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有关天根细菌基因组DNA提取试剂盒中第二步革兰氏阳性菌的问题

1516003 2015-01-23 18:43:05 721 浏览

2.向菌体沉淀中加入200µl缓冲液GA，振荡至菌体彻底悬浮。注意：对于较难破壁的革兰氏阳性菌，可略过第2步骤，加入溶菌酶进行破壁处理，具体方法为：加入180µl缓冲液（20mMT... 2. 向菌体沉淀中加入 200 µl 缓冲液 GA，振荡至菌体彻底悬浮。注意：对于较难破壁的革兰氏阳性菌，可略过第 2 步骤，加入溶菌酶进行破壁处理，具体方法为：加入 180µl 缓冲液（20mM Tris， pH8.0；2mM Na2-EDTA；1.2% Triton；终浓度为 20mg/ml 的溶菌酶（溶菌酶必须用溶菌酶干粉溶解在缓冲液中进行配制，否则会导致溶菌酶无活性），37℃处理 30 分钟以上。这个里面的缓冲液是不是需要自己配制？如果需要，如何配制？展开

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全部评论(1条)

a520131400701 2015-01-24 00:00:00

一般DNA提取试剂盒中都是配好的，也可以找替代的缓冲液。如果没有现成的也可以根据参考的配置：Tris—盐酸缓冲液，基本的工具书中都有，溶菌酶也该是用液体低温分装的，根据说明滴加！

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有关天根细菌基因组DNA提取试剂盒中第二步革兰氏阳性菌的问题: 2.向菌体沉淀中加入200µl缓冲液GA，振荡至菌体彻底悬浮。注意：对于较难破壁的革兰氏阳性菌，可略过第2步骤，加入溶菌酶进行破壁处理，具体方法为：加入180µl缓冲液（20mMT... 2. 向菌体沉淀中加入 200 µl 缓冲液 GA，振荡至菌体彻底悬浮。注意：对于较难破壁的革兰氏阳性菌，可略过第 2 步骤，加入溶菌酶进行破壁处理，具体方法为：加入 180µl 缓冲液（20mM Tris， pH8.0；2mM Na2-EDTA；1.2% Triton；终浓度为 20mg/ml 的溶菌酶（溶菌酶必须用溶菌酶干粉溶解在缓冲液中进行配制，否则会导致溶菌酶无活性），37℃处理 30 分钟以上。这个里面的缓冲液是不是需要自己配制？如果需要，如何配制？展开

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