SDS-PAGE蛋白质电泳问题
-
刚开始跑，在浓缩胶就不在一条线上，有的已经移动一小节了有的还没开始动，但是跑着跑着大约到分离胶时就又到一条线了上了，不知道怎么回事。电泳时感觉加的样有散的趋势，上样20ul，跑着跑着就连成一条线了，对结果有影响没？原因？解决办法！电泳时条带歪了... 刚开始跑，在浓缩胶就不在一条线上，有的已经移动一小节了有的还没开始动，但是跑着跑着大约到分离胶时就又到一条线了上了，不知道怎么回事。电泳时感觉加的样有散的趋势，上样20ul，跑着跑着就连成一条线了，对结果有影响没？原因？解决办法！电泳时条带歪了在Z下面总是乱七八糟的，染色后偏下的地方总是一块不规则紫色的，不是带状。灌胶时胶漏了，对电泳结果有影响没，是不是得重配？分离胶或者浓缩胶配好后使用什么方法使其混匀，用玻璃棒搅拌还是振荡器镇或其他方法以上是我电泳以来的所有问题，感谢所有回答人员。 展开
全部评论(1条)
-
- 爱—清零 2016-12-02 03:38:43
- 1，浓缩胶的要求就是将所有蛋白在浓缩胶和分离胶梯度的时候将所有蛋白压缩成一条线，保证他们在同一起跑线上。如果蛋白样品是不同时间的同一种，可能就是浓缩胶没摇匀。 至于加样散，原因就可能是胶质不均了。对于结果应该影响不大。电泳时条带歪了，说明分离胶不匀，Z前面的溴酚蓝如果不在一条线上，就是这个问题，对于Z终结果有影响，建议重做。当然，在灌注浓缩胶前，你可能使用30%酒精封闭过，酒精除不干净，或者滤纸吸干酒精碰触了胶面，都会有影响，前者会让蛋白传样，导致所有蛋白散了，后者会导致下面电泳条带歪了。 染色后偏下方有紫色，我不清楚，只能认为是杂质……，灌胶漏了无所谓，只要凝固后分离胶能占全版的一半，就能用，兑电泳结果没影响。胶配好后混匀不难，手摇即可。 初学western可以去丁香园看看视频，顺便学下blot，对于以后试验进行会有所帮助。 传送门：http://bbs.bbioo.com/forum.php?mod=viewthread&tid=37871&extra=&highlight=western&page=1
-
赞(1)
回复(0)
热门问答
- SDS-PAGE蛋白质电泳问题
- 刚开始跑，在浓缩胶就不在一条线上，有的已经移动一小节了有的还没开始动，但是跑着跑着大约到分离胶时就又到一条线了上了，不知道怎么回事。电泳时感觉加的样有散的趋势，上样20ul，跑着跑着就连成一条线了，对结果有影响没？原因？解决办法！电泳时条带歪了... 刚开始跑，在浓缩胶就不在一条线上，有的已经移动一小节了有的还没开始动，但是跑着跑着大约到分离胶时就又到一条线了上了，不知道怎么回事。电泳时感觉加的样有散的趋势，上样20ul，跑着跑着就连成一条线了，对结果有影响没？原因？解决办法！电泳时条带歪了在Z下面总是乱七八糟的，染色后偏下的地方总是一块不规则紫色的，不是带状。灌胶时胶漏了，对电泳结果有影响没，是不是得重配？分离胶或者浓缩胶配好后使用什么方法使其混匀，用玻璃棒搅拌还是振荡器镇或其他方法以上是我电泳以来的所有问题，感谢所有回答人员。 展开
2016-12-01 22:05:29
384
1
- 求助SDS-PAGE 电泳测蛋白质分子量
2015-10-05 02:31:22
526
1
- 蛋白质电泳问题
- 请问各位大侠，我的蛋白质酶解液（原液）尚且可以通过SDS-page电泳跑出条带，可为什么酶解液除盐再通过柱层析（用0.02N pH7.0的NaH2PO4和Na2HPO4缓冲液洗脱过柱）纯化后却跑不出电泳条带了呢？快毕业了，请各位救我!!!谢谢大家啊！:~):~):~)大家能说说样品中会... 请问各位大侠，我的蛋白质酶解液（原液）尚且可以通过SDS-page电泳跑出条带，可为什么酶解液除盐再通过柱层析（用0.02N pH7.0的NaH2PO4和Na2HPO4缓冲液洗脱过柱）纯化后却跑不出电泳条带了呢？快毕业了，请各位救我!!!谢谢大家啊！:~):~):~)大家能说说样品中会有哪些因素影响SDS_PAGE的吗？谢谢大家了！痛哭流涕。。， 展开
2010-05-14 01:17:27
361
4
- 怎么做sds-page电泳测定蛋白质相对分子质量曲线
2016-10-14 05:27:40
377
1
- 关于蛋白质电泳的问题
