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Biochrom 30+应用于苹果汁中游离氨基酸检测
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本文由 大昌洋行(上海)有限公司(大昌华嘉科学仪器部) 整理汇编
2024-09-20 22:45 688阅读次数
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Biochrom 30+应用于苹果汁中游离氨基酸检测
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Biochrom 30+应用于苹果汁中游离氨基酸检测
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UHPLC-QuadrupoleMS检测十字花科植物中的游离氨基酸
- 中文摘要:采用超GX液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用技术(UHPLC-Quadrupole/OrbitrapMS)结合柱前衍生法建立了可同时测定28种游离氨基酸的分析方法,并对十字花科植物中的游离氨基酸进行检测和分析。样品用超纯水提取后,经6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯(AQC)衍生,采用WatersBEHC18柱作为色谱柱,以pH5.0乙酸铵缓冲溶液和80%乙腈水溶液作为流动相进行梯度洗脱。质谱检测器采用电喷雾离子源,在正离子模式下进行检测。实验结果表明,十字花科植物中含有25种以上游离氨基酸,其中包括人体必需的8种氨基酸。25种氨基酸在线性范围内相关性良好,平均加标回收率为80.5%~104.4%,相对标准偏差为0.6%~4.4%。不同氨基酸检测灵敏度不同,定量下限为0.01~1.45μmol/L。该方法杂质干扰小,分析速度快,灵敏度高,适用于植物样品中游离氨基酸的同步检测。中文关键词:超GX液相色谱高分辨质谱游离氨基酸十字花科植物[详细]
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植物游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒产品说明书
- 植物游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途植物游离氨基酸含量比色法定量检测试剂是一种旨在通过显色染料茚三酮与游离氨基酸的氨基发生反应,在热处理下,产生蓝色复合物,由分光光度仪比色分析,定量检测样品中游离氨基酸含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心设计、成功实验证明的。适用于各种植物组织,包括种子(seed)、叶片(leaf)、根(root)等裂解悬液样品的游离氨基酸含量检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测准确。技术背景氨基酸(aminoacid或α-aminoacid)是一种含有胺和羧基功能基团的分子,为生物体中Z必须的元素。根据其侧链的不同,分成四类(弱酸、弱碱、极性、非极性)和20种各种不同的氨基酸;根据其光学异构体(opticalisomers),又分成L型和D型。L-氨基酸是构成蛋白质的主要结构分子。氨基酸是多肽、蛋白质和辅酶等的组成单位,具有各种代谢作用和营养价值。基于游离氨基酸的游离氨基与茚三酮(ninhydrin)反应,产生中间产物酮酸(ketoacid)和氨分子,进而在热处理下,进行脱羧基过程(仅发生于游离氨基酸),同时产生蓝色复合物,在分光光度仪(570nm波长)下,呈现吸光峰值的变化,来定量分析游离氨基酸的总含量。其反应系统如下:产品内容清理液(ReagentA)毫升萃取液(ReagentB)毫升缓冲液(ReagentC)毫升反应液(ReagentD)毫升标准液(ReagentE)微升产品说明书1份保存方式保存萃取液(ReagentB)和标准液(ReagentE)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反应液(ReagentD)具有挥发性,严格密闭瓶盖,避免光照;有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于标准液配制和样品操作的容器15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器干式恒温仪:用于反应孵育DOUNCE匀浆器:用于裂解组织微型台式离心机:用于样品操作比色皿:用于比色分析的容器分光光度仪:用于比色分析实验步骤一、样品准备准备好新鲜的植物组织(叶片、谷粒、种子等),并秤重以确定1克组织重量(选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管(选择步骤)加入xx毫升清理液(ReagentA)清洗1次即刻用刀片切碎组织放进一个预冷的15毫升锥形离心管加入预冷的xx毫升萃取液(ReagentB)涡旋震荡5秒,充分混匀即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用匀浆棒匀化组织(约80下)将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管,放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为5000g(或7500RPM,例如eppendorf5415)小心移出上清液(注意:不要触碰沉淀物)到另一个新的预冷的1.5毫升离心管(选择步骤)如果上清液含有肉眼可见的残渣,重复离心5分钟一次,速度为5000g(或7500RPM,例如eppendorf5415)移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-30030.1)放进-70℃的冰箱里保存或置于冰槽里备用二、标准样品配制准备好5个1.5毫升离心管,标记为1至5号管分别加入xx微升缓冲液(ReagentC)到1至5号管移取xx微升标准液(ReagentE)到1号管,混匀小心移取xx微升1号管稀释的标准液(ReagentE)到2号管,混匀小心移取xx微升2号管稀释的标准液(ReagentE)到3号管,混匀小心移取xx微升3号管稀释的标准液(ReagentE)到4号管,混匀将1至5号管放进冰槽里备用;标准管浓度见下表管号缓冲液(ReagentC)标准液(ReagentE)标准氨基酸浓度1xx微升xx微升xx微摩尔/升2xx微升xx微升1号管xx微摩尔/升3xx微升xx微升2号管xx微摩尔/升4xx微升xx微升3号管xx微摩尔/升5xx微升00微摩尔/升标准曲线测定加入xx微升缓冲液(ReagentC