Fluoro AChE检测试剂盒
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货号品名规格2017年价格AChE100-2FluoroAChE-100tests100Tests7225产品描述:保存温度:2-8度主要优点:无需放射性物质。应用-流式细胞仪或荧光显微镜。检测细胞水平的细胞溶解活性。适用于多种类型的哺乳动物细胞系。技术测量CMC/ADCCZ常用的方法是放射性铬-51(51Cr)释放试验(2)。该测定有几个缺点:昂贵的,难以加载某些细胞类型,由于严格的环境规定而处置昂贵,并且具有51Cr自发释放的高背景。使用流式细胞仪,现在可以消除对放射性物质的需要,并增加在单个细胞基底上定量细胞溶解活性的能力。各组已经证明通过流式细胞术测量CMC/ADCC活性与传统的51Cr释放测定(3,4,5,6)具有强烈(95%)的相关性。测定原理细胞跟踪染料CFSE(7,8,9)用于标记靶细胞群体。在测定完成实验方案后,加入7AAD(活/死)(10,11)以测量细胞死亡。7AAD仅进入膜受损细胞并与DNA结合。流式细胞术用于门靶细胞并测量7AAD阴性对7AAD后细胞。%细胞毒性通过以下等式计算(参见下面的实验例):7AAD正(右上象限)=R1/7AADPostitve(右上象限)=R1+7AAD负(右下象限)=R2×100ACT1为了测试猪gd淋巴细胞的自然杀伤能力,将K562细胞染色并调整至含有10%FBS的1×104个细胞/100μlPRMI的终浓度。以25:1,50:1和100:1的E/T比加入gd淋巴细胞,调节至400μlRPMI的总体积,然后在37℃,无菌封盖的面管中孵育4小时。孵育后,将活/死染色剂直接加入每个管中,在冰上孵育15分钟并通过流式细胞术分析。引用文献a.Perussia,B.,(1998).CurrentTopicsinMicrobiologyandImmunology230,p63.b.Whiteside,T.L.,Rinaldo,C.R.andHerberman,R.B.(1992)CytolyticCellfunctions.In:N.R.Rose,E.C.deMacario(Eds.),ManualofClinicalLaboratoryImmunology.AmericanSocietyforMicrobiology.Washington,DC,p.220.Brunner,K.T.,Manuel,J.,Cerotini,J.C.,Chapuis,B.,(1968).QuantitativeAssayoftheLyticActionofImmuneLymphoidCellsonCr-labelledAllogenicTargetCellsin-vitro;InhibitionbyIso-antibodyandbyDrugs,Immunology14,181.Lee-MacAry,A.E.,Ross,E.L,Davies,D.,andWilkinson,R.W.,(2001).DevelopmentofaNovelFlowCytometricCell-mediatedCytotoxcityAssayUsingtheFluorophoresPKH-26andTO-PRO-3Iodide.J.Immunology.Met252,83-92.Gogoy-Ramirez,K.,Franck,K.,andGains,H.,(2000).ANovelMethodfortheSimultaneousAssessmentofNaturalKillerCellConjugateFormationandCytotoxicityattheSingle-cellLevelbyMulti-parameterFlowCytometry.JournalofImmunology.Met239,35-44.Goldberg,J.E.,Sherwood,S.W.,Clayberger,C.,(1999).ANovelMethodforMeasuringCTLandNKCell-mediatedCytotoxicityUsingAnnexinVandTwo-colorFlowCytometry.JournalofImmunology.Methods224,1.Hatam,L,.Schuval,S.,Bonagura,V.R.,(1994).FlowCytometricAnalysisofNaturalKillerCellFunctionasaClinicalAssay.Cytometry16,59.L.SDeClercketal.,J.Immunol.Meth.172,115(1994).M.Bronner-Fraser,J.CellBiol.101,610(1985).Rabinovitch,P.S.,etal.,J.Immunol.136,2769(1986).Su,X.,J.Immunol.156,156,4198(1996).Olin,MR.Lee,J.Choi,K,andMolitor,Tw.gdT-lymphocyteCytotoxicActivityagainstMycobateriumbovisAnalysedbyFlowCytometry:JournalofImmunologicalMethods;Publicationinprocess.Olin,MR.Thesis,K.Cho,J.andMolitor,T.W.MorphineSuppressesMicroglialDirectedCytolyticActivitybygdLymphocytes.JournalofNeuroimmunology;Publicationinprocess.
