全部评论(3条)
-
- 谷赏笪 2012-10-01 00:00:00
- 1.配置PCR反应体系,分装于八连管中 2.在超净台里用灭菌牙签占取少量菌体,将牙签放在八连管液体中涮一下 3.设置PCR仪,进行反应
-
赞(5)
回复(0)
-
- 李凯璇第几啊 2012-10-01 00:00:00
- 菌落PCR要菌长的足够大,一半摇菌保存,另一半做PCR 菌斑一般用灭菌的枪头在超净台挑取即可,在LB(摇菌用)和PCR反应液里蘸一下即可。 反应液按正常反应体系加就可以,全程在冰上操作,加完后稍离心,然后设置好PCR仪的反应程序,进行反应。结果跑一下电泳即可。
-
赞(15)
回复(0)
-
- 烦躁754 2012-09-19 00:00:00
- 1.取15-20ul Tris-HCl 放到编好号的0.5ml 的ep管中 2.用灭菌牙签,或枪头,沾取少量菌体(多了效果不好) 3.并将枪头或牙签在刚取出来的Tris-HCl中涮一下,可以看到溶液略微变浑浊 4.盖上管盖,100C煮沸5-10min 5.离心,取1-2ul上清配制PCR反应体系。如果菌体较多,则取0.5ul就够了 6.设置PCR仪程序,进行反应 7.结果电泳检测即可
-
赞(14)
回复(0)
热门问答
- 菌落PCR的操作步骤及仪器有哪些?
- western blot 的原理及操作步骤、应用有哪些?
- 逆转录PCR的实验步骤用到哪些试剂和仪器
- 熔点仪的操作步骤及使用方法
- 熔融指数分析仪操作步骤有哪些
熔融指数分析仪用于测定各种塑胶、树脂在粘流状态时熔体流动速率MFR值,它既适用于熔融温度较高的聚碳酸酯、聚芳砜、尼龙等工程塑料,也适用于聚乙烯(PE)、聚苯乙烯(PS)、聚丙烯(PP)、ABS树脂、聚甲醛(POM)、聚碳酸酯(PC)树脂等熔融温度较低的塑料测试,广泛地应用于塑料生产,塑料制品、石油化工等行业以及相关院校、科研单位和商检部门。
熔融指数分析仪适用于《Designation: D 1238-04 Standard Test Method for Melt Flow Rates of Thermoplastics by Extrusion Plastometer1》标准中对规定的热塑性塑料熔体质量流动速率的测定,本标准等同采用了的规定,同时可满足ISO 1133:1997GB T3682-2000 热塑性塑料熔体质量流动速度的测定测试标准。
本仪器为台式结构、设计合理性能稳定可靠、外形美观、操作方便。
技术参数:
1.挤压出料部分
料筒口直径:9.5504± 0.0076毫米, 符合ASTM D 1238-04 5.2
料筒长度 :162毫米 符合ASTM D 1238-04 5.2
料筒外径,传感器开孔,光洁度,硬度 符合ASTM D 1238
口模口直径:2.0955 ±0.0051毫米 符合ASTM D 1238-04 5.3
口模口长度:8.000 ±0.025毫米 符合ASTM D 1238-04 5.3
活塞头直径:9.4742±0.0076毫米 符合ASTM D 1238-04 5.4.1
活塞头长度:6.35± 0.13毫米 符合ASTM D 1238-04 5.4.1
2.标准试验负荷(共8级)
3.温度范围:室温-450℃(铸铜发热圈)
4.恒温精度:±0.5℃,
5.显示分辨率:0.1℃
6.切料方式:可选手动或自动切料
7.恒温时间:可连续工作
8.微型打印机自动打印输出
9.电源电压:AC220V±10% 50HZ
操作步骤:
1. 接通电源,开启电源开关,绿色电源指示灯亮,设置测试温度,加热时红色指示灯亮。
2. 待机20分钟,即预设温度稳定后方可开始工作。
3. 试样准备,在天平上称取4--5g ,试样以备测试。
