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GSH和MDA的问题
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本文由 江莱-试剂,Elisa试剂盒供应商 整理汇编
2024-10-08 05:22 590阅读次数
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GSH和MDA的问题
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GSH和MDA的问题
- GSH和MDA的问题[详细]
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2024-10-08 05:22
标准
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细胞培养常见的问题和解决方法
- 细胞培养常见问题及回答如何选用特殊细胞系培养基?培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始,各种目的无血清培养**AIMV(12005)培养基(SFM)。L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗?它在溶液中不稳定吗?L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后,L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解,但是确切的降解率一直没有Z终定论。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成,而氨对于一些细胞具有毒性。GlutaMAX-I是什么?培养细胞如何利用GlutaMAX-I?这个二肽有多稳定?GlutaMAX-I二肽是一个L-谷氨酰胺的衍生物,其不稳定的alpha-氨基用L-丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽,释放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常稳定,即使在121磅灭菌20分钟,GlutaMAX-I二肽溶液有Z小的降解,如果在相同条件下,L-谷氨酰胺几乎完全降解。什么培养基中可以省去加酚红?酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用,(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用,(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。如何用台盼兰计数活细胞?用无血清培养基把细胞悬液稀释到200~2000个/毫升,在0.1毫升的细胞悬液中加入0.1毫升的0.4%的台盼兰溶液。轻轻混匀,数分钟后,用血球计数板计数细胞。活细胞排斥台盼兰,因而染成蓝色的细胞是死细胞。如何消除组织培养的污染?当重要的培养污染时,研究者可能试图消除或控制污染。首先,确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母,把污染细胞与其它细胞系隔离开,用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台,检查HEPA过滤器。高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性,因而,做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如两性霉素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤。1.在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。2.分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。例如,两性霉素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0mg/ml。3.每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。4.确定抗生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2~3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2~3代。5.在无抗生素的培养基中培养细胞一代。6.重复步骤4。7.在无抗生素的培养基中培养4~6代,确定污染是否以已被消除。培养基中丙酮酸钠的作用是什么?丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是,如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠。目录上说,Hank's平衡盐溶液(HBS)要在空气中使用,不需要CO2培养箱。原因是什么?Hank's平衡盐溶液(HBS)和Earle's平衡盐溶液(EBS)有什么本质的功能差别?HBS和EBS的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Eagles(2.2g/L)中比在Hanks(0.35g/L)中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡,以维持溶液的PH值。Eagles液在空气水平的CO2中,溶液会变碱,Hanks液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织,需要用Eagles液,。如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织,用Hanks液就可以了。二价离子YZ胰蛋白酶活性吗?使用胰蛋白酶时加入EDTA的目的是什么?二价离子的确YZ胰蛋白酶活性。EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子,以便保持YZ胰蛋白酶的活性。建议胰蛋白酶处理细胞前,用EDTA清洗细胞,以消除来自培养基中所有的二价离子。我SYSF900II时,细胞生长良好,但是我的蛋白产物不如使用Graces液和10%胎牛血清时效果好。如果目的蛋白是一个后期蛋白,它将与蛋白酶一起表达,这些蛋白酶将会作用于目的蛋白。在加有血清的培养基中,这些蛋白酶将作用到血清中的蛋白,从而使目的蛋白产品保持完好。在无血清配方中,蛋白酶作用的**底物是你的目的蛋白。为了避免这一问题,加入一些蛋白酶YZ剂或加入少量的血清(少于1%),让血清给蛋白酶提供作用底物。20°C下配制的缓冲液,在较高或较低的温度下PH值会改变吗?对于普通使用的缓冲液,PH值随温度变化而变化。下表列出温度改变10℃时,PH值的变化情况:例如20℃下配制PH7.4Tris缓冲液,40℃时PH值为7.4-(2x0.310)=6.78缓冲系统pKa/20℃[Delta]pKa/10℃Mes6.15-0.110Ada6.60-0.110Pipes6.80-0.08ces6.90-0.200Bes7.15-0.160Mops7.20-0.013Tes7.50-0.200Hepes7.55-0.140Tricine8.15-0.210Tris8.30-0.310Bicine8.35-0.180Glycylglycine8.40-0.280室温下(25)配制的Tris-HCl溶液,在37℃使用时PH值是多少?缓冲液的PH值随温度变化而变化。下表列出了50mMTris-HC溶液在4℃,25℃,37℃时,不同的PH值。4°C25°C37°C8.17.57.28.27.67.38.37.77.48.47.87.58.57.97.68.68.07.78.78.17.88.88.27.98.98.38.09.08.48.19.18.58.29.28.68.39.38.78.49.48.88.5昆虫细胞培养的Z适PH值和渗透压是多少?生长培养基的PH值对细胞的增殖和病毒或重组蛋白的生产均会产生影响。对于大部分鳞翅类昆虫细胞系,在PH值6.0~6.4范围的大部分应用效果良好。培养鳞翅类昆虫细胞系时,培养基的Z适渗透压是345-380mOsm/kg.。为保证可靠和持久的细胞培养方式,减少技术问题,保持PH值和渗透压在以上所列的范围之内。HighFive细胞有任何其它名称吗?HighFive细胞也被称为Trichoplasiani5B1-4和BTI-TN-5B1-4。PFHM-II和HYBRIDOMA-SFM之间有什么差别PFHM-II(Protein-freeHybridomaMedium)是不包含有蛋白质的单克隆抗体生产培养基。