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Fluoro AChE检测试剂盒
- 货号品名规格2017年价格AChE100-2FluoroAChE-100tests100Tests7225产品描述:保存温度:2-8度主要优点:无需放射性物质。应用-流式细胞仪或荧光显微镜。检测细胞水平的细胞溶解活性。适用于多种类型的哺乳动物细胞系。技术测量CMC/ADCCZ常用的方法是放射性铬-51(51Cr)释放试验(2)。该测定有几个缺点:昂贵的,难以加载某些细胞类型,由于严格的环境规定而处置昂贵,并且具有51Cr自发释放的高背景。使用流式细胞仪,现在可以消除对放射性物质的需要,并增加在单个细胞基底上定量细胞溶解活性的能力。各组已经证明通过流式细胞术测量CMC/ADCC活性与传统的51Cr释放测定(3,4,5,6)具有强烈(95%)的相关性。测定原理细胞跟踪染料CFSE(7,8,9)用于标记靶细胞群体。在测定完成实验方案后,加入7AAD(活/死)(10,11)以测量细胞死亡。7AAD仅进入膜受损细胞并与DNA结合。流式细胞术用于门靶细胞并测量7AAD阴性对7AAD后细胞。%细胞毒性通过以下等式计算(参见下面的实验例):7AAD正(右上象限)=R1/7AADPostitve(右上象限)=R1+7AAD负(右下象限)=R2×100ACT1为了测试猪gd淋巴细胞的自然杀伤能力,将K562细胞染色并调整至含有10%FBS的1×104个细胞/100μlPRMI的终浓度。以25:1,50:1和100:1的E/T比加入gd淋巴细胞,调节至400μlRPMI的总体积,然后在37℃,无菌封盖的面管中孵育4小时。孵育后,将活/死染色剂直接加入每个管中,在冰上孵育15分钟并通过流式细胞术分析。引用文献a.Perussia,B.,(1998).CurrentTopicsinMicrobiologyandImmunology230,p63.b.Whiteside,T.L.,Rinaldo,C.R.andHerberman,R.B.(1992)CytolyticCellfunctions.In:N.R.Rose,E.C.deMacario(Eds.),ManualofClinicalLaboratoryImmunology.AmericanSocietyforMicrobiology.Washington,DC,p.220.Brunner,K.T.,Manuel,J.,Cerotini,J.C.,Chapuis,B.,(1968).QuantitativeAssayoftheLyticActionofImmuneLymphoidCellsonCr-labelledAllogenicTargetCellsin-vitro;InhibitionbyIso-antibodyandbyDrugs,Immunology14,181.Lee-MacAry,A.E.,Ross,E.L,Davies,D.,andWilkinson,R.W.,(2001).DevelopmentofaNovelFlowCytometricCell-mediatedCytotoxcityAssayUsingtheFluorophoresPKH-26andTO-PRO-3Iodide.J.Immunology.Met252,83-92.Gogoy-Ramirez,K.,Franck,K.,andGains,H.,(2000).ANovelMethodfortheSimultaneousAssessmentofNaturalKillerCellConjugateFormationandCytotoxicityattheSingle-cellLevelbyMulti-parameterFlowCytometry.JournalofImmunology.Met239,35-44.Goldberg,J.E.,Sherwood,S.W.,Clayberger,C.,(1999).ANovelMethodforMeasuringCTLandNKCell-mediatedCytotoxicityUsingAnnexinVandTwo-colorFlowCytometry.JournalofImmunology.Methods224,1.Hatam,L,.Schuval,S.,Bonagura,V.R.,(1994).FlowCytometricAnalysisofNaturalKillerCellFunctionasaClinicalAssay.Cytometry16,59.L.SDeClercketal.,J.Immunol.Meth.172,115(1994).M.Bronner-Fraser,J.CellBiol.101,610(1985).Rabinovitch,P.S.,etal.,J.Immunol.136,2769(1986).Su,X.,J.Immunol.156,156,4198(1996).Olin,MR.Lee,J.Choi,K,andMolitor,Tw.gdT-lymphocyteCytotoxicActivityagainstMycobateriumbovisAnalysedbyFlowCytometry:JournalofImmunologicalMethods;Publicationinprocess.Olin,MR.Thesis,K.Cho,J.andMolitor,T.W.MorphineSuppressesMicroglialDirectedCytolyticActivitybygdLymphocytes.JournalofNeuroimmunology;Publicationinprocess.[详细]
