细胞培养板的密闭和污染问题

本文由 东莞市谱标实验器材科技有限公司 整理汇编

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• 细胞培养板的密闭和污染问题

  细胞培养板的密闭和污染问题[详细]

  2024-09-24 21:45

  期刊论文

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• 远慕阐述细胞培养板的选择

  远慕阐述细胞培养板的选择[详细]

  2024-09-24 19:37

  安装说明

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• 如何解决细胞培养中的污染问题

  如何解决细胞培养中的污染问题[详细]

  2013-10-31 00:00

  课件

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• 微波密闭消解的特点和优势

  微波密闭消解的特点和优势[详细]

  2015-01-14 00:00

  产品样册

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• GSH和MDA的问题

  GSH和MDA的问题[详细]

  2024-10-08 05:22

  标准

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• 细胞培养常见的问题和解决方法

  细胞培养常见问题及回答如何选用特殊细胞系培养基？培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始，各种目的无血清培养**AIMV（12005）培养基（SFM）。L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗？它在溶液中不稳定吗？L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后，L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解，但是确切的降解率一直没有Z终定论。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一些细胞具有毒性。GlutaMAX-I是什么？培养细胞如何利用GlutaMAX-I？这个二肽有多稳定？GlutaMAX-I二肽是一个L-谷氨酰胺的衍生物，其不稳定的alpha-氨基用L-丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽，释放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常稳定，即使在121磅灭菌20分钟，GlutaMAX-I二肽溶液有Z小的降解，如果在相同条件下，L-谷氨酰胺几乎完全降解。什么培养基中可以省去加酚红？酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，（特别是雌激素）。为避免固醇类反应，培养细胞，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加有酚红的培养基。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，（特别是雌激素）。为避免固醇类反应，培养细胞，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加有酚红的培养基。如何用台盼兰计数活细胞？用无血清培养基把细胞悬液稀释到200～2000个/毫升，在0.1毫升的细胞悬液中加入0.1毫升的0.4％的台盼兰溶液。轻轻混匀，数分钟后，用血球计数板计数细胞。活细胞排斥台盼兰，因而染成蓝色的细胞是死细胞。如何消除组织培养的污染？当重要的培养污染时，研究者可能试图消除或控制污染。首先，确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母，把污染细胞与其它细胞系隔离开，用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台，检查HEPA过滤器。高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性，因而，做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如两性霉素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤。1.在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞，稀释到常规细胞传代的浓度。2.分散细胞悬液到多孔培养板中，或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内，把选择抗生素加入到每一个孔中。例如，两性霉素B推荐下列浓度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0,8.0mg/ml。3.每天观测细胞毒性指标，如脱落，出现空泡，汇合度下降和变圆。4.确定抗生素毒性水平后，使用低于毒性浓度2～3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2～3代。5.在无抗生素的培养基中培养细胞一代。6.重复步骤4。7.在无抗生素的培养基中培养4～6代，确定污染是否以已被消除。培养基中丙酮酸钠的作用是什么？丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是，如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。目录上说，Hank's平衡盐溶液（HBS）要在空气中使用，不需要CO2培养箱。原因是什么？Hank's平衡盐溶液（HBS）和Earle's平衡盐溶液（EBS）有什么本质的功能差别？HBS和EBS的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Eagles（2.2g/L）中比在Hanks（0.35g/L）中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡，以维持溶液的PH值。Eagles液在空气水平的CO2中，溶液会变碱，Hanks液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织，需要用Eagles液，。如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织，用Hanks液就可以了。二价离子YZ胰蛋白酶活性吗？使用胰蛋白酶时加入EDTA的目的是什么？二价离子的确YZ胰蛋白酶活性。EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子，以便保持YZ胰蛋白酶的活性。建议胰蛋白酶处理细胞前，用EDTA清洗细胞，以消除来自培养基中所有的二价离子。我SYSF900II时，细胞生长良好，但是我的蛋白产物不如使用Graces液和10%胎牛血清时效果好。如果目的蛋白是一个后期蛋白，它将与蛋白酶一起表达，这些蛋白酶将会作用于目的蛋白。在加有血清的培养基中，这些蛋白酶将作用到血清中的蛋白，从而使目的蛋白产品保持完好。在无血清配方中，蛋白酶作用的**底物是你的目的蛋白。为了避免这一问题，加入一些蛋白酶YZ剂或加入少量的血清（少于1％），让血清给蛋白酶提供作用底物。20°C下配制的缓冲液，在较高或较低的温度下PH值会改变吗？对于普通使用的缓冲液，PH值随温度变化而变化。下表列出温度改变10℃时，PH值的变化情况：例如20℃下配制PH7.4Tris缓冲液,40℃时PH值为7.4-（2x0.310）＝6.78缓冲系统pKa/20℃[Delta]pKa/10℃Mes6.15-0.110Ada6.60-0.110Pipes6.80-0.08ces6.90-0.200Bes7.15-0.160Mops7.20-0.013Tes7.50-0.200Hepes7.55-0.140Tricine8.15-0.210Tris8.30-0.310Bicine8.35-0.180Glycylglycine8.40-0.280室温下（25）配制的Tris-HCl溶液，在37℃使用时PH值是多少？缓冲液的PH值随温度变化而变化。下表列出了50mMTris-HC溶液在4℃，25℃，37℃时，不同的PH值。4°C25°C37°C8.17.57.28.27.67.38.37.77.48.47.87.58.57.97.68.68.07.78.78.17.88.88.27.98.98.38.09.08.48.19.18.58.29.28.68.39.38.78.49.48.88.5昆虫细胞培养的Z适PH值和渗透压是多少？生长培养基的PH值对细胞的增殖和病毒或重组蛋白的生产均会产生影响。对于大部分鳞翅类昆虫细胞系，在PH值6.0～6.4范围的大部分应用效果良好。培养鳞翅类昆虫细胞系时，培养基的Z适渗透压是345-380mOsm/kg.。为保证可靠和持久的细胞培养方式，减少技术问题，保持PH值和渗透压在以上所列的范围之内。HighFive细胞有任何其它名称吗？HighFive细胞也被称为Trichoplasiani5B1-4和BTI-TN-5B1-4。PFHM-II和HYBRIDOMA-SFM之间有什么差别PFHM-II（Protein-freeHybridomaMedium）是不包含有蛋白质的单克隆抗体生产培养基。如果作为杂交瘤生产培养基使用，PFHM-II可能需要补充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM既是杂交瘤生产培养基，也是单克隆抗体生产培养基。它包含低水平的蛋白质。在HighFive无血清培养基中去污剂的浓度是多少？HighFive无血清培养基中去污剂的浓度：0.025g/LTween-80，1.0g/LPluronicPoly-all。HighFive细胞用多大的密度冻存？3.0x10E6cells/ml。在我的果蝇培养基中发现形成白色沉淀，加热后溶解。它是什么？对我的细胞有害吗？可能是谷氨酰胺沉淀，但是更可能是L-酪氨酸沉淀。培养基中谷氨酰胺的浓度比典型的2mM高6倍。酪氨酸的浓度比在RPMI1640中高25倍，而且比谷氨酰胺更加难以溶解。沉淀也可能是不止一种成分的复合物。它可能是由于贮存在局部温度较低的地方引起。只要沉淀在培养条件下可以溶解，对实验不会有不利的影响。如何从T25瓶中转移sf9细胞？能用胰蛋白酶消化吗？我们QL推荐使用脱落细胞的方法，因为这项技术破坏性Z小，生活力Z高。正如手册上所显示，通过使用巴斯德吸液管，让细胞上培养基流动。作为一种选择你也可以轻轻拍打培养瓶。只有在必要的情况下，才使用胰酶消化细胞。胰酶消化一个T25瓶的sf9细胞：1.去除培养基。2.用2ml1xPBS（足以覆盖细胞表面）洗涤细胞，去除PBS。3.加入2ml1x胰酶EDTA（恰好覆盖细胞表面）。4.37℃孵育5到10分钟。在仪器下检测看到5分钟后它们正在向上移动。5.向细胞中加入2ml细胞培养液，移入锥形管，用2ml培养液洗瓶壁，移入同一锥形管中。（培养基中的FBS终止了胰酶的活性。）6.离心（1100rpm）沉淀细胞。去除培养基。7.用新的培养基重新悬浮细胞。传代。在Sf9,Sf21,和highFive细胞悬浮培养时，肝素的使用量是多少？为了防止悬浮培养细胞聚集的形成，使用肝素浓度为10单位/毫升细胞悬液。在重新冻存sf9细胞前，它可以传多少代？随着传代的次数的增加，它的感染能力会降低吗？通常情况当细胞经过30次传代后，应该返回冻存。无论什么时候计数时，都应该检查细胞活力。如果超过95％的细胞保持有活力和在大约30小时左右加倍，细胞仍然可以使用。如果活力和加倍时间下降，它们的感染力将不在是有效的。Techtips●贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基，可能在放置几天后颜色变紫。这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时，碳酸氢纳导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口，在CO2培养箱孵育培养基10-15分钟，来校正溶液的pH值（确定松开瓶口以保证气体交换）。●如果细胞培养基偶然被冻，您应该熔化培养基并观察是否有沉淀产生。如果没有沉淀产生，培养基可以正常使用，如果出现沉淀，只能丢弃这些培养基。●您要查找培养基成分表吗？您可以在GIBCO目录**章的后面或在我们网站的技术资源部分找到。●当在无血清培养基中添加抗生素时，降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。血清蛋白会结合和灭活一些抗生素。在无血清培养条件下，抗生素不被灭活，可能对于细胞达到毒性水平。●一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。●总之，大部分添加物和试剂Z多可以冻融3次，如果次数更多都会在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀，将会影响它的性能。●在进行传代培养时，我们强烈推荐进行台盼兰活性记数。研究者常常通过一个简单的稀释（1∶4或1∶2）进行传代，不进行活性检测，您可能接种比你认为的低的多的浓度的细胞，这常常可能导致生长缓慢或培养物根本不生长。●在溶解的一周内使用贮存在4℃冰箱中的液体胰蛋白酶溶液。胰蛋白酶在4℃就可能开始降解，如果在室温下放置超过30分钟，就会变得不稳定。●GIBCO产品的贮存期立足于实时稳定性研究结果。产品说明在超过指定的贮存期的一段时间内，产品仍然在可接受的范围内，但是由于在超过指定的效期后，产品的性能和稳定性没有检测，我们不推荐使用过了效期的产品。[详细]

