参与评论

评论

登录后参与评论

全部评论(2条)

• 

  忘记那些人bb 2015-04-16 00:00:00

  电泳出现拖尾现象，英文成为smear，就是弥散.其原因，主要从以下两个方面考虑： 1、PCR产物自身原因： 往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多，而造成PCR的非特异性产物 过多. 对策：①减少Taq酶的量，或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量，减少引物的用量 ，减少循环次数，提高退火温度. 2、电泳体系的问题： （1）电泳缓冲液TAE或者TBE的污染，建议更换缓冲液.（2）上样时样品漂了，建议增加上样缓冲液的用量，以及小心加样.（3）电压太高.（4）适当把你的胶的浓度加大.（根据你的片断大小而定）（5）观察你的marker是否也存在拖尾现象，作为对照. 以前有挺多人问过这个问题了 借用下以往问题的Z佳答案

  赞(9)

  回复(0)

  评论

  评论

  登录后参与评论

• 

  sirenzhan591 2017-09-01 04:26:38

  原因有以下： 1、 可以考虑是不是样品不纯，目的产物与杂带相差不大，所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker，marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。 2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液，加2微升溴酚蓝便可，注意上样浓度； 3、可能是原液浓度太大造成的； 4、可能DNA已降解。 5、在提取前对样品进行一定的脱腐处理呀。很简单。有一种TENP buffer，文献中查的到的。 6、 DNA降解避免核酸酶污染。 7、 DNA上样量过多，可以减少凝胶中DNA上样量。 8、 所用电泳条件不合适，可以将电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃，巨大DNA链，温度应 ＜15℃，核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。 9、 DNA样含盐过高，可以在电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。 10、 有蛋白污染，可以采用电泳前酚抽提去除蛋白。 11、 DNA变性，电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA

  赞(1)

  回复(0)

  评论

  评论

  登录后参与评论