如果作为杂交瘤生产培养基使用,PFHM-II可能需要补充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM既是杂交瘤生产培养基,也是单克隆抗体生产培养基。它包含低水平的蛋白质。在HighFive无血清培养基中去污剂的浓度是多少?HighFive无血清培养基中去污剂的浓度:0.025g/LTween-80,1.0g/LPluronicPoly-all。HighFive细胞用多大的密度冻存?3.0x10E6cells/ml。在我的果蝇培养基中发现形成白色沉淀,加热后溶解。它是什么?对我的细胞有害吗?可能是谷氨酰胺沉淀,但是更可能是L-酪氨酸沉淀。培养基中谷氨酰胺的浓度比典型的2mM高6倍。酪氨酸的浓度比在RPMI1640中高25倍,而且比谷氨酰胺更加难以溶解。沉淀也可能是不止一种成分的复合物。它可能是由于贮存在局部温度较低的地方引起。只要沉淀在培养条件下可以溶解,对实验不会有不利的影响。如何从T25瓶中转移sf9细胞?能用胰蛋白酶消化吗?我们QL推荐使用脱落细胞的方法,因为这项技术破坏性Z小,生活力Z高。正如手册上所显示,通过使用巴斯德吸液管,让细胞上培养基流动。作为一种选择你也可以轻轻拍打培养瓶。只有在必要的情况下,才使用胰酶消化细胞。胰酶消化一个T25瓶的sf9细胞:1.去除培养基。2.用2ml1xPBS(足以覆盖细胞表面)洗涤细胞,去除PBS。3.加入2ml1x胰酶EDTA(恰好覆盖细胞表面)。4.37℃孵育5到10分钟。在仪器下检测看到5分钟后它们正在向上移动。5.向细胞中加入2ml细胞培养液,移入锥形管,用2ml培养液洗瓶壁,移入同一锥形管中。(培养基中的FBS终止了胰酶的活性。)6.离心(1100rpm)沉淀细胞。去除培养基。7.用新的培养基重新悬浮细胞。传代。在Sf9,Sf21,和highFive细胞悬浮培养时,肝素的使用量是多少?为了防止悬浮培养细胞聚集的形成,使用肝素浓度为10单位/毫升细胞悬液。在重新冻存sf9细胞前,它可以传多少代?随着传代的次数的增加,它的感染能力会降低吗?通常情况当细胞经过30次传代后,应该返回冻存。无论什么时候计数时,都应该检查细胞活力。如果超过95%的细胞保持有活力和在大约30小时左右加倍,细胞仍然可以使用。如果活力和加倍时间下降,它们的感染力将不在是有效的。Techtips●贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基,可能在放置几天后颜色变紫。这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时,碳酸氢纳导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口,在CO2培养箱孵育培养基10-15分钟,来校正溶液的pH值(确定松开瓶口以保证气体交换)。●如果细胞培养基偶然被冻,您应该熔化培养基并观察是否有沉淀产生。如果没有沉淀产生,培养基可以正常使用,如果出现沉淀,只能丢弃这些培养基。●您要查找培养基成分表吗?您可以在GIBCO目录**章的后面或在我们网站的技术资源部分找到。●当在无血清培养基中添加抗生素时,降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。血清蛋白会结合和灭活一些抗生素。在无血清培养条件下,抗生素不被灭活,可能对于细胞达到毒性水平。●一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。●总之,大部分添加物和试剂Z多可以冻融3次,如果次数更多都会在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀,将会影响它的性能。●在进行传代培养时,我们强烈推荐进行台盼兰活性记数。研究者常常通过一个简单的稀释(1∶4或1∶2)进行传代,不进行活性检测,您可能接种比你认为的低的多的浓度的细胞,这常常可能导致生长缓慢或培养物根本不生长。●在溶解的一周内使用贮存在4℃冰箱中的液体胰蛋白酶溶液。胰蛋白酶在4℃就可能开始降解,如果在室温下放置超过30分钟,就会变得不稳定。●GIBCO产品的贮存期立足于实时稳定性研究结果。产品说明在超过指定的贮存期的一段时间内,产品仍然在可接受的范围内,但是由于在超过指定的效期后,产品的性能和稳定性没有检测,我们不推荐使用过了效期的产品。[详细]
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2018-09-02 10:00
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实验室仪器设备的特点和存在的问题
- 随着国家对产品质量要求的不断提高,检测技术也飞速发展,先进的仪器设备不断涌现,老设备不断升级、换代;同时,现代试验技术正在向着多学科交叉渗透、多学科智能密集型方向发展。许多大型精密仪器设备是化学、机械、电子、光学、生物、计算机等多学科智能的集中体现,如气质联用仪、原子吸收光谱仪等[详细]
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2021-06-28 15:34
标准
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关于色谱仪的选型和配套问题
- 关于色谱仪的选型和配套问题[详细]
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2012-06-18 00:00
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茶叶残留农药的现状和对策问题
- 茶叶残留农药的现状和对策问题[详细]
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2014-11-05 00:00
操作手册
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氮气发生器常出现的问题和解决方法
- 氮气发生器常出现的故障和解决方法氮气发生器是一套能提取氮气的设备,它主要应用领域为:航空航天、核电核能、食品医药、石油化工、电子工业、材料工业科学实验等领域。它利用恒定电位电解法,采用微孔膜(例如石棉膜)作为两电极的分隔板,多孔气体扩散型氧电极为阴极,镍网为阳极,且电极安装是采用硬支撑结构。1,氮气发生器运行中有响声解决措施:用14的扳手对电磁阀上螺母适当调整松紧度,不要太紧;若不行需拆开电磁阀对内部进行清洗(响主要是因电磁阀内脏有杂质),若清洗完还不行,须更换新的。2.开机不工作显示板无显示解决措施:检查电源是否有电;检查保险是否烧掉,保险位于仪器后面电线插座内(有保险图案),用小“一”字改锥或尖的金属工具向外撬即可取出,保险为;看仪器内电路板指示灯是否亮,若不亮,检查电路板上保险是否烧掉,若烧掉须换保险3A,换后仍不显示,须换电源等。3.氮气发生器开机即有气体输出解决措施:当刚开机压力上升时须按一下前面的红色延时开关,然后输出压力从输出放掉等待10分钟后方可使用上海么能分析仪器有限公司专业生产氢气发生器、氮气发生器、空气发生器、氢空一体机、氮氢空一体机[详细]
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2018-08-19 10:00
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水三相点的应用和注意问题
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2024-09-14 19:11
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细胞培养板的密闭和污染问题
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2024-09-24 21:45
期刊论文
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大鼠丙二醛(MDA)说明书