)到1.5毫升离心管加入xx微升上述配制的标准液(ReagentE)加入xx微升反应液(ReagentD)涡旋震荡15秒放进90℃干式恒温仪孵育5分钟,避免光照放进冰槽里1分钟转移到比色皿即刻放进分光光度仪检测(波长570nm):获得吸光读数重复实验步骤1至8四次构建标准曲线:纵座标(Y轴)为吸光读数;横座标(X轴)为标准氨基酸浓度(微摩尔/升)样品测定加入xx微升缓冲液(ReagentC)到1.5毫升离心管加入500微升待测样品加入xx微升反应液(ReagentD)涡旋震荡15秒放进90℃干式恒温仪孵育5分钟,避免光照放进冰槽里1分钟转移到比色皿即刻放进分光光度仪检测(波长570nm):获得吸光读数根据标准曲线获得样品对应氨基酸浓度(微摩尔/升)浓度计算根据标准曲线获得样品对应氨基酸浓度(微摩尔/升)X稀释倍数=(微摩尔/升)注意事项本产品为25次操作,包括标准样品避免使用Tris缓冲液、尿素等胺类物质处理样品操作时,须戴手套系统操作时,标准样品测定只需1次反应液(ReagentD)具有挥发性,严格密闭瓶盖,避免光照孵育时,避免光照本公司提供系列氨基酸检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]
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2024-09-30 10:02
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2016-06-01 00:00
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- 粉尘的测定知识点游离二氧化硅(一)红外分光光度法 1.原理α-石英在红外光谱的12.5、12.8和14.4μm处有特征吸收带,在一定条件下,吸光度与旷石英的质量成线性关系,进行定量测定。 2.仪器(1)测尘滤膜。 (2)分析天平,感量0.01mg。(3)红外分光光度计FC-200D。 3.分析步骤 (1)用测尘滤膜采集粉尘样品,称量、灰化后,制成锭片。 (2)在12.5或14.4μm处测定吸光度;然后,与标准曲线比较定量。 4.说明 (1)此法测定的游离二氧化硅为α-石英,检出限为10μg。 (2)吸光度与粉尘粒径有关,粒径>5μm的粉尘应<5%,要求标准粉尘的粒径与样品一致。 (二)焦磷酸质量法 1.原理硅酸盐溶于加热的焦磷酸中被除去,而二氧化硅几乎不溶,以称量法测定。 2.仪器分析天平等。 3.试剂 (1)焦磷酸:将磷酸加热到沸腾,至250℃不冒泡为止。 (2)氢氟酸。(3)0.1mol/L盐酸溶液。 4.操作步骤 (1)将采集的粉尘样品放在(105±3)℃的烘箱内干燥2小时。如果粉尘粒子较大,用玛瑙研钵研磨。 (2)准确称取0.1~0.2g粉尘样品于50ml锥形瓶中。若样品中含有煤、其他碳素及有机物时,先于800~900℃灰化30分钟以上。用焦磷酸洗入锥形瓶中。若含有硫化矿物,应加数毫克结晶于锥形瓶中。 (3)加入15ml焦磷酸,迅速加热到245~250℃,保持15分钟,不断搅拌。放冷至100~150℃:,用冷水冷却至40~50℃。冷却时,加50~80℃的蒸馏水到40~45ml,边加边搅拌均匀。将锥形瓶中内容物小心转移入烧杯中。加蒸馏水至150~200ml,用玻璃棒搅匀。煮沸后,趁热过滤。用0.1mol/L盐酸溶液洗涤烧杯,并将滤纸上的沉渣冲洗3~5次,再用热蒸馏水洗至无酸性反应为止。以上操作应在当天完成。 (4)将有沉渣的滤纸折叠数次,放入恒量的瓷坩埚中,在80℃干燥,低温碳化,800~900℃灰化30分钟;冷却后,称量至恒重。 5.计算 按公式计算粉尘中游离二氧化硅的百分浓度: 式中:m2和m1分别为坩埚加沉渣质量和坩埚质量,g;G为粉尘样品质量,g。 6.说明 (1)当样品中含有焦磷酸难溶的物质时,需用氢氟酸在铂坩埚中处理。 (2)在过滤后,如用铂坩埚,要洗至无磷酸根反应后再洗3次。 (三)x线衍射测定法 1.原理当晶体物质照射X射线时,将产生X衍射;在一定的条件下,衍射线的强度与晶体物质的质量成正比;测量衍射线强度而定量。 2.仪器(1)测尘滤膜。(2)分析天平,感量0.01mg。(3)X线衍射仪。 3.分析步骤 (1)用测尘滤膜采集粉尘样品,按仪器要求制备待测样品。 (2)先进行定性测定,确定是否存在α-石英;然后,与标准曲线比较定量。 4.说明 (1)此法测定的游离二氧化硅为α-石英。 (2)衍射线的强度与粉尘粒径有关,粒径>10μm,强度下降。要求标准粉尘的粒径与样品一致。 (3)滤膜采尘量应控制在2~5mg。[详细]
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2018-09-21 10:01
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- 摘要:霉菌毒素中的棒曲霉素可以由不同种类的真菌如青霉菌或曲霉菌产生,在各种水果中均有可能生成。在苹果中主要是由扩展青霉产生。苹果表面的圆形腐烂斑点即是棒曲霉素造成的损坏。因为即便在低温下霉菌毒素的水平也会增加,因此苹果汁中的棒曲霉素含量与苹果的质量和储存时间有关。以下对棒曲霉素的检没根据德国法宝方法ISO8128-1(1993)进行。样品经过适当处理后,用GX液相色谱紫外检没器法进行测定。纳锘仪器--为您提供纳米级专业细致服务!如欲了解更多该产品信息,可来电咨询。--------------------------------------------------------------------- 上海纳锘仪器有限公司 地址:上海市莲花南路1388弄8号楼碧恒广场1503室[201108] 电话:021-60900829,60900830,61131031,61131051 传真:021-61131052[详细]
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2018-11-13 15:46
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HPLC方法测定苹果汁中棒曲霉素
- HPLC方法测定苹果汁中棒曲霉素[详细]
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2024-09-20 13:34
选购指南
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2024-09-23 23:58
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大豆分离蛋白中氨基酸的检测
- 大豆分离蛋白中氨基酸的检测[详细]
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2024-09-28 15:46
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