大鼠ELISA试剂盒免疫球蛋白M（mIgM）的使用方法

本文由 研域（上海）化学试剂有限公司 整理汇编

2018-09-19 10:00 465阅读次数

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• 大鼠ELISA试剂盒免疫球蛋白M（mIgM）的使用方法

  大鼠ELISA试剂盒人表面膜免疫球蛋白M（mIgM）ELISA试剂盒、英文名称：IL-2RELISAKit，规格：96T/48T，英文缩写：IL-2R，产品别名人白介素2受体（IL-2R）酶联免疫试剂盒，人白介素2受体（IL-2R）酶联免疫分析试剂盒，人白介素2受体（IL-2R）ELISA检测试剂盒公司ELISA试剂盒销售多达五万种，品牌提供，我们提供的ELISA试剂盒均能免费代测，我们ELISA试剂盒有高灵敏度、强特异性、高重复性，很多客户都指定用我们的ELISA试剂盒做ZD科研实验。孵育时间3h样品血清、血浆、细胞培养上清液等样品形式所需样本体积50-100UL检测波长人表面膜免疫球蛋白M（mIgM）ELISA试剂盒450nm精密度批内精密度（内检测精度）：CV％<8％三个已知浓度的样品在一个平板上测试了20次评估间精密度（精密检测间）：CV％<10％已知的三个样本20检测浓度进行了测试评估用途仅用于科研，不用于诊断磺柳酸钠SodiumsulfosalicylateY83460CP100毫克5-溴水杨酸5-BromosalicylicacidY83461CP500毫克柳酸甲酯MethylsalicylateY83462BR，99%1克2-羟基苯甲酸苯酯PhenylsalicylateY83463BR，98%100毫克对甲苯磺酸PTSAY83464超纯，99%500毫克大鼠ELISA试剂盒对甲苯磺酸钠p-ToluenesulfonicacidsodiumY8346R，95%1克2-氨基-5-羟基萘-7-磺酸I-AcidY83466消毒用，1%100毫克苯磺酸BenzenesulfonicacidY83467BR，97%500毫克阿姆斯特朗酸1,5-NaphthalenedisulfonicacidY83468高纯，98%1克1,5-萘二磺酸二钠盐Sodium1,5-naphthalenedisulfonatedibasicY83469BR，99%0.25毫升托拜厄斯酸2-Naphthylamine-1-sulfonicacidY83470BR，98%100毫克甲磺酸MSAY83471BR，99%10克[详细]

  2018-09-19 10:00

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• 大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒

  大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-11 00:00

  应用文章

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• 大鼠免疫球蛋白A（IgA）elisa试剂盒使用方法

  检测范围：48T1μg/ml-32μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白A(IgA)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠免疫球蛋白A(IgA)水平。用纯化的大鼠免疫球蛋白A(IgA)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白A(IgA)，再与HRP标记的免疫球蛋白A(IgA)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白A(IgA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠免疫球蛋白A(IgA)浓度。[详细]

  2018-10-03 10:00

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• 大鼠免疫球蛋白M（IgM）ELISA检测试剂盒

  www.biokanu.com本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断大鼠免疫球蛋白M（IgM）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被大鼠免疫球蛋白M（IgM）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠免疫球蛋白M（IgM）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品酶标仪（450nm）高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白；预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品（1600μg/mL）0.6mL0.6mL无标准品稀释液6mL3mL按说明书进行稀释样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：1600、800、400、200、100、50μg/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。试剂盒性能1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2.灵敏度：Zdi检测浓度小于1.0μg/mL。3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6.有效期：6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。[详细]

  2018-09-22 10:00

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• 犬免疫球蛋白M试剂盒操作使用方法

  犬免疫球蛋白M试剂盒操作使用方法[详细]

  2015-05-22 00:00

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• 大鼠免疫球蛋白A（IgA）试剂盒使用方法

  检测范围：48T1μg/ml-32μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白A(IgA)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠免疫球蛋白A(IgA)水平。用纯化的大鼠免疫球蛋白A(IgA)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白A(IgA)，再与HRP标记的免疫球蛋白A(IgA)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白A(IgA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠免疫球蛋白A(IgA)浓度。[详细]

  2018-09-19 10:01

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• 大鼠免疫球蛋白M(IgM)检测试剂盒

  大鼠免疫球蛋白M(IgM)检测试剂盒[详细]