4. 加料,当温度稳定后即可加料。取出料杆,轻放于耐高温的物体上,把漏斗插入料筒内,边加料边振动漏斗,使料快速漏下。加料完毕,用压料杆将料压实,以减少气泡,再插入料杆,放好定位套,套上砝码托盘(加料操作必须在一分钟内完成)。
5. 加料完毕后,预热4-6分钟,加上所需砝码,准备切割取样。
6. 当料杆下降到下标记线时,开始计时切割。下降到上标记线时试验停止。切割取样应在料杆的上下标记线之间。
7. 每个样条切割间隔时间根据所测物体决定,一般每间隔60s或30s切割一次,每个样条长度一般在20mm---50mm左右。
8. 样条取舍称重、将肉眼可见气泡的样条丢弃,将保留的样条(至少三个)逐个称重,准确到0.0001g ,求出平均重量。
9. 计算结果,求出熔融指数。
10. 测试完毕,用干净纱布将料杆、料筒、口模趁热清洗干净,以备下次测试。
- 烟雾试验箱操作步骤有哪些
试验前操作步骤说明
3-1 接气:
将准备好的气源插入盐雾机背部调压阀,并将压力调整至2kg/cm2。详见2-2气源准备。
3-2 加水:
a) 试验室加水:打开电源,注意观察试验室低水位指示灯(面板上靠左边的低水位灯),如果指示灯亮起,那么说明试验室缺水。
将试验室上盖打开,直接将准备好的纯净水倒入箱内,直至试验室低水位指示灯熄灭(说明试验室水位已加满),注意加水过程中不要将水洒进盐水预热槽(位于喷雾塔下方)。
b) 压力桶加水:注意观察压力桶低水位指示灯(面板上靠右边
的低水位灯),如果指示灯亮起,那么说明试验室缺水。
在盐雾机背部有一个灰色的漏斗状注水口,如图所示:
将注水口红色阀门打开(请注意旋转方向,否则会被拧断),
将准备好的纯净水缓缓加入漏斗里,由于口径不大,水下流
速度较慢,请缓慢耐心加入。直至压力桶低水位指示灯熄灭,
说明压力桶水位已加好。
c) 密封水槽加水:在盐雾机箱盖四周水槽内需加适量纯净水,以避免仪器工作时盐雾从四周溢漏出来,
3-3 盐水调配及注入:
中性盐雾试验(CNS):
a) 建议准备每瓶500g装的分析纯氯化钠用于试验溶液的调配。
b) 用我们赠送的5000ML防锈塑料桶量取9500ML纯净水,倒入一个更大的干净塑料桶内,加入准备好的500g分析纯氯化钠,搅拌至完全融化,此时盐水浓度比为5%。
c) 缓慢倒入“试药入口”处,如图所示:
此时盐水将逐步流入试验室内的盐水预热槽。
d) 其他质量的分析纯氯化钠请自行按照5%的浓度比进行配置
3-4 备注
仪器在运行过程中,可能会出现试验室、
压力桶缺水报警,提示我们需要及时的给仪器
进行相对应部位的补水工作,在仪器缺水状态
下,会自动停止工作,以保护仪器本身不会干
烧,正常工作状态如右图所示:
加水过程中请关闭“操作”按钮,加水方法和
上述完全一致,待各水位完全加好(所有低水位指示
灯熄灭)之后,再打开“操作”按钮,重新进行工作,
由于我们时间继电器具有自动停电记忆功能,请勿担
心前面所做试验时间被清零。
当盐水缺少时,我们要打开“试药入口”的小盖子进
行观察,如果盐水缺少,请重新调配盐水,并保证工作时
始终有盐水保持。
- klida全站仪操作步骤及方法
- klida全站仪操作步骤及方法
- 紫外老化试验箱:基本原理及操作步骤
紫外老化试验箱是一种用于模拟自然环境中的紫外线、湿度和温度对材料老化影响的设备。它被广泛用于研究材料的耐久性、性能和可靠性,是产品质量控制和研发过程中不可或缺的实验设备。
上海和晟 HS系列 紫外老化试验箱紫外老化试验箱通常由箱体、紫外灯、控温系统、湿度控制系统和样品旋转系统等组成。箱体用于容纳样品,紫外灯用于模拟太阳光中的紫外线,控温系统用于控制试验温度,湿度控制系统用于控制试验湿度,样品旋转系统用于使样品均匀受到紫外线的照射。
操作紫外老化试验箱的步骤如下:
准备样品:将需要测试的材料制作成标准样件,并清洗干净。
设置试验参数:根据测试需求,设置试验温度、试验湿度和紫外灯的照射时间等参数。
将样品放入试验箱:将准备好的样品放入试验箱中,确保样品均匀受到紫外线的照射。