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2018-09-29 10:02
产品样册
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Cell Technology Fluoro ACHE 说明书
- 世界ding级实验材料供应商CellTechnology正式授权上海起发为其ZG代理,CellTechnology在一直是行业的标杆,一直为广大科研客户提供Z为优质的产品和服务,上海起发一直秉承为ZG科研客户带来**的产品,**的服务,签约CellTechnology就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们Zda的收获CellTechnologyZG代理,CellTechnology上海代理,CellTechnology北京代理,CellTechnology广东代理,CellTechnology江苏代理CellTechnology湖北代理,CellTechnology天津,CellTechnology黑龙江代理,CellTechnology内蒙古代理,CellTechnology吉林代理,CellTechnology福建代理,CellTechnology江苏代理,CellTechnology浙江代理,CellTechnology四川代理,CellTechnology公司是一家私有公司,公司致力为广大客户提供优质的生物检测产品和服务。CellTechnology的员工是公司Z重要的竞争优势。CellTechnology有助于我们产品的公司的不妥协的质量承诺以确保每个产品的搞品质。CellTechnology员工和技术的的多样性使得我们能以独特的工艺解决当今复杂的商业挑战。CellTechnology主要产品包括抗体和试剂,同时提供代谢试验,双传感器的检测,荧光酶检测,氧化应激检测的产品及服务。FluoroAChEFluorescentActeylcholinesterase(AChE)DetectionKit-DetectionofAChEinRBC,Saliva,andTissueLysates荧光乙酰胆碱酯酶(AChE)检测试剂盒-检测红细胞,唾液和组织裂解液中的乙酰胆碱酯酶产品代码:ACHE100产品描述介绍接触化学神经制剂,农药和某些药物(麻醉剂,KKY和ZL药物)会降低红细胞(RBC)乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。RBC-AChE可以作为一种生物标记物来监测外周和神经系统中AChE功能的YZ和增加(9)。乙酰胆碱酯酶(AChE)是参与神经传递的Z重要的酶之一。该酶结合可兴奋组织(突触连接,内质网等)的细胞膜1-3。由于神经毒气和一类重要的农药对AChE的YZ,对人类和动物的急性毒性一直是一个深入的科学研究领域4,5。AChEYZ剂在临床上也被用作阿尔茨海默病的ZL药物(如他克林(四氢氨基吖啶))6,并且是各种疾病过程和ZL策略越来越受关注的对象7,8。然而,AChEYZ剂的环境检测和作为药物的AChE酶活性调节剂的开发已经由于当前测定方法的困难和复杂性而受到阻碍。主要优点非放射性测定可以监测多个时间点以遵循动力学。一步,没有洗涤检测。多功能:可检测红细胞,唾液和组织裂解液中的AChE活性。读数-96孔荧光读板器。测定原理我们开发了一种高度敏感,非常快速,非常简单的测定方法,以测定红细胞中的乙酰胆碱酯酶活性,使用天然底物乙酰胆碱。另外,通过使用特异性YZ剂,该试剂盒可用于检测各种样品中的AChE活性。一系列偶联的酶反应迅速将活性AChE的存在转化为淬灭检测试剂的荧光变化。AChE+ATP+H20+偶联酶反应+淬灭染料→荧光染料(例如:530-570nmEM:590-600nm时间=10分钟稀释使用的卷ug蛋白/孔RFU*RBC1:100010uL五3450RBC没有Ach1:100010uL五152大鼠脑1:50010uL205864大脑没有Ach1:50010uL20296唾液整齐10uLND925唾液没有整齐10uLND772RBC-AChEmU/mLRFUSDRFU167.00099990.0041.7506375121.7010.43816599.002.6095909.810.6522567.230.1632228.7201868.08我们公司Zda优势是强大的采购,1:基本什么都能进口,血清,抗体,耗材,还有部分限制进口的,2:货品全,现经营过700多个品牌,基本所有生物试剂耗材都可以进口,特别是冷偏的产品那就更有优势,3:提供加急服务,一般1-2周到货,超过时限加急费全免4:价格公道,绝大部分价格有优势,当然不能保证1**%产品都是价格Zdi,因为价格Zdi意味着没有服务.5:良好的信誉,大部分客户我们提供货到付款服务,客户包括清华,北大交大复旦,中山等100多所大学,ROCHE,阿斯利康,国药,fisher等500多家公司6:我们du家代理的品牌有:AntibodyResearchCorporation,arcticzymes,Biorelevant,AmberGen,Inc.,clemente-associates,clodronateliposomes,ColumbiaBiosciences,enzymeresearch,GeneBridgesGmbH,Genovis,AmberGen,Inc.BiotechnologyGmbH,HaematologicTechnologiesHTIHaemtech,hookelabs,Immudex,InnovativeResearchofAmerica,inspiralis,ListBiologicalLaboratories,Inc.,lumafluor,Microsurfaces,multiplicom,nanotools,Pel-FreezBiologicals,pentapharm,progen,ProteinArk,QA-Bio,Inc,QA-Bio,IncQuickZymeBiosciences,Teknova,TriLinkBioTechnologies,Inc.,ZyagenLaboratories等7:我们还是invitrogen,qiagen,MidlandBioProductsCorporationam,sigma;neb,roche,merck,rnd,BD,GE,pierce,BioLegend等知名批发,欢迎合作。[详细]
