供应鱼褪黑激素（melatonin）ELISA 试剂盒使用说明书

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• 供应鱼褪黑激素（melatonin）ELISA 试剂盒使用说明书

  供应鱼褪黑激素（melatonin）ELISA 试剂盒使用说明书[详细]

  2015-03-25 00:00

  安装说明

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• 褪黑激素ELISA Kit使用说明书

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素ELISAELISAKit使用说明书（德国IBL：RE54021）1、应用范围此试剂盒可用于人血清和血浆中褪黑激素的体外定量检测。2、前言说明松果体因其在光周期现象中的重要作用，已经被人们认为是神经内分泌的传感器。松果体主要分泌的激素是：N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素，褪黑激素一般是由色氨酸合成而来的。血浆褪黑激素的浓度可在夜间达到Z高。褪黑激素特有的波动变化可以反映出一些关于时间变化的信息，如夜晚的长短。褪黑激素的分泌会受到神经系统的调节。交感神经系统在调节褪黑激素分泌方面发挥有重要作用，它主要是通过释放去甲肾上腺素来调节的。据报道，褪黑激素分泌方式和水平的变化与人的一些生理状态一致，如：失眠、时差感、情绪低落、压力大、精神分裂症、丘脑下部性闭经、妊娠、神经想食欲缺乏、某些癌症、免疫系统紊乱和青春期性成熟的影响。大多数循环褪黑激素都可在肝内代谢成6-羟基褪黑激素，之后变成6-硫酸褪黑激素而随尿液排除。尿液中6-羟基褪黑激素硫酸盐的浓度与血液中褪黑激素的总水平有很好的相关性。3、实验原理此ELISA试剂盒利用的是竞争法的原理。生物素和非生物素标记的抗原竞争性结合包被板上有限的抗体结合位点。生物素抗原结合到抗体上的量与样品中抗原的量成反比。系统达到平衡后，洗板除去游离的生物素抗原，结合到抗体上的生物素抗原可以用抗生物素碱性磷酸酶标记物和对硝基苯磷酸底物检测出来。用已知的标准品数据做一条标准曲线，将未知样品的酶活性与标准曲线进行比较就可以定量出未知样品的量。4、储存与稳定性试剂盒必须在2-8℃的环境下运输和储存，避免太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂准备将在相关章节中阐述,如果将包被板密封并储存于2-8℃的环境下时,试剂在有效期内稳定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它样品的提取或储存于2-8℃的环境下。提取柱可重复使用4次。5、样品的采集与储存血清，血浆（EDTA，肝素）按照静脉穿刺的常规注意事项采集样品，血液样品自采集到实验时都必须保证其化学完整性。不要使用明显溶血、黄疸和脂血样品。混浊的样品应当在实验开始前离心以除去所有的颗粒性物质。储存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太阳直射，避免反复冻融。稳定性24小时3个月1年6、试剂盒成分数量标记成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，多克隆）。3×2mlBIOTINLYO褪黑激素生物素，冻干，内含稳定剂。3×2mlANTISERUMLYO褪黑激素硫酸盐抗血清，冻干粉，内含抗血清（兔，多克隆）和稳定剂。1×250ulENZCONJCONC酶联物，80倍浓缩，内含碱性磷酸酶标记的抗生物素抗体（羊）、Tris缓冲液和稳定剂。1×6×2mlCALA-FLYO标准品A-F，冻干粉，内含稳定剂，提取浓度请见试剂瓶标签或QC质控品。1×2×2mlCONTROL1+2LYO质控品1+2，冻干粉，内含稳定剂，浓度/可接受范围请见试剂瓶标签。1×50mlASSAYBUFCONC检测缓冲液，10倍浓缩，内含磷酸缓冲液、吐温和稳定剂。1×9×PNPPSUBSPNPP底物片，密封于铝铂金属袋中，内含对硝基苯硫酸盐。1×27mlPNPPBUFPNPP底物缓冲液，即用，内含二乙醇氨和水。1×15mlPNPPSTOPPNPP终止液，即用，内含1M的NaOH和0.25M的EDTA。2×10EXTRCOL提取柱，即用，C18RP，1m3/100mg。另需提取柱可从IBL定够（编号：KEME761）3×FOIL粘性金属板7、实验所需器材但试剂盒不提供1）移液器，体积：50;500ul2）试管（12×75mm）3）轨道振荡器（400-600rpm）4）旋涡混合器5）带储器的8道移液器6）洗涤瓶，自动或半自动洗板机7）离心机（冷冻离心机更适宜）：200-500×g，也可选用多头抽真空装置（例如：Mallinekrodt-Baker或Waters）。8）甲醇（HPLC级）9）蒸发离心机10）可在405nm处读数的酶标仪（参考波长600-650nm）11）蒸馏水或去离子水12）吸水纸、取样吸头和计时器8、实验前的准备说明注意用于96人份检测色试剂盒成分可分成3次进行。下列所述体积为检测32人份时所需要的量。