开启试验箱:开启试验箱的电源,启动试验。
定期观察样品的的变化:在试验过程中,需要定期观察样品的颜色变化、性能变化等,记录实验数据。
结束试验:达到设定的试验时间后,关闭试验箱的电源,结束试验。
使用紫外老化试验箱时需要注意以下事项:
注意安全:试验过程中,需要避免手伸入试验箱中,以防烫伤或者紫外线过度照射伤害皮肤。
保养设备:定期清洗试验箱内部,更换滤网,保持设备的良好运行状态。
正确使用设备:根据设备操作手册进行操作,避免误操作导致设备损坏或者样品测试结果不准确。
在使用紫外老化试验箱的过程中,可能会遇到一些问题,例如紫外灯不亮、控温系统失灵等。对于这些问题,可以参考设备操作手册或者联系设备生产商进行解决。
紫外老化试验箱具有模拟自然环境老化的作用,可以有效地检测材料的耐久性、性能和可靠性。但是,由于设备的价格较高,维护成本也较高,因此需要在购买和维护设备时进行综合考虑。
总之,紫外老化试验箱是一种重要的材料老化测试设备,可以有效地帮助研究人员了解材料的性能和可靠性。在使用设备时,需要注意安全和设备的保养,同时正确使用设备,避免误操作对设备造成损坏或者影响测试结果的准确性。
- 织物QL机的操作步骤有哪些
- 混凝土压力试验机操作步骤有哪些呢?
- 医用口罩燃烧测试仪操作步骤有哪些
测试仪器的使用容不得半点马虎,特别是有些步骤一定要按照规矩来,否则,测试结果出现异常也就理所应当了。那么,医用口罩燃烧测试仪操作步骤是什么?了解了这个问题,才能帮助大家更好地使用医用口罩燃烧测试仪。下面,上海千实就为大家带来相关的介绍说明。
1、插上仪器后盖板的电源插座接通电源,逆时针方向将随机所带煤气减压阀扭到煤气瓶上打开气瓶阀门接通燃气源。
2、将燃烧试验箱前门关好,并将“电源”开关置于“开”的位置,电源指示灯亮。
3、首先使金属头模鼻尖部分向下,将口罩带在金属头模上,按动“头模始动”按钮,头模开始转动,当头模鼻尖部分刚好位于点火器正上方时,按动“阴燃停止”按钮,让头模停止转动,调整点火器头的高度(顺时针旋转点火器头降低,逆时针旋转点火器头升高)使点火器顶端和头模鼻尖处距离为20±2mm;
4、按动“点火器返回”按钮使燃烧器恢复至点火位。
5、按动“头模返回”按钮让头模恢复至起始位。按动“清零”键,仪器即恢复到初始状态。
6、一直按住“点火”按钮,调节面板上“压力调节”旋钮(先向外轻轻拔起,然后按照旋钮端部指示“+”方向旋转为增加,“-”方向旋转为减少来调节),使仪器箱顶部压力表指针指在20Kpa,然后按下旋钮锁住压力。(出厂时已调好)
7、此时点火电阻丝已变红,待点燃点火器后再松开“点火”按钮。点火困难时,请调节“火焰”调节按钮,顺时针方向为减少可燃气体流量,逆时针方向为增加可燃气体流量。
8、打开燃烧试验箱前门,用手将火焰高度尺(高40mm)置于火焰正前方,旋“火焰调节”旋钮,调节火焰高度至40mm±2mm,待火焰稳定后,移开火焰高度尺,此时观察仪器面板上的“温度显示”是否稳定在800±50℃,若不足可通过增加气瓶减压阀的进口压力来调节,使火焰温度稳定在800±50℃。
9、按“点火器始动”按钮,点火器移至点火位置,按动“头模始动”按钮,头模开始转动,头模转动到位后,点火器停气并复位,“续燃时间”自动计时;续燃结束后,按“续燃停止”键;若无续燃,直接按“续燃停止”键,待阴燃结束,再按“阴燃停止”键,并记录续燃时间和阴燃时间。
10、按动“头模返回”按钮使头模恢复至起始位,打开燃烧试验箱前门取下试样,本次试验结束。
11、按动“清零”键,仪器即恢复到初始状态,将下一个口罩试样带在金属头模上,此时可按照6—11的步骤进行下一次试验。若不需要下次试验,请关闭电源,拔下电源插头,拿出残渣容器将燃烧残渣清理干净。