- 在ph8.6的缓冲液中进行血清醋酸纤维素薄膜电泳，可把血清蛋白质分为5条带，从负极数起它们的顺序是? .α1、α2、β、A这几个排序就可以了。我是连α1、α2是什么都没搞懂。。拜托大神了。
2017-11-25 14:11:38
423
1
- SDS-PAGE电泳求助ZT
2017-05-01 15:13:57
335
1
- SDS-PAGE电泳检测灵敏度
2011-04-06 01:27:21
309
4
- sds-page电泳的电压多大
2016-01-22 12:24:38
408
1
- SDS-PAGE电泳的工作原理
2018-03-05 05:00:56
307
1
- 蛋白质sds-page电泳加样时洒到手上有什么影响
2015-10-21 14:58:36
648
1
- SDS-PAGE问题，预染蛋白marker电泳过程中消失什么原因
2016-08-21 12:48:34
363
1
- 蛋白质电泳
- 我有些混乱，老师讲的例子和一些概念没理解清楚，所以问题有点奇怪 拜托帮帮忙π_π ①一种蛋白质电泳，假设它有4条肽链，两两配对，电泳会出现2条带 ？？？ 这对吗？ ②有n种蛋白质在，电泳就会有n条带 ？ ③如果是这样，电泳是电泳出肽链还是蛋白质啊-_-||-... 我有些混乱，老师讲的例子和一些概念没理解清楚，所以问题有点奇怪 拜托帮帮忙π_π ①一种蛋白质电泳，假设它有4条肽链，两两配对，电泳会出现2条带 ？？？ 这对吗？ ②有n种蛋白质在，电泳就会有n条带 ？ ③如果是这样，电泳是电泳出肽链还是蛋白质啊-_-||-_-||-_-||-_-|| 展开
2017-09-23 21:16:47
506
1
- 蛋白质电泳
- 有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pI为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3，电泳时欲使其中四 种泳向正极，缓冲液的pH应是多少 A．4.0 B．5.0 C．6.0 D．7.0 E．8.0
2012-03-05 16:21:04
360
2
- SDS-PAGE电泳可以对蛋白质定量吗？
- SDS-PAGE电泳可以对蛋白质定量吗？如果可以，有什么注意事项，准确性怎么样。和紫外吸收法，考马斯亮蓝发比较，有什么优缺点？
2013-01-20 13:42:28
612
2
- 怎样分析蛋白质sds-page电泳图
2018-12-01 09:55:06
324
0
- 你好，向你请教蛋白质电泳的问题，谢谢。
- 我做的是非变形的聚丙烯酰胺凝胶电泳，考马斯亮蓝染色，脱色之后，在整个泳道出现蓝色，看得到几条带，但是背景蓝色太深，脱不掉，没有点坏啊，凝胶还是好的！ 有的泳道是蓝白相间的竖条纹，有的没有白色，是怎么回事？
2013-03-30 01:40:37
429
1
- sds-page电泳为什么跑不出蛋白条带
2017-05-25 01:13:51
298
1
- SDS-PAGE检测蛋白质分子量的基本原理
2013-01-16 21:41:08
506
3
- SDS-PAGE电泳凝胶中各主要成分的作用?
2012-11-01 17:23:24
464
2
- sds-page电泳能检测蛋白的纯度吗
2018-04-01 00:58:00
536
1
12月突出贡献榜
推荐主页
最新话题
-
- #八一建军节——科技铸盾，仪器护航#
- 如何选择到合适的磷青铜绞线？磷青铜绞线的质量...如何选择到合适的磷青铜绞线？磷青铜绞线的质量解析和如何选择到合适的绞线？磷青铜绞线是一种特殊的铜合金导线，由铜、锡和磷等元素组成，具有很好的机械性能、电气性能和耐腐蚀性。磷青铜绞线基本定义与特性：磷青铜是铜与锡、磷的合金，质地坚硬，可制弹簧。典型成分为铜(90%)、锡(6-9%)及磷(0.03-0.6%)锡元素提升合金的强度和耐腐蚀性，磷则细化晶粒、增强耐磨性铸造性能。耐磨性：表面氧化层使其在特殊环境下耐腐蚀，使用寿命长导电性：保持铜很好导电性能的同时有化电子传输路径非铁磁性：不含铁元素，避免在强磁场环境中产生额外能量损耗弹性：受到外力作用时能迅速恢复原状
- 八一建军节 铁血铸军魂
沪公网安备 31011502008050号
参与评论
登录后参与评论