碱性磷酸酶研究应用

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• 碱性磷酸酶研究应用

  碱性磷酸酶也是目前免疫诊断试剂产品Z常用的标记酶之一。与辣根过氧化物酶（HRP）相比，ALP用作标记酶的优点是，稳定性高、灵敏度高，缺点是成本高，标记困难。　　在研究中Z常用的ALP如下：　　◇细菌碱性磷酸酶Bacterialalkalinephosphatase（BAP）,来源：EscherichiacoliC4；　　◇Shrimpalkalinephosphatase（SAP）,来源：一种北极虾（Pandalusborealis）;　　◇小牛肠碱性磷酸酶CalfIntestinalAlkalinePhosphatase（CIP）;　　◇胎盘碱性磷酸酶Placentalalkalinephosphatase（PALP）和分泌性碱性磷酸酶thesecretedalkalinephosphatase（SEAP），后者是前者的C末端短缺版与PALP相比，SEAP没有PALP的C末端Z后24个氨基酸（这24个氨基酸构成了与糖基化磷脂酰肌醇靶向锚定的区域）　　ALP主要应用于分子生物学和酶免分析中：　　★分子生物学中主要用作核酸的去磷酸化。因为DNA通常会在5'端结合磷酸基团，用ALP去磷酸化能防止DNA分子5'端与3'端连接，从而在后续步骤准备好之前让DNA分子YZ处于线性化状态;同样，通过去磷酸化可用作放射标记示踪。通常用作这些目的用的Z多的是Shrimpalkalinephosphatase（SAP），因为在反应完成之后它是Z容易灭活的。　　★酶免分析中应用Z多的是ELISA，以竞争法测小分子抗原为例，抗体先与固相载体结合，然后让待测样品与事先经ALP标记过的该抗原竞争地与抗体结合，洗去未反应的过量ALP-抗原，加入显色底物。则可以通过与按梯度浓度变化的标准品绘出的标准曲线对比从而知道待测样品中抗原的浓度。ELISA中用的比较多的是辣根过氧化物酶（HRP），底物为OPD，深桔黄色，检测波长492nm；TMB，蓝绿色，检测波长450nm碱性磷酸酶，底物为PNPP（对－消基苯磷酸酯），黄色，检测波长405nm　　★目前工业上一个普遍的应用是作为检验牛奶的巴斯的灭菌的标志：被巴斯德过高温灭菌的分子会被灭活，向其中和未巴斯灭菌的牛奶中加入ALP的底物，2分钟后未灭菌的样品应该显黄色，如果待测样品（指被巴斯灭菌过的牛奶）也能呈现相同颜色，则说明巴斯灭菌温度未过度。当然总有例外，因为有少数细菌会产生耐热的ALP。[详细]

  2024-09-29 00:09

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• 碱性磷酸酶底物

  碱性磷酸酶底物[详细]

