Elisa检测双抗体夹心法原理介绍

本文由 上海恒远ELISA试剂盒供应商 整理汇编

2018-11-16 10:02 1897阅读次数

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• Elisa检测双抗体夹心法原理介绍

  双抗体夹心法原理：固相载体上包被抗体，再加入待测抗原(可以是血清或者其它样本)，洗板(洗掉非特异性吸附)，再加入酶标抗体，再洗板(洗掉非特异性吸附)，再加底物显色。这里有几点需要注意：①抗原是大分子抗原，具有2个以上的抗原表位；②包被抗体和酶标记的抗体都是针对抗原的特异性抗体，只不过它们分别针对的是不同抗原表位，经常被称作一抗和二抗；③酶是催化底物显色的，起到一个信号放大作用。操作步骤：1.将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2.加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3.加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。4.加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。[详细]

  2018-11-16 10:02

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• 同型半胱氨酸（Hcy）小鼠Elisa试剂盒 双抗体夹心法 酶联免疫说明书

  同型半胱氨酸（Hcy）小鼠Elisa试剂盒双抗体夹心法酶联免疫说明书保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中同型半胱氨酸（Hcy）的含量。同型半胱氨酸（Hcy）小鼠Elisa试剂盒双抗体夹心法酶联免疫说明书计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。同型半胱氨酸（Hcy）小鼠Elisa试剂盒双抗体夹心法酶联免疫说明书操作步骤：标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为12μmol/L，8μmol/L，4μmol/L，2μmol/L，1μmol/L）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。同型半胱氨酸（Hcy）小鼠Elisa试剂盒双抗体夹心法酶联免疫说明书广锐生物汇集Elisa试剂盒（种属标本：人、大鼠、小鼠、兔子、鸡、猪、牛、豚鼠、犬、马、猴、羊、各类植物等等）、标准品|对照品、抗体、培养基、试剂为一体的科研产品供应商，畅销国内各省市地区，拥有雄厚的实力、合理的价格和优良的技术服务，能够及时解决和满足客户的各方面的需求，国家ZD实验室及国内各大院校长期指定供应商电话：021-607233331367159728513651721751[详细]

  2018-10-23 10:30

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• 夹心法ELISA检测白细胞介素8（IL-8）

  夹心法ELISA检测白细胞介素8（IL-8）[详细]

  2015-04-14 00:00

  期刊论文

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• 猪伪狂犬病毒抗原双抗夹心法实验检测说明

  猪伪狂犬病毒抗原双抗夹心法实验检测说明[详细]

  2016-08-16 00:00

  标准

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• 夹管阀原理

  夹管阀原理[详细]

  2014-11-01 00:00

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• 人纤维蛋白原抗体（FIB Ab）原理介绍

  广锐生物-国内高、优Elisa试剂盒供应商人纤维蛋白原抗体（FIBAb）原理介绍标准品：180pg/ml0.5ml×1瓶标准品稀释液1.5ml×1瓶酶标试剂3ml×1瓶样品稀释液3ml×1瓶显色剂A液3ml×1瓶人纤维蛋白原抗体（FIBAb）原理介绍目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中纤维蛋白原抗体（FIBAb）含量。实验原理：本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人纤维蛋白原抗体（FIBAb）水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入纤维蛋白原抗体（FIBAb），再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的纤维蛋白原抗体（FIBAb）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人纤维蛋白原抗体（FIBAb）浓度。人纤维蛋白原抗体（FIBAb）原理介绍[详细]

  2018-10-23 10:30

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• 产品介绍 - 软管，软管夹

  产品介绍 - 软管，软管夹[详细]

  2014-09-11 00:00

  选购指南

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• 用于检测抗体的ELISA

  间接ELISA（酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒）本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎（DVH）抗体的ELISA（酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒）为例，间接ELISA（酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒）的操作程序如下。　　（1）材料　　①包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液；　　②DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清；待检鸭血清；　　③ELISA（酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒）检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。　　（2）方法步骤　　①加抗原包被→4℃过夜，洗涤三次、抛干　　②加待检血清→37℃2小时，洗涤三次、抛干　　③加酶标抗体→37℃2小时，洗涤三次、抛干　　④加底物液→37℃30分钟，加终止液　　⑤用ELISA（酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒）检测仪测定OD值，并计算出P/N比值。　　（3）结果判定已知阳性血清与已知阴性血清的比值（P/N）≥2.1，而且已知阳性血清的OD值≥0.4；在上述条件成立的情况下，如果待检血清与已知阴性血清的比值（P/N）≥2.1，而且待检血清的OD值≥0.4，则判为阳性，否则判为阴性。[详细]