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2018-09-29 10:02
产品样册
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大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒
- 大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-09 00:00
期刊论文
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人乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒
- 人乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
课件
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裸鼠乙酰胆碱酯酶(AChE) ELISA试剂盒操作方法
- 裸鼠乙酰胆碱酯酶(AChE) ELISA试剂盒操作方法[详细]
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2015-06-10 00:00
产品样册
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裸鼠乙酰胆碱酯酶(AChE) ELISA试剂盒操作方法
- 裸鼠乙酰胆碱酯酶(AChE) ELISA试剂盒操作方法[详细]
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2015-04-20 00:00
选购指南
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裸鼠乙酰胆碱酯酶(AChE) ELISA试剂盒操作方法
- 裸鼠乙酰胆碱酯酶(AChE) ELISA试剂盒操作方法[详细]
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2015-03-23 00:00
操作手册
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人乙酰胆碱酯酶(AchE)ELISA试剂盒使用说明书
- 人乙酰胆碱酯酶(AchE)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中乙酰胆碱酯酶(AchE)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人乙酰胆碱酯酶(AchE)水平。用纯化的人乙酰胆碱酯酶(AchE)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入乙酰胆碱酯酶(AchE),再与HRP标记的乙酰胆碱酯酶(AchE)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的乙酰胆碱酯酶(AchE)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人乙酰胆碱酯酶(AchE)含量。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:2250nmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。操作步骤标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1500nmol/L,1000nmol/L,500nmol/L,250nmol/L,125nmol/L)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批间应分别小于9%和11%检测范围:100nmol/L-2000nmol/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-07 14:16
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β内酰胺酶检测试剂盒
- β内酰胺酶检测试剂盒[详细]
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2011-02-09 00:00
期刊论文
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三聚氰胺检测试剂盒
- 三聚氰胺检测试剂盒[详细]
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2012-08-24 00:00
产品样册
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四环素检测试剂盒