12、若要测试口罩带的阻燃性,则须将口罩戴到金属头模上后,松开“头模定位螺钉”,旋转头模使口罩带向下。按动“头模始动”按钮,头模开始转动,当头模刚好位于点火器正上方时,按下“阴燃停止”按钮,使头模停止转动,调整点火器头的高度使点火器顶端和头模Z低处距离为20±2mm;
13、按照6-11的步骤进行测试。
- 医用口罩阻燃性能测试仪操作步骤有哪些
医用口罩阻燃性能测试仪主要用于测试防护面罩、防毒面具等以一定线速度接触火焰后的燃烧性能,是面罩类产品阻燃性能专用测试仪器。
技术指标:
1、面罩夹具为金属头模,能够模拟面罩的使用状态。
2、燃烧器配有丙烷(液化气)等可燃气体接口。手持电子脉冲点火器,方便点火。
3、按照全面罩的高度,仪器出厂前已调整好全面罩和燃烧器的距离。
4、其他类型的面罩可通过更换燃烧器部件实现测试距离调整。
5、燃烧器自动定时定位,在点火位进行火焰高度和火焰温度的标定。
6、燃烧时间、阴燃时间均自动记录,数字显示。
7、配有火焰温度热电偶测量探针、火焰温度显示器。
8、火焰高度标尺和火焰温度探针可水平转动并上下移动,满足随燃烧器高度调整的测量要求。
9、头模鼻子JD的水平运动线速度为(60±5)mm/s,头模可在垂直面转动。
10、火焰高度可以调节(标准要求40±4mm)
11、火焰温度热电偶测量探针的直径为1.5mm
12、火焰在距燃烧器顶端高度为(20±2)mm处温度为(800±50)℃
13、金属头模壁厚2~3mm,耐火焰耐燃烧
14、续燃时间和阴燃时间计时器:0~99.99秒,精度:±0.01秒
15、工作电源:AC220V,50Hz,50W
16、重量:约30kg。
17、用户自备:丙烷气体一罐。
适用标准:
GB 2626-2006 呼吸防护用品 自吸过滤式防颗粒物呼吸器
GB 2890-2009 呼吸防护 自吸过滤式防毒面具
GB 21976.7-2012 建筑火灾逃生避难器材 第7部分:过滤式消防自救呼吸器
BS EN 136 《Respiratory protective devices—Full face masks—Requirements, testing, marking》8.5.1 Class 1 full face masks
操作步骤:
1、插上仪器后盖板的电源插座接通电源,逆时针方向将随机所带煤气减压阀扭到煤气瓶上打开气瓶阀门接通燃气源。
2、将燃烧试验箱前门关好,并将“电源”开关置于“开”的位置,电源指示灯亮。
3、 首先使金属头模鼻尖部分向下,将口罩带在金属头模上,按动“头模始动”按钮,头模开始转动,当头模鼻尖部分刚好位于点火器正上方时,按动“阴燃停止”按钮,让头模停止转动,调整点火器头的高度(顺时针旋转点火器头降低,逆时针旋转点火器头升高)使点火器顶端和头模鼻尖处距离为20±2mm;
4、按动“点火器返回”按钮使燃烧器恢复至点火位。
5、按动“头模返回”按钮让头模恢复至起始位。按动“清零”键,仪器即恢复到初始状态。
6、一直按住“点火”按钮,调节面板上“压力调节”旋钮(先向外轻轻拔起,然后按照旋钮端部指示“+”方向旋转为增加,“-”方向旋转为减少来调节),使仪器箱顶部压力表指针指在20Kpa,然后按下旋钮锁住压力。(出厂时已调好)
7、 此时点火电阻丝已变红,待点燃点火器后再松开“点火”按钮。点火困难时,请调节“火焰”调节按钮,顺时针方向为减少可燃气体流量,逆时针方向为增加可燃气体流量。
8、 打开燃烧试验箱前门,用手将火焰高度尺(高40mm)置于火焰正前方,旋“火焰调节”旋钮,调节火焰高度至40mm±2mm,待火焰稳定后,移开火焰高度尺,此时观察仪器面板上的“温度显示”是否稳定在800±50℃,若不足可通过增加气瓶减压阀的进口压力来调节,使火焰温度稳定在800±50℃。
9、按“点火器始动”按钮,点火器移至点火位置,按动“头模始动”按钮,头模开始转动,头模转动到位后,点火器停气并复位,“续燃时间”自动计时;续燃结束后,按“续燃停止”键;若无续燃,直接按“续燃停止”键,待阴燃结束,再按“阴燃停止”键,并记录续燃时间和阴燃时间。