8.1冻干或浓缩成分的准备稀释/溶解成分稀释剂比例备注储存稳定性15ml检测缓冲液150ml双蒸水1：102-8℃4周标准品和质控品2.0ml双蒸水静置15min，混合时避免气泡≤-20℃直至有效期褪黑激素生物素2.0ml蒸馏水静置15min，混合时避免气泡临时配置,只能使用一次褪黑激素抗血清2.0ml蒸馏水静置15min，混合时避免气泡70ul酶联物5.6ml已稀释的检测缓冲液1:813PNPP底物片8mlPNPP底物缓冲液10ml未稀释甲醇100ml蒸馏水10%（v/v）如果溶液的需要量比较大,应该将试管内的溶液混合.避免反复冻融。8.2样品的稀释如果怀疑样品中的褪黑激素浓度比Z高标准品的高，必须将样品在提取步骤前用检测缓冲液进行进一步的稀释。8.3样品、标准品和质控品的提取（提取柱）按照此步骤进行提取，提取量大约为90-1**%。为了避免柱子堵塞，提取样品前将样品过滤或离心一下。注意每份样品、标准品和质控品都必须提取，提取必须提前进行。干燥的提取物（甲醇蒸发后）可在2-8℃或-20℃下储存24个小时。用甲醇洗提后，提取柱就可以用于下一份样品的提取或是存放到2-8℃的环境下。提取柱可以反复使用4次。如果是重复使用，在再次从A.1开始（柱的调制）。A、标准版本：离心与蒸发离心步骤1.柱的调制1将提取柱放到聚苯乙烯或玻璃试管中（12×75mm）。2在提取柱中加入2×1ml的甲醇（未稀释的），200g离心1min使溶剂通过提取柱，弃取洗出液。3向提取柱中加入2×1ml的蒸馏水，200g离心1min使溶剂通过提取柱，弃取洗出液。4为了避免柱子变干，请立即提取样品。2.样品提取5将提取柱放到相应的标记聚苯乙烯或玻璃试管中（12×75mm）。6向提取柱中加入0.5ml标准品、质控品和样品，200g离心1min使溶剂通过提取柱，弃取洗出液。3、洗涤7向提取柱中加入2×1ml的10%甲醇（蒸馏水稀释），500g离心1min使溶剂通过提取柱，弃取洗出液。4、提取物的洗脱8将提取柱放到新的标记聚苯乙烯或玻璃试管中（12×75mm）9向提取柱中加入1ml未稀释的甲醇，200g离心1min使溶剂通过提取柱。10将提取柱从试管中移出，避免液滴还停留在柱子中。将柱子用于下一份样品的提取或存放于2-8℃的环境下。提取柱可重复使用四次。5.提取物的蒸发和重新配置11用蒸发离心机将甲醇蒸发掉。12用0.15ml的蒸馏水重新稀释配置样品13旋涡混和1分钟，并立即检测样品。B、选择性版本：用多头抽真空装置代替离心机提取步骤仍然按照A1-5进行，柱子不变。用真空和≤5ml/min的流速使溶剂通过柱子。样品和提取物用≤2ml/min的流速。用蒸发离心机或氮气蒸发干燥溶剂。9、实验步骤1将提取好的标准品、质控品和样品分别50ul加入到相应的微孔中。2在每一微孔中加入50ul褪黑激素生物素。3在每一微孔内加入50ul褪黑激素抗血清。4盖板，轻轻震板，2-8℃下温育14-20小时。5移去粘性金属板，弃取孔内反应液，每孔用250ul稀释好的检测缓冲液洗板3次，吸水纸上拍干以除出残余液体。6在每一微孔中加入150ul临时配置好的酶联物。7盖板，室温（18-25℃）轨道振荡器上（500rpm）温育120min。8大约在温育结束10分钟前准备好PNPP底物液。9移去粘性金属板，弃取孔内反应液，每孔用250ul稀释好的检测缓冲液洗板3次，吸水纸上拍干以除出残余液体。10如果有8道移液器，请用8道移液器加底物液和终止液，加底物液和终止液的时间间隔应当相同。使用主动置换型移液器并避免气泡产生。11在每一微孔中加入200ul临时配置好的PNPP底物液。12室温（18-25℃）轨道振荡器上（500rpm）温育20-40min。13在每一微孔中加入50ulPNPP终止液，轻轻震板以使溶液混合均匀。14加终止液后60min内在405nm处读取OD值。（参考波长：600-650nm）10、结果计算在半对数坐标纸上或自动计算的方法，以标准品的OD值（Y轴，线性）对其浓度（X轴，对数）做一条标准曲线。使用三次回归、四参数或双对数曲线方程可以得到更好的标准曲线。在推算标准曲线时，应当充分利用好每一个标准品数值（明显逸出的数值应当被忽略，再使用更加合理的数值代替它）。样品的浓度可以从标准曲线上直接读取。从坐标纸上读取结果时应当把起始的稀释倍数考虑进去。将稀释了的样品结果乘以稀释因子即可得到其相应的结果。样品中抗体浓度高于Z高标准品的样品，应当按实验前准备说明所述的方法进行稀释，并重新检测。转换系数：褪黑激素（pg/ml）×4.30=pmol/l典型标准曲线（例子：不能用来定量）标准品褪黑激素（pg/ml）平均OD值OD/ODmax（%）A0.01.517100B3.01.38391.1C101.21480.1D300.86757.1E1000.43428.6F3000.26017.111、期望值实验结果不能当作确定ZL结果的**因素，疾病的判断还应当与其它临床观察和诊断检测相结合。对明显健康的一组人群进行研究发现，人体内的褪黑激素水平有着明显的生理周期变化，褪黑激素白天的水平很低，而晚上的水平则很高，而且个体之间的差异也很大。此外，褪黑激素的水平也与年龄有关系，其Z高浓度是在婴儿（3岁）样品中发现的。对6个明显健康献血者的褪黑激素生理周期进行研究。褪黑激素大概在白天下午四点Zdi，其平均值是4.6pg/ml；早晨4点达到**，平均值为77.5pg/ml。健康个体之间的褪黑激素Z高值差异很大，建议每个实验室都确定自己实验室的正常值范围。本译文仅供参考，详情请以原文为准。ZGdu家总代理：深圳市科润达生物工程有限公司办公地址：深圳市蛇口太子路18号海景广场11C研发ZX：深圳市蛇口沿山路10号6层电话：0755-26814430,26680196邮政编码：518067免费电话：800-8306296传真：0755-26814431[详细]