  2018-09-02 10:00

  产品样册

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• 细胞培养 4孔细胞培养板 韩国SPL 30004 现货刚到可散卖零售

  上海桥星生物客服电话：021-65672052手机：18221794820客服QQ：1468746680上海桥星生物提供优质的分子生物学试剂和试剂盒、美国联合碳化和美国光谱医学透析袋、培养基和培养耗材、细胞染色液和细胞分离液、抗体和Elisa试剂盒及常用生物试剂等，Sigma、Amresco等各大量现货火爆促销中，欢迎登录www.bridge-star.com或拨打021-65672052、182217948204wellCellCulturePlate4孔细胞培养板SPL提供各种规格的细胞培养板从4孔板到96孔板，所有产品都经过细胞培养测试，采用高品质光学级高透明的聚苯乙烯制造。Gamma射线灭菌，无菌，无热源。独立包装，确保不被污染。根据实验需要每种培养板可以选择贴壁培养和悬浮培养。适合各种动物细胞培养高透明度表面平坦均一，确保显微镜观察未经表面处理可用于悬浮细胞培养Gamma射线照射灭菌，无菌，无热源货号外尺寸(mm)孔径(mm)生长面积(?工作容量(ml)表面处理无菌包装（包/箱）3000466.0x66.015.821++4/1203200466.0x66.015.821-+4/120PP聚丙烯、PS聚苯乙烯、PE聚乙烯、PC聚碳酸酯、PET聚酯、HDPE高密度聚乙烯韩国SPL：http://www.spllifesciences.com/En/韩国SPL电子目录：http://www.spllifesciences.com/Catalog/cata.html[详细]