10、按动“头模返回”按钮使头模恢复至起始位,打开燃烧试验箱前门取下试样,本次试验结束。
11、 按动“清零”键,仪器即恢复到初始状态,将下一个口罩试样带在金属头模上,此时可按照6—11的步骤进行下一次试验。若不需要下次试验,请关闭电源,拔下电源插头,拿出残渣容器将燃烧残渣清理干净。
12、若要测试口罩带的阻燃性,则须将口罩戴到金属头模上后,松开“头模定位螺钉”,旋转头模使口罩带向下。按动“头模始动”按钮,头模开始转动,当头模刚好位于点火器正上方时,按下“阴燃停止”按钮,使头模停止转动,调整点火器头的高度使点火器顶端和头模ZD处距离为20±2mm;
13、按照6-11的步骤进行测试。
- 垂直燃烧实验仪操作步骤有哪些
垂直燃烧实验仪主要用于有阻燃要求的服装织物、装饰织物、帐篷织物等阻燃性能的测定, 也适用于有阻燃要求的橡胶/塑料及其他材料的阻燃性能测定。
技术指标:
1、试样尺寸:纺织品:300mm×80mm
2、燃烧器的移动电机消耗功率:10W
3、点火器计时:0~99.99秒任意设置,(标准采用12秒)
4、续燃时间和阻燃时间计时器:0~99.99秒,精度:±0.01秒
5、火焰高度测量装置:标尺高40mm
6、使用气体:丙烷或丁烷或石油液化气
适用标准:
GB/T 5455-1997《纺织品 燃烧性能试验 垂直法》
GB5725-2009 安全网
GB/T 13489-2008《橡胶涂覆织物燃烧性能测定》
ISO 1210-1996《塑料在与小火源接触中垂直样品燃烧性能的测定》
GB 8965.1-2009
GB23864-2009
GB/T 5455-1997
仪器特征:
不锈钢箱体,配备透明管侧窗
本生灯火焰,符合ASTM D5025标准
点火时间可自由设定
计时器精度为0.1秒
提供标准不锈钢样品夹
通过不同样品夹的替换,可符合不同标准要求
自动移动本生灯方式,点燃及熄灭过程中无时差
电阻丝点火
具有三种燃烧器和可变尺寸燃烧箱可以根据不同试验选择使用
燃烧器自动定时定位
点火时间0~99.99秒任意设定,续燃时间、阻燃时间均自动记录,数码显示
火焰高度可调整,并可配置火焰温度测量装置
"推拉式"样架固定装置
操作步骤:
1.将控制模式开关设置为自动位置;
2.准备好您的测试样品,并将其安装在仪器测试室内适当的支架中;
3.如果可以的话,按照你的测试方法,将燃烧器放置在样品下方;
4.在AGC上,通过向上提起拨动杆打开主气体关闭阀,直到拨动杆从面板上指向外;
注意:打开这个阀门可以让气体进入先导燃烧器,必须立即点燃先导器;
5.点燃先导燃烧器;
6.关闭仪器室门;
7.按下AGC上运行时间显示下面的计时器复位按钮。如果显示器正在计数,按定时器开始按钮关闭它。按定时器复位按钮使显示为零;
8.要启动测试,同时按下AGC上的燃烧器启动按钮和计时器启动按钮。(正确操作将由两个开关的照明指示。如果两者都没有点亮,按下计时器开始开关熄灭灯,并按下运行时间显示下面的计时器复位按钮。同时再次按下两个启动开关启动测试;
9.当计时器指示15秒(HMV)或12秒(VFC)时,燃烧器将熄灭。您可以通过按定时器开始按钮,让已经过的时间显示继续计数并按需要停止它。您还可以使用定时器启动按钮停止它,使用定时器复位开关将其复位为零,并通过按定时器启动按钮重新启动它以计时烧伤事件。再次按定时器开始按钮来停止它;
10.使用上面描述的运行时间显示或使用AGC提供的手持事件计时器计时所需的事件;
11.额外的测试可以通过重复上面的步骤6-8进行;
12.当您完成AGC的使用后,总是通过将切换杆推到完全向下的位置(不要指向面板外)来关闭主气体关闭阀。切断你的油箱或设备的气体供应。通过将控制模式开关移动到ZX位置,电动关闭AGC。
- 环保rohs检测仪操作有哪些步骤?