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  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素硫酸盐ELISAKit使用说明书（德国IBL：RE54031）1、应用范围此试剂盒可用于人尿液中褪黑激素硫酸盐（又叫6-羟基褪黑激素硫酸盐和6-硫酸褪黑激素）的体外定量检测。2、前言说明松果体因其在光周期现象中的重要作用，已经被人们认为是神经内分泌的传感器。松果体主要分泌的激素是：N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素，褪黑激素一般是由色氨酸合成而来的。血浆褪黑激素的浓度可在夜间达到**。褪黑激素特有的波动变化可以反映出一些关于时间变化的信息，如夜晚的长短。褪黑激素的分泌会受到神经系统的调节。交感神经系统在调节褪黑激素分泌方面发挥有重要作用，它主要是通过释放去甲肾上腺素来调节的。据报道，褪黑激素分泌方式和水平的变化与人的一些生理状态一致，如：失眠、时差感、情绪低落、压力大、精神分裂症、丘脑下部性闭经、妊娠、神经想食欲缺乏、某些癌症、免疫系统紊乱和青春期性成熟的影响。大多数循环褪黑激素都可在肝内代谢成6-羟基褪黑激素，之后变成6-硫酸褪黑激素而随尿液排除。尿液中6-羟基褪黑激素硫酸盐的浓度与血液中褪黑激素的总水平有很好的相关性。3、实验原理此ELISA试剂盒利用的是竞争法的原理。样品中未知量的抗原和一定量的酶标抗原竞争性结合到包被在微孔中的抗体结合位点上。温育后洗板以终止竞争反应。加入底物液后，溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成反比。样品的实验结果可以从标准曲线上直接获取。4、储存与稳定性试剂盒必须在2-8℃的环境下运输和储存，避免太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂准备将在相关章节中阐述。如果将包被板密封并储存于2-8℃的环境下时，试剂在有效期内稳定。5、样品的采集与储存尿液实验必须使用自然产生的尿液，也可使用24小时内产生的尿液。收集病人24小时内产生的尿液，将它加入到含10-15ml6NHCl防腐剂的容器中。为了计算结果，请确定尿液的总体积。实验开始前请先将样品离心。储存2-8℃2-8℃避免太阳直射，避免反复冻融稳定性4天15年6、试剂盒成分数量标记成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，多克隆）。1×5mlANTISERUM褪黑激素硫酸盐抗血清，即用，内含：兔抗血清、Tris缓冲液和0.01%的硫柳汞1×0.2mlENZCONJCONC酶联物，40倍浓缩，内含过氧酶标记的褪黑激素硫酸盐、Tris缓冲液和1%的硫柳汞。1×7×0.1mlCALA-G标准品A-G，0;1.7;5.2;15.6;46.7;140;420ng/mL0;5.2;15.9;47.6;142;427;1281nmol/L。即用，内含褪黑激素硫酸盐、Tris缓冲液和0.01%的硫柳汞。1×2×0.1mlCONTROL1+2质控品1+2，即用，内含0.02%的；硫柳汞。具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签。1×60mlASSAYBUFCONC检测缓冲液，红色，即用，内含Tris缓冲液、BSA和0.01%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗涤液，20倍浓缩，内含磷酸缓冲液、吐温和0.1%的硫柳汞。1×0.9mlTMBSUBSCONCTMB底物液，31倍浓缩，内含TMB、缓冲液和稳定剂。1×27mlTMB缓冲液TMB底物缓冲液，储存时避免太阳直射，即用，内含H2O2、柠檬酸盐缓冲液和稳定剂。1×12mlTMBSTOPTMB终止液，即用，1M的H2SO4。3×FOIL粘性金属板7、实验所需器材但试剂盒不提供1）移液器，体积：10;50;100;1000ul2）试管（12×75mm）3）试管架4）振荡器（500rpm）5）旋涡混合器（500rpm）6）带储器的8道移液器7）洗涤瓶，自动或半自动洗板机8）酶标仪（参考波长：600-650nm）9）蒸馏水或去离子水10）吸水纸、取样吸头和计时器8、实验前的准备说明8.1冻干或浓缩成分的准备稀释/溶解成分稀释剂比例备注储存稳定性15ml洗涤液300ml双蒸水1：2018-25℃将晶体溶解掉2-8℃4周50ul酶联物2ml检测缓冲液1:41临时配置,只能使用一次18-25℃30min300ulTMB底物液9mlTMB底物缓冲液1：31临时配置,只能使用一次18-25℃10min8.2标准品、质控品和病人尿液样品的稀释1将标准品、质控品和病人尿液样品分别10ul加入到聚苯乙烯或聚丙烯或玻璃试管中，避免太阳直射。2在每一试管中加入500ul检测缓冲液，旋涡混合。褪黑激素硫酸盐浓度高于Z高标准品浓度的样品必须用检测缓冲液进行进一步的稀释。9、实验步骤1将已稀释好的标准品、质控品和病人样品分别50ul加入到相应的微孔中。2在每一微孔中加入50ul临时配置好的酶联物。3在每一微孔内加入50ul褪黑激素硫酸盐抗血清。4盖板，室温（18-25℃）包被板振荡器（500rpm）温育2小时。5在温育快要结束的10分钟前，请将TMB底物液准备好。6移去粘性金属板，弃取孔内反应液，每孔用250ul稀释好的洗涤液洗板4次，吸水纸上拍干以除出残余液体。7如果可以的话，请用8道移液器加底物液和终止液。加底物液和终止液的时间间隔应当相同，使用8在每一微孔中加入200ulTMB底物液。9室温（18-25℃）包被板振荡器（500rpm）温育30min。10在每一微孔中加入100ulTMB终止液，轻请振板以混合溶液。11加终止液后60min内在450nm处读取OD值。10、期望值实验结果不能当作确定ZL结果的**因素，疾病的判断还应当与其它临床观察和诊断检测相结合。以下为明显正常人群褪黑激素硫酸盐的正常值：年龄数目褪黑激素硫酸盐24小时尿液（ug）夜间尿液（ug/h）平均值90%的比例平均值90%的比例20-352636.815.6-58.12.80.9-5.636-501729.69.9-52.92.10.6-3.651-651620.412.3-32.81.50.9-2.5＞1615.87.5-32.71.00.3-2.3建议每个实验室读确定自己的正常值范围本译文仅供参考，详情请以原文为准。ZGdu家总代理：深圳市科润达生物工程有限公司办公地址：深圳市蛇口太子路18号海景广场11C研发ZX：深圳市蛇口沿山路10号6层电话：0755-26814430,26680196邮政编码：518067免费电话：800-8306296传真：0755-26814431[详细]

