一种磁共振造影剂前体B S A一（G dD T P A）n 的制备、表征及体内外评价

一种磁共振造影剂前体B S A一（G dD T P A）n 的制备、表征及体内外评价

本文由上海科学仪器有限公司整理汇编

2018-08-16 10:00 1833阅读次数

扫码分享

文档仅可预览首页内容，请下载后查看全文信息！

收藏评价举报

立即下载

【摘要】目的：改进BSA一（GdDTPA）n制备及纯化方法，探讨其作为磁共振造影剂前体的优势及应用前景。方法：BSA与（乙酸环酐）反应生成BSA一（DTPA）n，并与GdCl3螯合生成BSA一（GdDTPA）n。紫外光谱法鉴定其结构，并定量测定其中DTPA对BSA的偶联率。测定配合物体外弛豫时间T。、Tz，分析其弛豫性能R1、R2。小鼠急性毒性试验评价药物安全性。大鼠磁共振增强扫描评价其活体内代谢及分布情况。结果：本研究制得的BSA一（GdDTPA）n配合物中n=26。体外弛豫性能RI约为7．00×10。Lmmol。1ms～，比小分子GdDTPA的弛豫性能（3．52X10。3Lmmol“ms“）提高近1倍。大鼠磁共振增强扫描显示BSA一（GdDTPA）n和白蛋白一样具有长循环特性。结论：本实验改进方法可制备出磁共振造影剂前体BSA一（GdDTPA）n，该配合物具备长循环特性，且具有多个可供修饰的氨基，町作为一种潜在的磁共振造影剂前体。【关键词】磁共振造影剂前体；合成；表征；BSA一（GdDTPA）n

参与评论

登录后参与评论

全部评论(0条)

登录或新用户注册

微信登录
密码登录
短信登录

请用手机微信扫描下方二维码
快速登录或注册新账号

微信扫码，手机电脑联动

注册登录即表示同意《仪器网服务条款》和《隐私协议》

更多资料

一种磁共振造影剂前体B S A一（G dD T P A）n 的制备、表征及体内外评价

【摘要】目的：改进BSA一（GdDTPA）n制备及纯化方法，探讨其作为磁共振造影剂前体的优势及应用前景。方法：BSA与（乙酸环酐）反应生成BSA一（DTPA）n，并与GdCl3螯合生成BSA一（GdDTPA）n。紫外光谱法鉴定其结构，并定量测定其中DTPA对BSA的偶联率。测定配合物体外弛豫时间T。、Tz，分析其弛豫性能R1、R2。小鼠急性毒性试验评价药物安全性。大鼠磁共振增强扫描评价其活体内代谢及分布情况。结果：本研究制得的BSA一（GdDTPA）n配合物中n=26。体外弛豫性能RI约为7．00×10。Lmmol。1ms～，比小分子GdDTPA的弛豫性能（3．52X10。3Lmmol“ms“）提高近1倍。大鼠磁共振增强扫描显示BSA一（GdDTPA）n和白蛋白一样具有长循环特性。结论：本实验改进方法可制备出磁共振造影剂前体BSA一（GdDTPA）n，该配合物具备长循环特性，且具有多个可供修饰的氨基，町作为一种潜在的磁共振造影剂前体。【关键词】磁共振造影剂前体；合成；表征；BSA一（GdDTPA）n[详细]
2018-08-16 10:00
产品样册
|
一种磁共振造影剂前体BSAGdDTPA_n的制备表征及体内外评

一种磁共振造影剂前体BSAGdDTPA_n的制备表征及体内外评[详细]
2010-07-26 00:00
应用文章
|
喷雾干燥技术制备前体脂质体

脂质体作为一种新的药物载体，能使药物靶向于特定的组织，激活机体自身的免疫功能，从而提高药物的治疗指数、减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性[详细]
2023-05-17 10:43
其它
|
基于碳纳米管的磁共振造影剂的研究

基于碳纳米管的磁共振造影剂的研究[详细]
2008-10-16 00:00
应用文章
|
超细镁铝尖晶石（MgO?Al2O3）粉体制备及表征

超细镁铝尖晶石（MgO?Al2O3）粉体制备及表征[详细]
2024-09-29 03:21
标准
|
白介素-24YZ胶质瘤细胞生长的体内外实验研究

白介素-24YZ胶质瘤细胞生长的体内外实验研究[详细]
2011-12-12 00:00
报价单
|
DPI制剂的粉体表征

DPI制剂的粉体表征[详细]
2024-09-30 07:40
专利
|
使用FT4粉体流变仪评价水泥粉体及其它成分的流动特性

使用FT4粉体流变仪评价水泥粉体及其它成分的流动特性[详细]
2024-09-28 01:15
其它
|
人N端脑钠肽前体elisa试剂盒使用方法

本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T250pg/ml-8000pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中N端脑钠肽前体(NT-proBNP)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人N端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平。用纯化的人N端脑钠肽前体(NT-proBNP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入N端脑钠肽前体(NT-proBNP)，再与HRP标记的N端脑钠肽前体(NT-proBNP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的N端脑钠肽前体(NT-proBNP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人N端脑钠肽前体(NT-proBNP)浓度。[详细]
2018-10-01 10:00
产品样册
|
金属粉体的综合特性表征