  2019-01-01 10:01

  产品样册

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• 细胞支原体污染一般情况及预防措施

  细胞支原体污染一般情况及预防措施[详细]

  2016-09-26 00:00

  专利

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• 密闭微波化学仪器技术级别和分类

  密闭微波化学仪器技术级别和分类[详细]

  2008-05-15 00:00

  实验操作

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• 密闭跑台

  密闭跑台[详细]

  2014-10-22 00:00

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• 细胞系和细胞的培养

  细胞系和细胞的培养正常的人类初级黑色素细胞的FOM103，进行培养MCDB153，2％FBS，螯合10％FBS（Hyclone公司），1×100nmol/L的ET3（VWR），10毫微克/毫升SCF（R＆D系统），20pmol/L的霍乱毒素，4.5纳克/毫升碱性成纤维细胞生长因子（Promega公司），和2mmol/L的升-谷氨酰胺（敏达）如前所述。人成纤维细胞FF2441和黑色素瘤细胞系UACC903，并辅以含10％FBS。绿色荧光蛋白（GFP）标签UACC903细胞中产生了化学实验室。WM35和Sbcl2，径向生长阶段黑色素细胞病变的细胞系中表达绿色荧光蛋白，维持在涂层％的中型企业。通道2至5人包皮角质细胞进行培养在EpiLifeE-介质中（不含血清的HEPES为基础的介质）含1×HKGS，牛垂体提取物，牛胰岛素，牛转，和人EGF（级联生物制剂）作为详细的前面组成的。所有在本文中使用的细胞系被定期监视表型（显微镜下检查细胞的形态），通过比较的生长特性（SRB法的细胞系的倍增时间）和致瘤性的电位，由这些细胞注射到裸鼠测试，这些细胞的肿瘤形成能力。细胞特性或行为的评估机构提供的细胞株的原始股票。[详细]

  2018-10-03 10:00

  产品样册

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• 实验室仪器设备的特点和存在的问题

  随着国家对产品质量要求的不断提高，检测技术也飞速发展，先进的仪器设备不断涌现，老设备不断升级、换代；同时，现代试验技术正在向着多学科交叉渗透、多学科智能密集型方向发展。许多大型精密仪器设备是化学、机械、电子、光学、生物、计算机等多学科智能的集中体现，如气质联用仪、原子吸收光谱仪等[详细]

  2021-06-28 15:34

  标准

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• 关于色谱仪的选型和配套问题

  关于色谱仪的选型和配套问题[详细]

  2012-06-18 00:00

  期刊论文

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• 茶叶残留农药的现状和对策问题

  茶叶残留农药的现状和对策问题[详细]

  2014-11-05 00:00

  操作手册

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• 氮气发生器常出现的问题和解决方法

  氮气发生器常出现的故障和解决方法氮气发生器是一套能提取氮气的设备，它主要应用领域为：航空航天、核电核能、食品医药、石油化工、电子工业、材料工业科学实验等领域。它利用恒定电位电解法，采用微孔膜(例如石棉膜)作为两电极的分隔板，多孔气体扩散型氧电极为阴极，镍网为阳极，且电极安装是采用硬支撑结构。1，氮气发生器运行中有响声解决措施：用14的扳手对电磁阀上螺母适当调整松紧度，不要太紧；若不行需拆开电磁阀对内部进行清洗（响主要是因电磁阀内脏有杂质），若清洗完还不行，须更换新的。2.开机不工作显示板无显示解决措施：检查电源是否有电；检查保险是否烧掉，保险位于仪器后面电线插座内（有保险图案），用小“一”字改锥或尖的金属工具向外撬即可取出，保险为；看仪器内电路板指示灯是否亮，若不亮，检查电路板上保险是否烧掉，若烧掉须换保险3A，换后仍不显示，须换电源等。3.氮气发生器开机即有气体输出解决措施：当刚开机压力上升时须按一下前面的红色延时开关，然后输出压力从输出放掉等待10分钟后方可使用上海么能分析仪器有限公司专业生产氢气发生器、氮气发生器、空气发生器、氢空一体机、氮氢空一体机[详细]