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• 供应鱼促性腺激素释放激素ELISA试剂盒使用说明书

  供应鱼促性腺激素释放激素ELISA试剂盒使用说明书[详细]

  2015-04-15 00:00

  应用文章

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• 鸡褪黑激素 （MT）酶联免疫分析

  www.biokanu.com鸡褪黑激素(MT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定鸡血清，组织及相关液体样本中褪黑激素(MT)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡褪黑激素(MT)水平。用纯化的鸡褪黑激素(MT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入褪黑激素(MT)，再与HRP标记的褪黑激素(MT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的褪黑激素(MT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡褪黑激素(MT)浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：54ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤：1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为36ng/L，24ng/L，12ng/L，6ng/L，3ng/L）。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围：1ng/L-40ng/L保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-09-22 10:00

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• 供应鱼脂肪酸（ FA）elisa试剂盒使用目的

  供应鱼脂肪酸（ FA）elisa试剂盒使用目的[详细]

  2015-03-17 00:00

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• 大鼠褪黑激素英文说明书上海易利为您提供

  本公司为ELISA试剂盒供应商，价格公正，售前，售中，售后全程为您服务。提供免费代测服务，一周内出结果，保证质量欢迎来电咨询![详细]

  2018-10-01 10:00

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• 斑马鱼促性腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒实验使用说明书

  斑马鱼促性腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒实验使用说明书 样本：血清、血浆、组织匀浆等液体样本 标记物：血清、血浆、组织匀浆等 适应物种：详见说明书 应用：可用于科研实验,不用于临床治疗 检测方法：一步法、夹心法、酶联免疫吸附法等 储存条件：2-8℃（频繁使用时），-20℃（长时间不用时）。 有效期：6个月(4℃)；12个月（-20℃）。 检测方法：酶联免疫[详细]

  2024-03-11 14:57

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• 人褪黑素（Melatonin）ELISA试剂盒说明书

  电话：021-6533363955229872网址：http://www.westang.com人褪黑素（Melatonin）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人Melatonin单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的Melatonin与单抗结合，加入生物素化的抗人Melatonin，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，Melatonin浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中Melatonin浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：1000pg/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆、尿液等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。所有标本测定前用标本稀释液作1：10稀释（取20ul，加标本稀释液180ul,稀释10倍）。2.标准品液配制：使用前加入0.5ml蒸馏水混匀，配成2000pg/ml的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入2000pg/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0pg/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Melatonin含量，再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的Melatonin检测浓度小于1.5pg/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人Melatonin。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10.6％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:00

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• 鱼甲状腺素（T4）ELISA试剂盒使用说明书

  南京森贝伽现货供应，质量保证，价格优惠，试剂盒森贝伽。本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定鱼血清，血浆及相关液体样本中鱼甲状腺素(T4)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼甲状腺素(T4)水平。用纯化的鱼甲状腺素(T4)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入甲状腺素(T4)，再与HRP标记的甲状腺素(T4)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲状腺素(T4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鱼甲状腺素(T4)浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：180μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤：标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为120μg/L，80μg/L，40μg/L，20μg/L，10μg/L）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：5μg/L-150μg/L保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-07 14:16

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• 鱼高铁血红蛋白（MHB）ELISA试剂盒使用说明书

  鱼高铁血红蛋白（MHB）ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理鱼高铁血红蛋白（MHB）ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼高铁血红蛋白（MHB）水平。用纯化的鱼高铁血红蛋白（MHB）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入高铁血红蛋白（MHB），再与HRP标记的高铁血红蛋白（MHB）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的高铁血红蛋白（MHB）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鱼高铁血红蛋白（MHB）浓度。鱼高铁血红蛋白（MHB）ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（800pg/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。鱼高铁血红蛋白（MHB）ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。400pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液200pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液100pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液50pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液25pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。鱼高铁血红蛋白（MHB）ELISA试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。鱼高铁血红蛋白（MHB）ELISA试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-23 10:00

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• 鱼活性氧（ROS）ELISA试剂盒使用说明书

  鱼活性氧（ROS）ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼活性氧（ROS）水平。用纯化的鱼活性氧（ROS）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入活性氧（ROS），再与HRP标记的活性氧（ROS）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的活性氧（ROS）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鱼活性氧（ROS）浓度。鱼活性氧（ROS）ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（720IU/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。鱼活性氧（ROS）ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。360IU/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液180IU/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液90IU/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液45IU/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液22.5IU/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。鱼活性氧（ROS）ELISA试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。鱼活性氧（ROS）ELISA试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2024-09-30 18:44

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• 鱼雌激素（E）ELISA试剂盒使用说明书

  鱼雌激素（E）ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T1ng/L-45ng/L使用目的：本试剂盒用于测定鱼血清、血浆及相关液体样本中雌激素（E）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼雌激素（E）水平。用纯化的鱼雌激素（E）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入雌激素（E），再与HRP标记的雌激素（E）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的雌激素（E）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鱼雌激素（E）浓度。标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l，待测样品孔中先加样品稀释液40l，然后再加待测样品10l（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50l，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50l，再加入显色剂B50l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2024-09-30 15:13

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• 猴褪黑素（melatonin）试剂盒说明书

  猴褪黑素（melatonin）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T2ng/L-65ng/L使用目的：本试剂盒用于测定猴血清、血浆及相关液体样本中褪黑素（melatonin）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猴褪黑素（melatonin）水平。用纯化的猴褪黑素（melatonin）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入褪黑素（melatonin），再与HRP标记的褪黑素（melatonin）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的褪黑素（melatonin）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猴褪黑素（melatonin）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（120ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。60ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液30ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液15ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液7.5ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液3.75ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-15 10:03

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• 鱼白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒使用说明书

  鱼白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼白细胞介素2（IL-2）水平。用纯化的鱼白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鱼白细胞介素2（IL-2）浓度。鱼白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（320ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。鱼白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。160ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液80ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液40ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液20ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液10ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。鱼白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。鱼白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2019-01-02 10:00

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• 鱼促性腺激素释放激素(GnRH)说明书

  ELISA试剂盒，种类齐全，质量保证，有问题免费包换，提供免费代测服务及技术指导：021-60521817www.shhyswsj.com[详细]

  2018-11-16 10:02

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• 激素六项之孕酮（PRG）ELISA 试剂盒使用说明书