金属粉体的综合特性表征[详细]
2024-09-28 01:26
应用文章
|
如何表征医药粉体的流动性

在医药产品中固体药物制剂约占 70％～80%，含有固体药物的剂型有散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、粉针、混悬剂等；涉及的单元操作有粉碎、分级、混合、制粒、干燥、压片、包装、输送、贮存等。而这一系列过程密切[详细]
2025-04-23 10:49
其它
|
大鼠脑钠肽前体N末端片段(NT-proBNP)检测试剂盒

大鼠脑钠肽前体N末端片段(NT-proBNP)检测试剂盒[详细]
2024-09-16 04:00
报价单
|
人血栓前体蛋白说明书

人血栓前体蛋白（TPP）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中血栓前体蛋白（TPP）的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血栓前体蛋白（TPP）水平。用纯化的人血栓前体蛋白（TPP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入血栓前体蛋白（TPP），再与HRP标记的血栓前体蛋白（TPP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的血栓前体蛋白（TPP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人血栓前体蛋白（TPP）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：2250μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为1500μg/L，1000μg/L，500μg/L，250μg/L，125μg/L）。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围：50μg/L-2000μg/L保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月FORRESEARCHUSEONLYHumanthrombusprecursorproteinDrugNamesGenericName：Humanthrombusprecursorprotein（TPP）ELISAKit.PurposeThiskitallowsforthedeterminationofTPPconcentrationsinHumanserum,bloodplasma,andotherbiologicalfluids.PrincipleoftheassayThekitassayHumanTPPlevelinthesample，usePurifiedHumanTPPantibodytocoatmicrotiterplatewells,makesolid-phaseantibody,thenaddTPPtowells,CombinedTPPantibodywhichWithHRPlabeled,becomeantibody-antigen-enzyme-antibodycomplex,afterwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolorAtHRPenzyme-catalyzed,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofTPPinthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.MaterialsprovidedwiththekitMaterialsprovidedwiththekit48determinations96determinationsStorageUsermanual11Closureplatemembrane22Sealedbags11Microelisastripplate112-8℃Standard：2250μg/L0.5ml×1bottle0.5ml×1bottle2-8℃Standarddiluent1.5ml×1bottle1.5ml×1bottle2-8℃HRP-Conjugatereagent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Samplediluent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionA3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionB3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃StopSolution3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃washsolution（20ml×20fold）×1bottle（20ml×30fold）×1bottle2-8℃Specimenrequirements1.serum-coagulationatroomtemperature10-20mins，centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.2.plasma-usesuitedEDTAorcitrateorasananticoagulant,mix10-20mins,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.3.Urine-collectsueasterilecontainer,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.TheOperationofHydrothoraxandcerebrospinalfluidReferencetoit.4.cellculturesupernatant-detectsecretorycomponents,collectsueasterilecontainer,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,detectthecompositionofcells,DilutcellsuspensionwithPBS（PH7.2-7.4）,Cellconcentrationreached1million/ml,repeatedfreeze-thawcycles,damagecellsandreleaseofintracellularcomponents,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.5.Tissuesamples-Aftercuttingsamples,checktheweight,addPBS（PH7.2-7.4）,Rapidlyfrozenwithliquidnitrogen,maintainsamplesat2-8℃aftermelting,addPBS（PH7.4）,HomogenizedbyhandorGrinders,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant.6.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.7.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.Assayprocedure1.DiluteandaddsampletoStandard:set10StandardwellsontheELISAplatescoated,addStandard100μltothefirstandthesecondwell,thenaddStandarddilution50μltothefirstandthesecondwell,mix;takeout100μlformthefirstandthesecondwellthenaddittothethirdandtheforthwellseparately.thenaddStandarddilution50μltothethirdandtheforthwell,mix;thentakeout50μlfromthethirdandtheforthwelldiscard,add50μltothefifthandthesixthwell,thenaddStandarddilution50μltothefifthandthesixthwell,mix;takeout50μlfromthefifthandthesixthwellandaddtotheseventhandtheeighthwell,thenaddStandarddilution50μltotheseventhandtheeighthwell,mix;takeout50μlfromtheseventhandtheeighthwellandaddtotheninthandthetenthwell,addStandarddilution50μltotheninthandthetenthwell,mix,takeout50μlfromtheninthandthetenthwelldiscard（addSample50μltoeachwellafterDiluting,（density:1500μg/L，1000μg/L，500μg/L，250μg/L，125μg/L）2.addsample：Setblankwellsseparately（blankcomparisonwellsdon’taddsampleandHRP-Conjugatereagent,othereachstepoperationissame）.testingsamplewell.addSampledilution40μltotestingsamplewell,thenaddtestingsample10μl（samplefinaldilutionis5-fold）,addsampletowells,don’ttouchthewellwallasfaraspossible,andGentlymix.3.Incubate:AfterclosingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor30minat37℃.4.Configurateliquid:30-fold（or20-fold）washsolutiondiluted30-fold（or20-fold）withdistilledwaterandreserve.5.washing：UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.addenzyme：AddHRP-Conjugatereagent50μltoeachwell,exceptblankwell.7.incubate：Operationwith3.8.washing：Operationwith5.9.color：AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionBtoeachwell,evadethelightpreservationfor15minat37℃10.Stopthereaction：AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction（thebluecolorchangetoyellowcolor）.11.assay：takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin15min.Importantnotes1.Thekittakesoutfromtherefrigerationenvironment首ldbebalanced15-30minutesintheroomtemperature,ELISAplatescoatedifhasnotuseupafteropened,theplate首ldbestoredinSealedbag.2.washingbufferwillCrystallizationseparation,itcanbeheatedthewaterhelpsdissolvewhendilute.Washingdoesnotaffecttheresult.3.addSamplewithsamplerEachstep,Andproofreaditsaccuracyfrequently,avoidstheexperimentalerror.addsamplewithin5min,ifthenumberofsampleismuch,recommendtouseVolley.4.ifthetestingmaterialcontentisexcessivelyhigher（ThesampleODisbiggerthanthefirststandardwell）,pleasediluteSample（n-fold）,Pleasediluenteandmultipliedbythedilutionfactor.（×n×5）.5.Closureplatemembraneonlylimitsthedisposableuse,toavoidcross-contamination.6.Thesubstrateevadethelightpreservation.7.Pleaseaccordingtouseinstructionstrictly,Thetestresultdeterminationmusttakethemicrotiterplatereaderasastandard.8.Allsamples,washingbufferandeachkindofreject首ldaccordingtoinfectivematerialprocess.9.Donotmixreagentswiththosefromotherlots.Takethestandarddensityasthehorizontal,theODvalueforthevertical,drawthestandardcurveongraphpaper,FindoutthecorrespondingdensityaccordingtothesampleODvaluebytheSamplecurve,multipliedbythedilutionmultiple,orcalculatethestraightlineregressionequationofthestandardcurvewiththestandarddensityandtheODvalue,withthesampleODvalueintheequation,calculatethesampledensity,multipliedbythedilutionfactor,theresultisthesampleactualdensity.CalculateThischartforreferenceonlyAssayrange50μg/L-2000μg/LStorageandvalidity1．Storage：2-8℃.2．validity：sixmonths.[详细]
2018-09-02 10:00
产品样册
|
安东帕LS500对外泌体的表征