  2024-10-01 03:33

  操作手册

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• 大鼠分泌型免疫球蛋白A（sIgA）Elisa试剂盒使用方法

  大鼠分泌型免疫球蛋白A（sIgA）Elisa试剂盒使用方法检测范围：1μg/ml-40μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中分泌型免疫球蛋白A（sIgA）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠分泌型免疫球蛋白A（sIgA）水平。用纯化的大鼠分泌型免疫球蛋白A（sIgA）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入分泌型免疫球蛋白A（sIgA），再与HRP标记的分泌型免疫球蛋白A（sIgA）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的分泌型免疫球蛋白A（sIgA）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠分泌型免疫球蛋白A（sIgA）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（80μg/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-12-30 10:00

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• 猪免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒

  猪免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-12 00:00

  期刊论文

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• 人免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒

  人免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-06 00:00

  应用文章

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• 大鼠免疫球蛋白E（IgE）试剂盒使用方法

  检测范围：48T7.5μg/ml-240μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白E(IgE)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠免疫球蛋白E(IgE)水平。用纯化的大鼠免疫球蛋白E(IgE)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E(IgE)，再与HRP标记的免疫球蛋白E(IgE)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠免疫球蛋白E(IgE)浓度。[详细]

  2018-10-01 10:00

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• 大鼠免疫球蛋白G（IgG）试剂盒使用方法

  检测范围：96T12μg/ml-400μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G（IgG）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠免疫球蛋白G（IgG）水平。用纯化的大鼠免疫球蛋白G（IgG）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白G（IgG），再与HRP标记的免疫球蛋白G（IgG）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白G（IgG）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠免疫球蛋白G（IgG）浓度。[详细]

  2018-10-08 10:01

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• 大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒

  大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-11 00:00

  标准

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• 猪免疫球蛋白M(IgM)ELISA检测试剂盒

  猪免疫球蛋白M(IgM)ELISA检测试剂盒[详细]

  2015-07-22 00:00

  课件

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• 猪免疫球蛋白M(IgM)酶联免疫（Elisa）试剂盒说明书

  猪免疫球蛋白M(IgM)酶联免疫（Elisa）试剂盒说明书[详细]

  2016-09-18 00:00

  安装说明

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• 鸡免疫球蛋白M（IgM）ELISA检测试剂盒说明书

  鸡免疫球蛋白M(IgM)ELISA检测试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡免疫球蛋白M(IgM)水平。用纯化的鸡免疫球蛋白M(IgM)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白M(IgM)，再与HRP标记的免疫球蛋白M(IgM)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白M(IgM)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡免疫球蛋白M(IgM)浓度。鸡免疫球蛋白M(IgM)ELISA检测试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（640ng/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。鸡免疫球蛋白M(IgM)ELISA检测试剂盒操作步骤标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。320ng/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液160ng/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液80ng/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液40ng/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液20ng/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。鸡免疫球蛋白M(IgM)ELISA检测试剂盒操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。鸡免疫球蛋白M(IgM)ELISA检测试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2019-01-02 10:00

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• 大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒

  大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-11 00:00

  选购指南

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• 大鼠免疫球蛋白E（IgE）ELISA试剂盒

  电话：021-6533363955229872网址：http://www.westang.com大鼠免疫球蛋白E（IgE）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠IgE单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IgE与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠IgE，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，IgE浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中IgE浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：250ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。所有标本测定前用标本稀释液至少作1：20稀释（取10ul，加标本稀释液190ul,稀释20倍）。2.标准品液配制：使用前加入0.5ml蒸馏水混匀，配成500ng/ml的溶液。设标准管8管，每管加入标本稀释液200ul。在**管中加入500ng/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出200ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、3.9、0ng/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应IgE含量，再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的IgE检测浓度小于2ng/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的大鼠IgE。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10.6％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:00

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• 大鼠免疫球蛋白A（IgA）ELISA检测试剂盒

  www.biokanu.com本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断大鼠免疫球蛋白A（IgA）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被大鼠免疫球蛋白A（IgA）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠免疫球蛋白A（IgA）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品酶标仪（450nm）高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白；预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品（320μg/mL）0.6mL0.6mL按说明书进行稀释标准品稀释液6mL3mL无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：320、160、80、40、20、10μg/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。结果判断绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。试剂盒性能1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2.灵敏度：Zdi检测浓度小于10μg/mL。3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6.有效期：6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。[详细]

  2018-09-22 10:00

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• 大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒

  大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-19 03:53

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