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4孕酮（PRG）ELISA试剂盒（德国DRG：EIA-1561）1、前言孕酮是一种类固醇激素，含21个碳原子，在C-3上连有酮基，在C-4与在C-5之间为双键连接。该类固醇激素是一种女性性激素，与雌激素共同在月经周期中调节附属的器官，它对于胚细胞着床前的子宫内膜增生状态和维持孕期是特别重要的。在非孕期妇女怀孕的胎盘成为主要来源。极少数来源于两性的肾上腺皮质。孕酮在循环血中主要与皮质类固醇结合蛋白（CBG），性激素结合蛋白（SHBG）和白蛋白结合，仅有循环总浓度的2-10%是游离激素。根据月经循环周期血孕酮浓度范围很宽，在卵泡期可以低于1ng/ml（3.2nmol/L），在黄体期达到10-20ng/ml（32-64nmol/L）。在排卵后4-7天达到Z高水平保持4-6天，在月经开始前24小时降至排卵前的水平，因为孕酮的升高和降低与卵巢卵泡和黄体的活动相对应，因此血浆孕酮的测定在临床上常用来证明排卵和非孕妇女的黄体功能正常。假如排卵没有发生，黄体则没有生成进而孕酮升高的循环也不能见到，异常的孕酮分泌与经前期紧张子宫内膜异位症痛经和黄体不全有关。孕酮浓度不仅个体之间有差异，而且同一个人每天甚至每个小时都会不同，一般的在妇科内分泌紊乱或异常妊娠为了恰当的解释病因连续测定比单个测定更有意义。在孕期孕酮更多的由胎盘产生，血浆水平在这个时期稳定在200ng/ml的水平。2、实验原理DRG公司的孕酮酶免试剂盒是一种基于竞争法原理的固相酶免吸附实验（ELISA）。反应板上的微检测孔包被有能结合孕酮分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性孕酮的病人样本与辣根过氧酶标记的孕酮竞争性的结合包被板上的抗体。温育之后，未结合的酶联物用洗涤液洗去。过氧酶与包被抗体的结合量与样品中孕酮的浓度成反比。加入底物液后，所显示的颜色强度与病人样品中孕酮的浓度成反比。3、试剂盒成分1）预包被反应板，12条X8孔，96孔，微孔中包被了单克隆的抗孕酮抗体。2）标准品系列，7支，1ml，浓度：0；0.3；1.25；2.5；5；15；40ng/ml，转换系数：1ng/ml=3.18nmol/ml，内含0.3%的Proclin防腐剂，3）酶联结物，1支，25ml，辣根过氧酶标记的孕酮，内含0.3%的Proclin防腐剂。4）底物液，1支，25ml，TMB5）终止液，1支，14ml，内含0.5M的H2SO46）浓缩洗涤液（40X），1支，30ml.注：用于样品稀释的零标准品应视需要而定。4、实验需要器材（但试剂盒不提供）1）酶标仪（450±10nm）。2）移液器3）吸水纸4）蒸馏水5、试剂贮存:未开启的试剂在28℃下贮存时，其活性在有效期内稳定，不要使用过期试剂。所有开封了的试剂都必须储存于2-8℃的环境下，微孔反应板也必须贮存于28℃的环境下。一旦包装袋被打开，必须将它小心地严封起来。6、试剂准备实验开始前，将所有的试剂和所需数目的板条都平衡至室温。洗涤液：在30ml的浓缩洗涤液中加入1170ml去离子水进行稀释，稀释好的洗涤液室温下可稳定存放2周。7、样本采集和准备此实验中要使用到血清或血浆（EDTA-，肝素血浆），不要使用溶血、黄疸血或脂血样品。请注意：含叠氮钠的样品不能用于此实验中。7.1样品的采集血清：静脉穿刺采集全血，待其凝血，在室温下用离心机分离血清。未完全凝血前请勿离心，接受了抗凝剂ZL的病人样品可能需要更长的凝血时间。血浆：将全血收集到含抗凝剂的离心试管中，采集后立即离心。7.2样品的储存实验开始前，应当将样品用盖子盖好，2-8℃环境下可稳定存放24个小时。如果实验前想要将样品存放更长的时间，则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样品在实验前应反复倒置几次。7.3样品的稀释在S次实验时，如果血清样品中睾酮的浓度高于Z高标准品中睾酮的浓度，则应将此样品用零标准品稀释10或100倍，并按实验步骤重新检测。在计算浓度时应当将此稀释因子考虑进去。例如：a）按1：10的比例稀释：10μl的血清+90μl零标准品（充分混合）b）按1：100的比例稀释：10μl已稀释好的a）+90μl零标准品（充分混合）8、实验步骤：1）将所需数量的板条固定到板架上。2）将标准品、质控品和已稀释好的样品分别用新的取样吸头取25μL加入到相应的微孔中。3）室温温育5分钟。4）在每一微孔中加入200μL酶联物。5）充分混匀10秒，在这个步骤完全混匀很重要。6）室温孵育60分种。7）快速弃去孔内反应物，每孔用400μL蒸馏水洗板3次，在吸水纸上拍干。注意：洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。8）在每一微孔中加入200μl底物液。9）室温孵育15分种。10）加100μl终止液到每个检测孔中终止酶反应。11）加终止液后10分钟之内，用酶标仪在450±10nm处测定OD值。9、结果计算1）计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2）用吸光度值作为纵坐标（y），浓度值作为横坐标（x），以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值进行标绘，作一标准曲线。3）用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。4）自动计算方法：在IFU上，它用四参数曲线已自动计算出结果。其它的归纳方法可能会得出稍微不同的结果。5）样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中孕酮浓度高于Z高标准品的必须用进行进一步的稀释。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。10、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。在一明显正常人群的研究中，我们使用DRG公司的孕酮ELISA试剂盒进行检测得到如下结果：正常女性：卵泡期0.2-1.4ng/ml黄体期425ng/ml绝经期0.11ng/ml正常男性：0.11ng/ml本译文仅供参考，详情请以原文为准。ZGdu家总代理：深圳市科润达生物工程有限公司公司地址：深圳市蛇口沿山路10号6层电话：0755-26814430,26680196邮政编码：518067免费电话：800-8306296传真：0755-26814431[详细]

