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裸鼠乙酰胆碱酯酶(AChE) ELISA试剂盒操作方法
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裸鼠乙酰胆碱酯酶(AChE) ELISA试剂盒操作方法
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裸鼠乙酰胆碱酯酶(AChE) ELISA试剂盒操作方法
- 裸鼠乙酰胆碱酯酶(AChE) ELISA试剂盒操作方法[详细]
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2015-06-10 00:00
产品样册
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裸鼠乙酰胆碱酯酶(AChE) ELISA试剂盒操作方法
- 裸鼠乙酰胆碱酯酶(AChE) ELISA试剂盒操作方法[详细]
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2015-04-20 00:00
选购指南
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裸鼠乙酰胆碱酯酶(AChE) ELISA试剂盒操作方法
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2015-03-23 00:00
操作手册
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大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒
- 大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-09 00:00
期刊论文
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人乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒
- 人乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
课件
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人乙酰胆碱酯酶(AchE)ELISA试剂盒使用说明书
- 人乙酰胆碱酯酶(AchE)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中乙酰胆碱酯酶(AchE)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人乙酰胆碱酯酶(AchE)水平。用纯化的人乙酰胆碱酯酶(AchE)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入乙酰胆碱酯酶(AchE),再与HRP标记的乙酰胆碱酯酶(AchE)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的乙酰胆碱酯酶(AchE)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人乙酰胆碱酯酶(AchE)含量。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:2250nmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。操作步骤标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1500nmol/L,1000nmol/L,500nmol/L,250nmol/L,125nmol/L)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批间应分别小于9%和11%检测范围:100nmol/L-2000nmol/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-07 14:16
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裸鼠环加氧酶2(COX-2)ELISA试剂盒
- 裸鼠环加氧酶2(COX-2)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-18 18:06
实验操作
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裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA试剂盒
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裸鼠克拉拉细胞蛋白(CC16) ELISA试剂盒
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2024-09-30 12:16
安装说明
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裸鼠白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒说明书
- 裸鼠白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中裸鼠白细胞介素1β(IL-1β)水平。用纯化的裸鼠白细胞介素1β(IL-1β)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加白细胞介素1β(IL-1β),再与HRP标记的白细胞介素1β(IL-1β)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素1β(IL-1β)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中裸鼠白细胞介素1β(IL-1β)浓度。裸鼠白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(64ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。裸鼠白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。32ng/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液16ng/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液8ng/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液4ng/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液2.0ng/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。裸鼠白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照裸鼠白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2019-01-02 10:00
产品样册
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裸鼠花生四烯酸(AA)试剂盒使用方法
- 裸鼠花生四烯酸(AA)试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T0.2pmol/L-8pmol/L使用目的:本试剂盒用于测定裸鼠血清、血浆及相关液体样本中花生四烯酸(AA)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中裸鼠花生四烯酸(AA)水平。用纯化的裸鼠花生四烯酸(AA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入花生四烯酸(AA),再与HRP标记的花生四烯酸(AA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的花生四烯酸(AA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中裸鼠花生四烯酸(AA)浓度。[详细]
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2018-12-30 10:00
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裸鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 检测范围:96T1.5ng/L-40ng/L使用目的:本试剂盒用于测定裸鼠血清、血浆及相关液体样本中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中裸鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。用纯化的裸鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α(TNF-α),再与HRP标记的肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中裸鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(80ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。40ng/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液20ng/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液10ng/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液5.0ng/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液2.5ng/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-10-03 10:00
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裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒操作说明
- 裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒操作说明[详细]
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2024-09-18 18:10