- 四环素检测试剂盒[详细]
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2012-08-24 00:00
期刊论文
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呋喃西林检测试剂盒
- 呋喃西林检测试剂盒[详细]
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2012-08-24 00:00
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淀粉检测试剂盒
- 订货号:10207748035产品名称:淀粉(Starch)产品英文名称:Starch包装:Ca.27tests产品介绍:请下载产品说明:Starch(用于检测食品中的淀粉)[详细]
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2018-09-15 10:00
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胆固醇检测试剂盒
- 订货号:10139050035产品名称:胆固醇(Cholesterol)产品英文名称:Cholesterol包装:Ca.31tests产品介绍:请下载详细资料产品说明:Cholesterol(用于检测食品中的胆固醇)[详细]
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2018-09-15 10:00
产品样册
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(Digoxin) 检测试剂盒
- www.biokanu.com(Digoxin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1使用目的:本试剂盒用于血液、血清、尿液等样本中(Digoxin)残留的定量检测。2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有(Digoxin)偶联抗原,加入(Digoxin)标准品或样品,游离(Digoxin)与微孔条上预包被的(Digoxin)偶联抗原互相竞争(Digoxin)抗体酶标记物,用TMB底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中(Digoxin)含量成反比,通过标准曲线计算样品中(Digoxin)的含量。3试剂盒组成3.1预包被的(Digoxin)偶联抗原的可拆酶标板:1块(12孔×8条)。3.2(Digoxin)标准品:6瓶(1ml/瓶),含量分别是:0ug/L,0.01ug/L,0.03ug/L,0.15ug/L,0.45ug/L,1.35ug/L3.3抗(Digoxin)抗体酶结合物:1瓶(6ml)。3.4显色液A:1瓶(6ml)。3.5显色液B:1瓶(6ml)。3.6终止液:1瓶(6ml),2M硫酸。3.7样本稀释液:1瓶(10×,6ml),用于样品稀释用。3.8浓缩洗涤液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。3.9说明书一份。4需要而未提供的材料4.1设备4.1.1波长450nm酶标仪。4.1.2粉碎机。4.1.3量筒。4.1.4振荡器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相当的滤纸。4.1.7微量移液器。4.2试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。4.2.2甲醇。5贮存5.1试剂盒贮存于2~8℃,切勿冷冻5.2未用完的微孔板应该密封干燥保存6注意事项6.1使用试剂盒前请仔细阅读说明书。6.2不要使用过期试剂盒。6.3试剂盒使用前,将试剂恢复至室温(25±2℃),建议至少回温2小时。6.4标准品中含有(Digoxin),使用时应特别注意,操作时应带手套。6.5终止液中含有硫酸,使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6.6不同标准品、样品所用吸头不能混用,否则会影响试验结果。6.7不同批号试剂盒中的试剂不得混用;不同标准品、样品所用吸头不得混用,否则会影响实验结果。6.8稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液,否则会影响实验结果6.9混合试剂时应避免起泡。7工作液准备7.1(Digoxin)标准品溶液:0ug/L,0.01ug/L,0.03ug/L,0.15ug/L,0.45ug/L,1.35ug/L7.2浓缩洗涤液:用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用7.3样本稀释液:备用7.3显色剂:已备用,避免光线直照7.4反应终止液:已备用8样品处理程序(样品在提取过程中,要严格按说明书操作,提取过程中应准确稀释,否则会出现结果不准确,样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存)8.1取10g粉碎的样品,加20ml70%甲醇溶液8.2QL振荡3分钟8.3用WhatmanNo1滤纸过滤8.4取100l处理后的样品,加入400l样本稀释液8.5取50μl稀释液进行分析(稀释倍数10)动物组织前处理8.6准确称取1±0.05g匀浆后的组织样品到50ml的聚苯乙烯离心管中;加入3ml乙腈--丙酮提取溶液,2