  2018-11-14 10:00

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• 激素六项之 泌乳素（PRL） ELISA试剂盒使用说明书

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4泌乳素（PRL）ELISA试剂盒（德国DRG：EIA1291）1、实验原理DRG公司的泌乳素酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶免吸附实验（ELISA）。反应板上的微检测孔包被有能结合泌乳素分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性泌乳素的病人样本在包被孔中与酶联物进行孵育，该酶联物是一种联结有辣根过氧化物酶的抗泌乳素抗血清。孵育后，用洗涤液洗去未结合的酶联物。结合上的辣根过氧化物酶的总量与样本中泌乳素的浓度成正相关。加入底物溶液后，显出的颜色强度与病人样品中泌乳素的浓度成正比。2、试剂盒成分1）微量反应板，1块（96孔），微孔中包被了抗泌乳素的单克隆抗体。2）酶联物，11ml，辣根过氧酶标记的泌乳素抗血清。3）底物液，11ml（TMB）4）标准系列，6支（冻干粉），浓度：0；5；20；50；100；200ng/ml转换系数（1ng/ml=21.1mUI/mL）5）终止液，0.5M的H2SO4，6ml3、实验需要器材（但试剂盒不提供）1）酶标仪（450±10nm）。2）移液器3）吸水纸4）标准水箱5）蒸馏水6）计时器4、试剂贮存:未开启的试剂在28℃下贮存，在有效期内可以保持活性。不要使用过期试剂，酶联物、底物溶液、标准品和零标准品必须在28℃下贮存。微孔反应板必须在28℃下贮存。一旦包装袋被打开，必须将它小心地严封起来。如果包被板的包装被打开，其免疫活性在2个月内稳定，但前提是必须将它密封在装有干燥剂的袋子里。5、样品的采集1）静脉穿刺采集全血，待其凝血，在室温下用离心机分离血清，避免溶血。注意：此试剂盒只能使用没用任何添加剂的样品。2）必须盖住样本并在实验之前于２-８℃下可贮存48小时。样品需要更长的贮存时间，则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样本在检测之前必须上下倒置几次。注意：用于此试剂盒的样品不能含有任何添加剂。6、试剂的准备参考标准：在冻干的标准品中加入1.0ml双蒸水。注：配制好了的标准品可在2-8℃下稳定存放2个月。想要存放更长时间应当将其冻存于-20℃的环境下。7、一般注意事项1）实验开始前，将所有试剂和样本都平衡至室温,试剂混合时避免起泡。2）实验一旦开始,所有的步骤应完整地进行下去。3）每一样品的取样都得使用新的取样吸头。4）吸光度与温育时间和温度有关，在实验开始后所有的试剂都应准备好，以保证加液时间的一致。5）本试剂盒Zda吸光度（OD）在1.200-2.000之间（室温22℃,显色10分钟以内）。如果ZdaOD值高于您酶标仪的上限或低于1.000，则相应的减少或延长显色反应的温育时间。一般情况下，酶免反应的强度与时间和温度成线性，这使得操作者应当适当的调整物理化学环境。8、实验步骤1）将所需数目的板条置于板架上。2）将黄体生成素标准系列（0；5；20；50；100；200ng/ml）、质控和血清样本分别25μl加入到相应的微孔中，每一样品都得使用新的取样吸头。3）加100μl的抗泌乳素酶联物于各孔中。4）混匀10秒,此步骤中完全混匀很重要。5）室温温育（22℃）30分钟。6）弃去孔内的反应液。7）用蒸馏水洗板5次。8）在吸水纸上把板拍干。9）依原先加样顺序,每孔加100μl底物液。10）室温（22℃）温育10分钟。11）按加底物液顺序,每孔加50μl终止液于各孔中。12）10分钟内在450±10nm波长读吸光度。9、结果计算1）计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2）用吸光度值作为纵坐标（y），浓度值作为横坐标（x），以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值（mIU/ml）进行标绘，作一条标准曲线。3）用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。根据自己的实际经验或计算机的功能，也可以采用其它的归纳方法进行计算。4）如果样本的浓度高于Z高浓度的标准品的浓度或者浓度＞200ng/ml，则需要进行稀释，任何稀释了的样品在计算时都必须将相应的稀释因子考虑进去。10、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。以下结果是以一定量正常人群的血液样本为准得出的实验结果：性别平均值（ng/ml）S.D.（ng/ml）5%（ng/ml）95%（ng/ml）男性6.445.500.9420.94女性14.275.882.3925.15灵敏度:Z小检测出的泌乳素浓度为0.35ng/ml本译文仅供参考，详情请以原文为准。ZGdu家总代理：深圳市科润达生物工程有限公司公司地址：深圳市蛇口沿山路10号6层电话：0755-26814430,26680196邮政编码：518067免费电话：800-8306296传真：0755-26814431[详细]