- www.biokanu.com大鼠丙二醛(MDA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中丙二醛(MDA)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠丙二醛(MDA)水平。用纯化的大鼠丙二醛(MDA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入丙二醛(MDA),再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的丙二醛(MDA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠丙二醛(MDA)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:5.4nmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为3.6nmol/L,2.4nmol/L,1.2nmol/L,0.6nmol/L,0.3nmol/L)。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:0.2nmol/L-4nmol/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
产品样册
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微量丙二醛(MDA)测试
- 过氧化脂质降解产物中的丙二醛(MDA)可与硫代吧比妥酸(TBA)缩合,形成红色产物,在532nm处有蕞大吸收峰。因底物为硫代吧比妥酸(ThibabituricAcidTBA)所以此法称TBA法。[详细]
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2025-01-03 09:22
应用文章
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人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒
- 人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
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人谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒
- 人谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒[详细]
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2015-03-17 00:00
产品样册
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大鼠谷胱甘肽 (GSH)ELISA试剂盒
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠GSH单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的GSH与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠GSH,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,GSH浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中GSH浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):1.2nmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆作1:100稀释(取10ul,加标本稀释液990ul,稀释100倍),尿液2倍稀释(取100ul,加标本稀释液100ul,稀释2倍)后检测。细胞培养上清可以不做稀释直接检测。2.标准品液配制:使用前加入0.3ml蒸馏水混匀,配成4000pmol/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液200ul。在**管中加入4000pmol/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出200ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pmol/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSH含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的GSH检测浓度小于15pmol/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠GSH。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10.2%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
产品样册
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大鼠谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒
- 大鼠谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒[详细]
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2024-09-18 18:09
报价单
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气体报警器的应用中的问题和解决方法
- 气体报警器就是气体泄露检测报警仪器。当工业环境中可燃或有毒气体泄露时,当气体报警器检测到气体浓度达到爆炸或中毒报警器设置的临界点时,报警器就会发出报警信号,以提醒工作采取安全措施,并驱动排风、切断、喷淋系统,防止发生爆炸、火灾、中毒事故,从而保障安全生产。[详细]
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2024-09-28 01:18
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小鼠丙二醛(MDA)ELISA试剂盒
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操作手册
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大鼠丙二醛(MDA)ELISA试剂盒
- 大鼠丙二醛(MDA)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和、唾液生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠MDA/CCL5单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的MDA与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠MDA,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,MDA浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中MDA浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):1000nmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(肝素抗凝)、细胞培养上清液、尿液、唾液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆标本测定前用标本稀释液作1:20稀释(取10ul,加标本稀释液190ul,稀释20倍)。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成2000nmol/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入2000nmol/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0nmol/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应MDA含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的MDA检测浓度小于1.5nmol/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠MDA。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
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