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裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T3μg/ml-80μg/ml使用目的:本试剂盒用于测定裸鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白E(IgE)含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中裸鼠免疫球蛋白E(IgE)水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E(IgE),再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中裸鼠免疫球蛋白E(IgE)浓度。裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫分析试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫分析试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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Fluoro AChE检测试剂盒
- 货号品名规格2017年价格AChE100-2FluoroAChE-100tests100Tests7225产品描述:保存温度:2-8度主要优点:无需放射性物质。应用-流式细胞仪或荧光显微镜。检测细胞水平的细胞溶解活性。适用于多种类型的哺乳动物细胞系。技术测量CMC/ADCCZ常用的方法是放射性铬-51(51Cr)释放试验(2)。该测定有几个缺点:昂贵的,难以加载某些细胞类型,由于严格的环境规定而处置昂贵,并且具有51Cr自发释放的高背景。使用流式细胞仪,现在可以消除对放射性物质的需要,并增加在单个细胞基底上定量细胞溶解活性的能力。各组已经证明通过流式细胞术测量CMC/ADCC活性与传统的51Cr释放测定(3,4,5,6)具有强烈(95%)的相关性。测定原理细胞跟踪染料CFSE(7,8,9)用于标记靶细胞群体。在测定完成实验方案后,加入7AAD(活/死)(10,11)以测量细胞死亡。7AAD仅进入膜受损细胞并与DNA结合。流式细胞术用于门靶细胞并测量7AAD阴性对7AAD后细胞。%细胞毒性通过以下等式计算(参见下面的实验例):7AAD正(右上象限)=R1/7AADPostitve(右上象限)=R1+7AAD负(右下象限)=R2×100ACT1为了测试猪gd淋巴细胞的自然杀伤能力,将K562细胞染色并调整至含有10%FBS的1×104个细胞/100μlPRMI的终浓度。以25:1,50:1和100:1的E/T比加入gd淋巴细胞,调节至400μlRPMI的总体积,然后在37℃,无菌封盖的面管中孵育4小时。孵育后,将活/死染色剂直接加入每个管中,在冰上孵育15分钟并通过流式细胞术分析。引用文献a.Perussia,B.,(1998).CurrentTopicsinMicrobiologyandImmunology230,p63.b.Whiteside,T.L.,Rinaldo,C.R.andHerberman,R.B.(1992)CytolyticCellfunctions.In:N.R.Rose,E.C.deMacario(Eds.),ManualofClinicalLaboratoryImmunology.AmericanSocietyforMicrobiology.Washington,DC,p.220.Brunner,K.T.,Manuel,J.,Cerotini,J.C.,Chapuis,B.,(1968).QuantitativeAssayoftheLyticActionofImmuneLymphoidCellsonCr-labelledAllogenicTargetCellsin-vitro;InhibitionbyIso-antibodyandbyDrugs,Immunology14,181.Lee-MacAry,A.E.,Ross,E.L,Davies,D.,andWilkinson,R.W.,(2001).DevelopmentofaNovelFlowCytometricCell-mediatedCytotoxcityAssayUsingtheFluorophoresPKH-26andTO-PRO-3Iodide.J.Immunology.Met252,83-92.Gogoy-Ramirez,K.,Franck,K.,andGains,H.,(2000).ANovelMethodfortheSimultaneousAssessmentofNaturalKillerCellConjugateFormationandCytotoxicityattheSingle-cellLevelbyMulti-parameterFlowCytometry.JournalofImmunology.Met239,35-44.Goldberg,J.E.,Sherwood,S.W.,Clayberger,C.,(1999).ANovelMethodforMeasuringCTLandNKCell-mediatedCytotoxicityUsingAnnexinVandTwo-colorFlowCytometry.JournalofImmunology.Methods224,1.Hatam,L,.Schuval,S.,Bonagura,V.R.,(1994).FlowCytometricAnalysisofNaturalKillerCellFunctionasaClinicalAssay.Cytometry16,59.L.SDeClercketal.,J.Immunol.Meth.172,115(1994).M.Bronner-Fraser,J.CellBiol.101,610(1985).Rabinovitch,P.S.,etal.,J.Immunol.136,2769(1986).Su,X.,J.Immunol.156,156,4198(1996).Olin,MR.Lee,J.Choi,K,andMolitor,Tw.gdT-lymphocyteCytotoxicActivityagainstMycobateriumbovisAnalysedbyFlowCytometry:JournalofImmunologicalMethods;Publicationinprocess.Olin,MR.Thesis,K.Cho,J.andMolitor,T.W.MorphineSuppressesMicroglialDirectedCytolyticActivitybygdLymphocytes.JournalofNeuroimmunology;Publicationinprocess.[详细]
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2018-09-29 10:02
产品样册
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裸鼠转化生长因子β1(TGF-β1)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 检测范围:96T15ng/L-400ng/L使用目的:本试剂盒用于测定裸鼠血清、血浆及相关液体样本中转化生长因子β1(TGF-β1)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中裸鼠转化生长因子β1(TGF-β1)水平。用纯化的裸鼠转化生长因子β1(TGF-β1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入转化生长因子β1(TGF-β1),再与HRP标记的转化生长因子β1(TGF-β1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子β1(TGF-β1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中裸鼠转化生长因子β1(TGF-β1)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(800ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。400ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液200ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液100ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液50ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液25ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月__[详细]
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2018-10-03 10:00
产品样册
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大鼠钙调神经磷酸酶ELISA试剂盒操作方法
- 大鼠钙调神经磷酸酶ELISA试剂盒操作方法[详细]
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2016-04-22 00:00
应用文章
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猪溶菌酶ELISA试剂盒操作方法
- 使用目的:本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中溶菌酶(LYS)的含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪溶菌酶(LYS)水平。用纯化的猪溶菌酶(LYS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入溶菌酶(LYS),再与HRP标记的溶菌酶(LYS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的溶菌酶(LYS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪溶菌酶(LYS)活性浓度。试剂盒组成120倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液3ml×1瓶2酶标试剂3ml×1瓶8标准品(160μg/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×4条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液3ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液3ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液3ml×1/瓶12密封袋1个[详细]
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2018-10-01 10:00
产品样册
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