  2018-11-14 10:00

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• 激素六项之睾酮（TES）ELISA试剂盒使用说明书

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4睾酮（TES）ELISA试剂盒（德国DRG：EIA-1559）1、前言DRG公司的睾酮酶免试剂盒可用于人血清和血浆中睾酮的定量检测。此试剂盒仅供体外诊断用。睾酮（17β-羟基-4-雄烯-3-烷）是一种19C的类固醇激素，它在C-4和C-5间含一个不饱和键，C-3位置有一个酮基，C-17的β位上有一个羟基。此类固醇激素的分子量为288.47。睾酮是分泌到血液中Z主要的雄性激素。在男性中，睾酮主要由睾丸的间质细胞分泌；在女性中，处于循环中的睾酮50%来源于外周雄烯二酮的转换，25%来源于卵巢，25%来源于肾上腺。睾酮负责男性第二性征的形成，检测睾酮浓度有助于评价性腺机能减退的状态。在女性中，在很多疾病中睾酮的浓度都很高，如：多毛症，女子男性化，多囊卵巢症，卵巢癌，肾上腺癌和肾上腺增生。而在男性中，高水平的睾酮通常与下丘脑垂体疾病、睾丸癌、先天性肾上腺增生和前列腺癌有关。在患下列疾病的病人体内，通常可发现睾酮水平很低：垂体机能减退症、克氏综合征、睾丸女性化综合征、睾丸切除术、隐睾病、酶缺陷和一些自身免疫疾病。2、实验原理DRG公司的睾酮酶免试剂盒是一种基于竞争法原理的固相酶免吸附实验（ELISA）。反应板上的微检测孔包被有能结合睾酮分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性睾酮的病人样本与辣根过氧酶标记的睾酮竞争性的结合包被板上的抗体。温育之后，未结合的酶联物用洗涤液洗去。过氧酶与包被抗体的结合量与样品中睾酮的浓度成反比。加入底物液后，所显示的颜色强度与病人样品中睾酮的浓度成反比。3、试剂盒成份1）预包被反应板，12×8孔，包被板上包被了单克隆的鼠抗睾酮抗体。2）标准品系列，共7支，1.0ml/支，浓度：0；0.2；0.5；1；2；6；16ng/ml。转换系数：1ng/ml=3.467nmol/l。3）酶联结物，1支，25ml，内含辣根过氧酶标记的睾酮。4）底物/显色剂，1支，25ml，内含TMB。5）终止液，1支，0.5M的H2SO4，14ml，避免接触终止液，以免刺激或着烧皮肤。6）浓缩洗涤液（40X），1支，30ml。注意：用于样品稀释的零标准品因视需要而定。4、实验所需材料（但试剂盒不提供）1）标准移液器2）酶标仪3）吸水纸4）蒸馏水5、试剂盒的储存与稳定性未开启的试剂在28℃下贮存时，其活性在有效期内稳定，不要使用过期试剂。所有开封了的试剂都必须储存于2-8℃的环境下，微孔反应板也必须贮存于28℃的环境下。一旦包装袋被打开，必须将它小心地严封起来。6、试剂准备洗涤液的准备吸取40×浓度的洗涤液30mL用1170mL的蒸馏水混合定容至1200mL，稀释好的洗涤液在室温能保存2周7、样品在此实验中将用到血清或血浆（EDTA-，肝素-或柠檬酸血浆），不要使用溶血、黄疸血或脂血样品。请注意：含有叠氮化钠的样本不能使用7.1样品的采集血清：静脉穿刺采集全血，待其凝血，室温下离心获取血清。血浆：将全血收集到含抗凝剂的离心试管中，采集后立即离心。7.2样品的储存实验开始前，应当将样品用盖子盖好，2-8℃环境下可稳定存放5天。如果实验前想要将样品存放更长的时间，则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样品在实验前应反复倒置几次。7.3样品的稀释在S次实验时，如果血清样品中睾酮的浓度高于Z高标准品中睾酮的浓度，则应将此样品用零标准品稀释10或100倍，并按实验步骤重新检测。在计算浓度时应当将此稀释因子考虑进去。例如：a）按1：10的比例稀释：10μl的血清+90μl零标准品（充分混合）b）按1：100的比例稀释：10μl已稀释好的a）+90μl零标准品（充分混合）8、一般注意事项1）所有试剂和样本在使用之前必须平衡至室温。所有试剂必须摇匀但不能起泡沫。2）一旦检测开始，所有的操作步骤必须进行到底不能中断。3）为了避免交叉放映，每一标准品、质控品和样品的取样都必须使用新的取样吸头。4）吸光度值是由孵育的时间和温度所决定的。在实验开始之前，建议准备好所有的药剂旋开盖子。5）将所需检测的微孔板条固定在板架上等。这些准备工作将确保每次的加液步骤所需时间相同，没有中断。按一般的规律，酶免反应的强度与时间和温度成线性比例。9、实验步骤：1）将所需数量的板条固定到板架上。2）将标准品、质控品和已稀释好的样品分别用新的取样吸头取25μL加入到相应的微孔中。3）在每一微孔中加入200μL酶联物。4）充分混匀10秒，在这个步骤完全混匀很重要。5）室温孵育60分种。6）快速弃取孔内反应物，每孔用400μL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。注意：洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。7）在每一微孔中加入200μl底物液。8）室温孵育15分种。9）加100μl终止液到每个检测孔中终止酶反应。10）加终止液后10分钟之内，用酶标仪在450±10nm处测定OD值。10、结果计算1）计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2）用吸光度值作为纵坐标（y），浓度值作为横坐标（x），以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值进行标绘，作一条标准曲线。3）用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。4）自动计算方法：在IFU上，它用四参数曲线已自动计算出结果。其它的归纳方法可能会得出稍微不同的结果。5）样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中HPL浓度高于Z高标准品的必须用进行进一步的稀释。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。11、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。在一次明显正常人群的研究中，我们使用DRG公司的睾酮ELISA试剂盒进行检测得到如下结果：人群5%95%男性2.0ng/ml6.9ng/ml女性0.26ng/ml1.22ng/ml本译文仅供参考，详情请以原文为准。ZGdu家总代理：深圳市科润达生物工程有限公司公司地址：深圳市蛇口沿山路10号6层电话：0755-26814430,26680196邮政编码：518067免费电话：800-8306296传真：0755-26814431[详细]

  2018-11-14 10:00

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• 激素六项之 雌二醇 （E2） ELISA试剂盒使用说明书