  2018-11-15 10:03

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• ELISA法检测丝虫抗体

  上海金穗生物公司是一家专业经营生物试剂、标准品、试剂耗材的公司，生物引擎在广大用户的帮助和支持下，经过不懈的努力，已成为国内生命科学领域产品的主要供应商之一，主要经营ELISA试剂盒、细胞、血清、抗体、金标试剂盒、生物试剂、耗材、培养基、一抗、二抗等产品，产品畅销国内大部分地区，销售额逐年稳步提高。上海金穗生物公司拥有雄厚的实力、合理的价格和优良的服务，能够及时解决和满足客户的各方面的需求，公司的服务和业务网络遍及全国，在同行获得一致好评。www.shjsbio.com[详细]

  2024-09-29 23:29

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• 大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒

  大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

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• 人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)检测试剂盒

  人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)检测试剂盒[详细]

  2015-03-12 00:00

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• 新版人 （Human） 抗胰岛素受体抗体 （AIRA） ELISA 检测试剂盒原理

  人(Human)抗胰岛素受体抗体(AIRA)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：AIRA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知AIRA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将AIRA和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中AIRA的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：80U/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗AIRA抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料蒸馏水。加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。人(Human)抗胰岛素受体抗体(AIRA)ELISA检测试剂盒操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：80U/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。40U/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液20U/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液10U/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液5.0U/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液2.5U/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0U/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（U/ml）A8080样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B4040样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C2020样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D1010样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E5.05.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F2.52.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。人(Human)抗胰岛素受体抗体(AIRA)ELISA检测试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的AIRA标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的AIRA含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-80U/ml4、敏感度：0.1U/ml[详细]

  2018-09-19 10:00

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• 酶标仪检测原理及用途介绍

  酶标仪检测原理及用途介绍[详细]

  2024-09-12 18:29

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• 产品介绍 - 夹 - 实验室支架用

  产品介绍 - 夹 - 实验室支架用[详细]

  2014-09-16 00:00

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• 猪口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒

  猪口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒[详细]

  2015-07-08 00:00

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• 甲肝病毒抗体ELISA检测试剂盒

  甲肝病毒抗体ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人甲肝病毒IgG（HAV-IgG）抗原的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗原，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人甲肝病毒抗体IgG（HAV-IgG）的存在与否。样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱甲肝病毒抗体ELISA检测试剂盒操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3.预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的检测效果。4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5.所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无阴性对照0.5mL0.5mL无阳性对照0.5mL0.5mL无检测抗原-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL无底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。2.自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置阴、阳性对照孔和样本孔，阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL；3.待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；4.随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗原100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。甲肝病毒抗体ELISA检测试剂盒结果判断1.试验有效性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；阴性对照孔OD值平均值≤0.15。2.临界值（Cutoff）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.153.阴性判断：样品OD值＜临界值（Cutoff），样品为阴性4.阳性判断：样品OD值＞临界值（Cutoff），样品为阳性试剂盒性能1.准确性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；阴性对照孔OD值平均值≤0.15，说明试验结果有效。2.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。4.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。5.有效期：6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。[详细]

  2018-11-05 10:00

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• 氧化低密度脂蛋白ELISA试剂盒原理介绍

  使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)含量。氧化低密度脂蛋白ELISA试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平。用纯化的人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)，再与HRP标记的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（320g/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。氧化低密度脂蛋白ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。160g/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液80g/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液40g/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液20g/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液10g/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l，待测样品孔中先加样品稀释液40l，然后再加待测样品10l（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50l，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50l，再加入显色剂B50l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。氧化低密度脂蛋白ELISA试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-09-19 10:00

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  安装说明

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