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心5min8.7取上清液0.8ml在50℃氮气流下吹干8.8加入2mL1×样品稀释液Ⅰ,750rpm涡旋20s8.9取100ml用于分析饲料前处理方法8.10准确称取1±0.05g粉碎饲料样品到50ml的聚苯乙烯离心管中;加入4ml乙腈,1ml丙酮,2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心3min8.11取上清液0.7ml在50℃氮气流下吹干8.12加入1mL1×样品稀释液Ⅰ,涡旋20s,取出100ml加到900ml1×样品稀释液Ⅰ,混匀后取100ml用于分析牛奶前处理方法8.13取1ml牛奶样品到2ml离心管中;用1×样品稀释液Ⅱ稀释30倍,混匀后取100ml用于分析奶粉前处理方法8.14准确称取0.3g奶粉样品到7ml的聚苯乙烯离心管中;加入2ml1×样品稀释液Ⅲ,2ml正己烷,震荡混匀8.154000r/min以上离心5min,去除有机层和中间层,取下层溶液100ml到300ml1×样品稀释液Ⅲ8.16混匀后取100ml用于分析9酶免分析步骤9.1实验须知9.1.1实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温(25±2℃),时间约2小时。回温至室温(25±2℃)后再取出微孔条,多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存注:一定保证回温充分,否则影响检测的极ng确度和准确度。9.1.2使用后请立即将试剂放回2~8℃保存9.1.3请不要改变分析程序9.1.4请使用极ng确的微量移液器9.1.5操作一旦开始,请不要中断任何程序9.1.6ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序,请严格按照要求操作9.1.7为避免交叉污染,每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样9.1.8加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面9.2分析步骤9.2.1预先进行编号,标记B0、标准品和样品的位置,推荐进行双孔检测9.2.2取所需数量的微孔(微孔条可拆),将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存9.2.3样品稀释液(10×)、浓缩洗涤液(20×)稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)9.2.4在B0孔中加入50l0.0ug/L标准品溶液9.2.5在各标准孔中加入50μl的标准品溶液9.2.6在各样品孔中加入50l样品溶液9.2.7在所有孔中加入50l的抗(Digoxin)抗体酶结合物9.2.8轻轻晃动反应板几秒钟。9.337℃温浴30min(温浴过程中不时轻拍反应板,可以减少双孔误差)9.3.1甩掉孔中液体,用洗液洗涤微孔板5次,Z后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。9.4反应9.4.1洗涤程序完成后,立即用微量移液器在每个微孔中先加入50l显色液A,再加50l显色液B;轻微晃动反应板使之彻底混匀9.4.237℃温浴10min9.4.3每孔中加入50l终止液,混匀9.4.4在450nm下检测吸光度,结果在5min内读取。10结果计算10.1定量分析10.1.1所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值(B)除以**个标准(0标准)的吸光度值(B0)再乘以1**%,即百分吸光度值。B标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B00ug/L标准溶液的平均吸光度值10.1.2以(Digoxin)浓度的对数值为X轴,百分吸光度值为Y轴,绘制标准曲线图。根据样品百分吸光度值,可从曲线上得到对应点的横坐标,即为(Digoxin)浓度的对数值,求得反对数即为测定液中(Digoxin)浓度C(ug/L)10.1.3由于样品经过了预先稀释,因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。10.2半定量测定10.1.1目测半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品吸光度值的高低比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。10.1.2仪器半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品颜色深浅比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。11特异性物质交叉反应(Digoxin)1**%12试剂盒参数本试剂盒检测下限为0.01ug/LB0吸光度**值应大于1.0试剂盒吸光度板内误差小于8%,板间误差小于15%。用本说明书提供的组织样本提取方法回收率大于80%。13标准曲线模式(仅供参考)试剂盒提供的标准曲线范围为0.01ug/L~1.35ug/L。14分析限制本试剂盒检测为阳性的样品应该用另一种方法如HPLC或GC/MS加以确证。[详细]
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2018-09-22 10:00
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