安东帕LS500对外泌体的表征[详细]
2024-09-28 14:01
应用文章
|
Granu Tools粉体颗粒特性表征

Granu Tools粉体颗粒特性表征[详细]
2025-10-16 16:11
产品样册
|
气相色谱担体Chromosorb P AW 供货通知

气相色谱担体Chromosorb P AW 供货通知[详细]
2011-11-01 00:00
期刊论文
|
安东帕_金属粉体的综合特性表征

安东帕_金属粉体的综合特性表征[详细]
2020-08-03 16:49
应用文章
|
超细粉末团聚体分形结构的小角散射测量及分维表征

超细粉末团聚体分形结构的小角散射测量及分维表征[详细]
2024-10-08 11:16
实验操作
|
不易燃且性质稳定的膦配体前体

不易燃且性质稳定的膦配体前体[详细]
2024-09-18 02:57
专利
|
饮料中及其前体物的检测解决方案

PerkinElmer公司采用QSight LC-MS/MS液质联用系统建立了新型饮料中及其前体物γ-丁内酯（gamma-Butyrolactone， GBL）的检测整体解决方案，该方法快速，准确，可靠，适用于饮料中及相关物质的测定，为实际侦查和鉴定工作提供强有力且可靠的检测手段。[详细]
2024-09-28 01:25
应用文章
|

该会员其他资料: 武器装备使用进口电子元器件管理办法实施细则; TENSOR II 傅立叶变换红外光谱仪产品样册; TLTP高压取能装置; 吖啶红3B荧光熄灭法测定痕量亚硝酸根; 垂柳叶黄酮的微波提取工艺; 常用的数理统计术语介绍; 药物纳米混悬剂谱写纳米释药系统灿烂前景; 海洋监测规范—数据处理与分析质量控制; 化工产品和产品词汇; 户外钢结构广告设施安全检测及评定

一种磁共振造影剂前体B S A一（G dD T P A）n 的制备、表征及体内外评价

联系我们

关注我们