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血清铁测定试剂盒说明书

本文由 上海恒远ELISA试剂盒供应商 整理汇编

2018-11-16 10:02 2325阅读次数

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血清铁测定试剂盒说明书50T一、原理:在酸性溶液和还原剂的作用下,使运铁蛋白中铁与蛋白分离,使血清中的高铁还原成亚铁,后者与双吡啶结合成粉红色的络合物,在一定范围内,铁离子的多少与色泽成正比。二、试剂的组成与配制:1、100mg/L铁标准贮备液:1ml溶液一瓶,4℃保存3个月。2mg/L铁标准应用液的配制:取铁标准贮备液0.2ml加蒸馏水定溶至10ml,4℃保存。2、铁显色剂:2号甲粉剂一支,2号乙粉剂一支,二号丙液100ml×1瓶,4℃保存6个月。用时将甲、乙二粉剂倒入丙液中,充分混匀,溶解,即为铁显色剂,4℃避光保存。三、操作表:空白管O标准管S测定管U蒸馏水(ml)0.52mg/L铁标准应用液(ml)0.5血清(ml)0.5铁显色剂(ml)1.51.51.5混匀后,沸水浴5分钟,(空白及标准管可以不煮),冷却后离心,3500转/分,离心10分钟,取上清液1.0ml,0.5cm光径,波长520nm,双蒸水调零,测各管吸光度OD值。四、计算与举例:1、计算公式:血清铁(mg/L)=×标准浓度(2mg/L)血清铁(umol/L)=×标准浓度(35.81umol/L)*标准管铁含量为2000ug/L,铁原子量为55.847,所以标准管铁含量为35.81umol/L2、举例:取血浆0.5ml按操作表进行血清(浆)铁测定,在520nm处,0.5cm光径,测定各管吸光度为:空白管0.000,标准管0.038,测定管0.037,则计算如下:血清铁(umol/L)=×标准液浓度=×35.81=34.87(umol/L)五、注意点:1、玻璃器材需严格清洗,避免铁的污染,建议**用一次性塑料试管。2、若上清浑浊,可再用另一试管再次离心后比色。

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