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4雌二醇（E2）ELISA试剂盒（德国DRG：EIA2693）1、前言说明E2是一种含一个酚A环的18C类固醇激素。此类固醇激素的分子量为272.4，它是人体中Z有效的雌激素，主要由女性卵巢的格拉芬卵泡和胎盘产生，少量由肾上腺和男性睾丸产生。E2（雌二醇）被分泌到血液中，在血液中有98%的雌二醇会结合到性激素结合蛋白上，有的还会结合到其它血清蛋白上（如血清白蛋白），只有很少一部分以游离形式存在。雌激素的活性会受到雌二醇受体符合物的影响，此符合物可在靶位并在核酸水平上引发相应的反应。这些靶位包括：卵泡、子宫、乳房、阴道、尿道、下丘脑、垂体和敏感稍低的肝脏与皮肤。在月经周期正常的未怀孕女性体内，雌二醇的分泌遵循着一种循环模式，在排卵前有两个明显的高峰期。高浓度的雌二醇可在垂体水平发挥正反馈作用，它会影响垂体促性腺激素的分泌,如卵泡刺激素和黄体生成素，前者是卵泡成熟所必要的，后者是排卵形成所必要的。排卵后，雌二醇水平迅速下降直到黄体细胞被激活，结果雌二醇水平出现第二次高峰，并在黄体阶段达到一平衡述评。在怀孕期间，母体血清雌二醇的水平会极度的增加，并且会超过排卵前的峰值，而且在整个孕期维持在高水平上。血清雌二醇的检测是评价各种月经功能障碍的一个有效指标，例如女性早熟和晚熟，原发性、续发性闭经和绝经症。据报道，女性化综合征、男子女性型乳房和睾丸癌患者的血清雌二醇水平会升高。在不孕患者体内，血清雌二醇的检测有利于监测药物ZL（如克罗米酚柠檬酸盐、促黄体生成素释放激素或外源性促性腺激素）后排卵的感应情况。在因为体外受精而引起的卵巢过度刺激综合征患者中，每天监测血清雌二醇浓度以便为hCG的管理和卵母细胞的采集提供**时间。2、检测原理:DRG公司的雌二醇酶免试剂盒是一种基于竞争法原理的固相酶免吸附实验（ELISA）。反应板上的微检测孔包被有能结合雌二醇分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性雌二醇的病人样本与辣根过氧酶标记的雌二醇竞争性的结合包被板上的抗体。温育之后，未结合的酶联物用洗涤液洗去。过氧酶与包被抗体的结合量与样品中雌二醇的浓度成反比。加入底物液后，所显示的颜色强度与病人样品中雌二醇的浓度成反比。3、试剂盒成分:1）包被板，12×8（可拆），96孔，微孔中包被了抗雌二醇的兔单克隆抗体。2）标准品：7支1.0ml/支。分别含量为：0；25；100；250；500；1000；2000pg/ml。（1pg/ml=3.67pmol/L）3）酶联结物：1支，25ml，内含辣根过氧化物酶标记的雌二醇。4）底物液：1支，内含，14ml，内含TMB5）终止液：1支，0.5M的H2SO4，14ml，避免接触终止液，以免造成刺激皮肤和着烧皮肤。6）洗涤液（40×），1支，30ml注：用于样品稀释的零标准品视需要而定。4、实验需要器材（但试剂盒不提供）1）酶标仪（450±10nm）。2）微量移液器和吸嘴25μl、100μl、200μl。3）坐标纸。4）去离子水。5、试剂贮存:未开启的试剂在28℃下贮存时，其活性在有效期内稳定，不要使用过期试剂。所有开封了的试剂都必须储存于2-8℃的环境下，微孔反应板也必须贮存于28℃的环境下。一旦包装袋被打开，必须将它小心地严封起来。6、试剂准备实验开始前，将所有的试剂和所需数目的板条都平衡至室温。洗涤液：在30ml的浓缩洗涤液中加入1170ml去离子水进行稀释，稀释好的洗涤液室温下可稳定存放2周。7、样本采集和准备7.1样品的采集血清：静脉穿刺采集全血，待其凝血，室温下离心获取血清。血浆：将全血收集到含抗凝剂的离心试管中，采集后立即离心。7.2样品的储存实验开始前，应当将样品用盖子盖好，2-8℃环境下可稳定存放5天。如果实验前想要将样品存放更长的时间，则应将样品冻存于-20℃的环境下。解冻的样品在实验前应反复倒置几次。7.3样品的稀释在S次实验时，如果血清样品中睾酮的浓度高于Z高标准品中睾酮的浓度，则应将此样品用零标准品稀释10或100倍，并按实验步骤重新检测。在计算浓度时应当将此稀释因子考虑进去。例如：a）按1：10的比例稀释：10μl的血清+90μl零标准品（充分混合）b）按1：100的比例稀释：10μl已稀释好的a）+90μl零标准品（充分混合）8、实验步骤:所有的标准品、样品和质控品都做双份检测以保证所有的检测条件都相同。1）将所需数量的板条固定到板架上。2）将标准品、质控品和已稀释好的样品分别用新的取样吸头取25μL加入到相应的微孔中。3）在每一微孔中加入200μL酶联物。4）充分混匀10秒，在这个步骤完全混匀很重要。5）室温孵育120分种。6）快速弃去孔内反应物，每孔用400μL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。注意：洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和极ng确度。7）在每一微孔中加入100μl底物液。8）室温孵育15分种。9）加50μl终止液到每个检测孔中终止酶反应。10）加终止液后10分钟之内，用酶标仪在450±10nm处测定OD值。9、结果计算:1）计算每个标准品、质控品和病人样本的平均吸光度值。2）用吸光度值作为纵坐标（y），浓度值作为横坐标（x），以每个标准品的吸光度值对其相应的浓度值进行标绘，作一标准曲线。3）用每一样品的平均吸光度值在标准曲线上确定其相应的浓度。4）自动计算方法：在IFU上，它用四参数曲线已自动计算出结果。其它的归纳方法可能会得出稍微不同的结果。5）样品的浓度可直接从标准曲线上读取。样品中HPL浓度高于Z高标准品的必须用进行进一步的稀释。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。10、参考值我们强烈建议各个实验市都建立自己的正常值和异常值。在一明显正常人群的研究中，我们使用DRG公司的雌二醇ELISA试剂盒进行检测得到如下结果：人群5-95%男性10-36pg/ml女性绝经期前绝经期后13-191pg/ml11-65pg/ml本译文仅供参考，详情请以原文为准。ZGdu家总代理：深圳市科润达生物工程有限公司公司地址：深圳市蛇口沿山路10号6层电话：0755-26814430,26680196邮政编码：518067免费电话：800-8306296传真：0755-26814431[详细]

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