  2018-08-19 10:00

  产品样册

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• 水三相点的应用和注意问题

  水三相点的应用和注意问题[详细]

  2024-09-14 19:11

  产品样册

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• 细胞成团和细胞出芽实验

  细胞成团和细胞出芽实验[详细]

  2016-05-12 00:00

  期刊论文

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• 气体报警器的应用中的问题和解决方法

  气体报警器就是气体泄露检测报警仪器。当工业环境中可燃或有毒气体泄露时，当气体报警器检测到气体浓度达到爆炸或中毒报警器设置的临界点时，报警器就会发出报警信号，以提醒工作采取安全措施，并驱动排风、切断、喷淋系统，防止发生爆炸、火灾、中毒事故，从而保障安全生产。[详细]

  2024-09-28 01:18

  产品样册

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• 气动式快速密闭喷涂机 快速密闭喷涂机 喷涂机 型号：LTS1-QKP-1

  气动式快速密闭喷涂机快速密闭喷涂机喷涂机型号：LTS1-QKP-1喷涂流量大，快速堵漏火区不需用电，可反复灌装推车式、移动方便快捷配备可拆装料桶，换料方便国内**获矿用安全生产检测合格的密闭设备用途：高压气体作为动力通过硅酸盐两种料混合产生固化物，喷涂于密闭墙周围，用于堵漏封闭火区密闭墙，也可用于封堵瓦斯探放钻孔，无需用电，可反复使用。也可用于救护时的火区密闭。适用：矿井灭火、堵漏适用部门：救护队、通风工区、通灭队简介矿井火灾是威胁矿山的重大隐患,目前除了打密闭墙外使可燃物质与氧气隔绝外,尚无更有效方法.因此,对与煤自燃发火空间的快速密闭就显得尤为重要.我公司研制成功了气动快速密闭喷涂机，它以硅酸盐为材料，采用液压上料机构，进行快速密闭,将硅酸盐喷涂在密闭风门上,几分钟后，液态变为固态。该设备主要用于矿山井下抢险救灾中封闭火区，营建快速临时密闭，也可修复密闭、岩壁、顶板和裂隙。其采用手动喷涂方法，不受环境条件限制，可连续喷涂。可快速移动,体积小、重量轻、携带方便、维修简单。产品机理以6.8升高压气瓶做动力，喷涂硅酸盐流体，工作介质为化学浆料，进行快速密闭,将硅酸盐喷涂在密闭风门上,3-10分钟后，即由液态变为固态，并在附着物表面形成坚固固体技术参数*喷涂流量：10L/min喷涂速度：6m2/min*硅酸盐发泡倍数：10-15倍*气瓶压力：25MPa*工作压力：0.8Mpa*压缩比：6：1结构：带移动胶轮，方便移动；框架开放式结构固态物阻燃性抗静电：符合MT113-1995，离火3秒自熄料管长度：5米重量：不超过15kg*取得国家安全生产检测合格证书*部分为关键性技术指标配置：1.移动式车体2.6.8升碳纤维高压气瓶1个3.8升药剂罐体2罐4.红色气管2根、液料管2根5.高压喷枪1把备注：仅接受制造商投标使用场所：安全场所[详细]

  2018-09-24 10:01

  产品样册

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• 气相色谱气体纯度选择原则和遇到的问题

  气相色谱气体纯度选择原则和遇到的问题[详细]

  2012-04-23 00:00

  实验操作

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