm I.D.×25 cm, 5μm）

流动相：甲醇 : 1%乙酸水溶液=70 : 30

流速：1.0 mL/min

柱温：30 ℃

进样量：20 μL

检测器：UV@280nm

样品：连翘苷、连翘酯苷A（18.6 mg/L）

连翘苷、连翘酯苷A的色谱图

连翘苷的校准曲线

03 总结

TSKgel ODS-100V (5 μm,4.6 mm×25cm) 及ODS-100V (5 μm,4.6 mm×15cm) 可满足GB/T 37628-2019中对芍药苷、连翘苷与连翘脂苷A的定量分析。