环保ROHS检测仪操作
随着全球对环境保护和电子产品安全的关注日益增加,ROHS(Restriction of Hazardous Substances)指令已经成为电子产品合规性的重要标准。ROHS检测仪作为确保产品符合环保要求的关键工具,广泛应用于电子制造、消费品检测和其他相关行业。本文将深入探讨环保ROHS检测仪的操作流程,帮助用户正确使用该设备,以确保产品能够顺利通过ROHS合规性检测,提升企业的市场竞争力。
ROHS检测仪通常用于检测产品中是否含有过量的有害物质,如铅、镉、汞等六种危险化学物质。其操作过程不仅需要对仪器本身有充分的了解,还需要掌握相关的标准与检测方法。为了确保测试结果的准确性和可靠性,操作人员必须遵循一系列严格的操作步骤,包括样品的准备、仪器的校准、测试条件的设置等。不同的ROHS检测仪型号可能具有不同的功能和操作流程,因此,理解设备的使用手册和技术参数对于正确操作至关重要。
在实际操作中,首先需要对测试样品进行准确的取样,并确保样品的代表性。使用ROHS检测仪进行必要的校准,确保仪器能够提供准确的检测结果。然后,选择适当的测试模式并启动测试过程。在测试过程中,操作人员需要密切关注仪器显示的各项数据,并在测试结束后对结果进行分析和评估。如果检测结果显示有害物质含量超标,企业需要及时采取措施,修改生产工艺或选择合规的材料,以确保产品达到ROHS标准。
环保ROHS检测仪的操作不仅仅是一个简单的测量过程,它涉及到对设备的全面理解、对测试标准的准确把握以及对产品质量的严格要求。通过科学、规范的操作,可以确保电子产品符合环保要求,为企业赢得消费者的信任和支持。
- 气相色谱仪的操作步骤是哪些?
- 气相色谱仪怎么使用,有哪些操作步骤,能详细说说吗
- western blotting的原理、操作步骤及意义
- 比色测定的基本原理是什么?操作步骤有哪些
- 比色测定的基本原理是什么?操作步骤有哪些?
- 气相色谱测丙二醇含量的操作步骤有哪些?
气相色谱测丙二醇含量的操作步骤有哪些?
- ELISA各个操作步骤的注意要点有哪些?
ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。
一、标本的采取和保存
可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。
二、试剂的准备
按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
三、加样
在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀释的血清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。
四、保温
在ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA中似不恰当。
ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。
温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时,产物的生成可达。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成最多的沉淀。但因所需时间太长,在ELISA中一般不予采用。
保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外,一般均采用水浴,可将ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平衡。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA板应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指20-25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时,ELISA板只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板同时测定。
5月突出贡献榜
推荐主页
最新话题
-
- #DeepSeek如何看待仪器#
- 干体炉技术发展与应用研究
- 从-70℃到150℃:一台试验箱如何终结智能...从-70℃到150℃:一台试验箱如何终结智能调光膜失效风险?解决方案:SMC-210PF-FPC温湿度折弯试验箱的五大核心价值1. 多维度环境模拟,覆盖全生命周期测试需求超宽温域:支持-70℃至+150℃的极限温度模拟(可选配),复现材料在极寒、高温、冷热冲击下的性能表现;控湿:湿度范围20%~98%RH(精度±3%RH),模拟热带雨林、沙漠干燥等复杂工况,暴露材料吸湿膨胀、分层缺陷;动态折弯:0°~180°连续可调折弯角度,支持R1~R20弯曲半径设定,模拟实际装配中的微小应力,提前预警裂纹、断裂风险。
参与评论
登录后参与评论