  2011-07-15 00:00

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• 碱性磷酸酶[大肠杆菌] 使用说明

  供应商：上海经科化学科技有限公司活动：消费积分可换充值卡！中文：碱性磷酸酶[大肠杆菌]英文：Phosphatase(Alkaline)(E.coli)货号：E-ALPEC规格：400Units价格：1728元类别：碳水化合物活性酶简介：碳水化合物活性酶，活跃在复杂的碳水化合物和糖复合物，酶的活性：:GlycosideHydrolases(GHs);Glycosyl-Transferases(GTs);PolysaccharideLyases(PLs);CarbohydrateEsterases(CEs)andCarbohydrate-BindingModules(CBMs)说明书：点击上面“”相关产品：货号：E-ABFAN；α-L-阿拉伯呋喃糖酶（构巢曲霉）；500Units；2400元货号：E-ABFBO17；α-L-阿拉伯呋喃糖酶B17（卵形类杆菌）；2,000Units；2400元货号：E-ABFBO21；α-L-阿拉伯呋喃糖酶B21（卵形类杆菌）；200Units；2400元货号：E-ABFBO25；α-L-阿拉伯呋喃糖酶B25（卵形类杆菌）；200Units；2400元货号：E-ABFCJ；α-L-阿拉伯呋喃糖酶（纤维弧菌）；500Unitsat40oC；2608元货号：E-ABFCT；α-L-阿拉伯呋喃糖酶（热纤梭菌）；500Unitsat40oC；2608元货号：E-ABFUM；α-L-阿拉伯呋喃糖酶（玉蜀黍黑粉菌）；400Unitsat40oC；2400元货号：E-ACPEC；酸性磷酸酶(大肠杆菌)；400Units；2000元货号：E-ACSBS；Acetyl-CoA合成酶[枯草杆菌]；250Units；3248元货号：E-ADHEC；乙醇脱氢酶[大肠杆菌]；1,000Units；2080元货号：E-AFAM2；α-L-阿拉伯呋喃糖酶（新特异性青春双歧杆菌）；400Units；2448元货号：E-AFASE；α-L-阿拉伯呋喃糖酶[黑曲霉]；480Units；2320元货号：E-AGALPS；α-半乳糖苷酶[简青霉]；2,000Unitsat40oC；2400元货号：E-AGLAN；α-半乳糖苷酶[黑曲霉]；2,000Units；2528元货号：E-AGLANP；α-半乳糖苷酶[黑曲霉]粉末；3,000Units；2800元货号：E-AGLGU；α-半乳糖苷酶[瓜尔豆]；1,000Units；2528元货号：E-AGLUTM；α-葡萄糖苷酶[耐热][海栖热袍菌]；500Unitsat80oC；2480元货号：E-AGUBS；α-葡萄糖醛酸酶[嗜热脂肪芽孢杆菌]重组；200Unitsat70oC；2144元[详细]

  2018-09-30 10:00

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• 小鼠碱性磷酸酶（ALP）ELISA试剂盒

  小鼠碱性磷酸酶（ALP）ELISA试剂盒[详细]

  2015-10-14 00:00

  安装说明

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• 碱性磷酸酶缓冲液（pH9.5,无菌）说明书

  碱性磷酸酶缓冲液(pH9.5,无菌)说明书上海乔羽生物提供碱性磷酸酶缓冲液(pH9.5,无菌)说明书，详细为您讲述碱性磷酸酶缓冲液(pH9.5,无菌)的用途，特点，操作步骤，注意事项等详情，本司专业供应ELISA试剂盒，标准品对照品，动物血清，化学试剂，生化试剂，染色液，溶液，缓冲液，实验耗材，生物分子，微生物，蛋白质，抗生素，培养基，抗体，抗原，其他实验试剂等，了解更多试剂详情请来电联系我司销售人员!中文名：碱性磷酸酶缓冲液(pH9.5,无菌)供应商：上海乔羽用途：酶化学法DNA检测注意事项：主要由0.1MTris-HCl、0.1M氯化钠、2mM氯化镁组成,经高压灭菌处理。保存：室温,12个月碱性磷酸酶缓冲液(pH9.5,无菌)操作步骤：1、按实验具体要求操作或参考如下步骤操作。2、封闭后漂洗时，用200ml碱性磷酸酶缓冲液(pH7.5)漂洗膜2次，再用200ml碱性磷酸酶缓冲液(pH9.5)，轻微漂洗。3、采用NBT/BICIP法检测。碱性磷酸酶缓冲液(pH9.5,无菌)注意事项：1、如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。标签：碱性磷酸酶缓冲液(pH9.5,无菌)缓冲液碱性磷酸酶缓冲液[详细]

  2018-11-09 10:00

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• 大鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒

  大鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-22 17:53

  实验操作

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• 人碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒

  人碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-22 18:15

  安装说明

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• 小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒

  小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-17 05:10

  标准

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• 人（human）骨碱性磷酸酶（BAP）

  人（human）骨碱性磷酸酶（BAP）[详细]

  2024-09-17 11:28

  其它

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• 一般研究应用文章

  一般研究应用文章[详细]

  2024-09-29 11:36

  课件

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• 大鼠骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒

  大鼠骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

  课件

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• 人骨碱性磷酸酶(BALP)检测试剂盒

  人骨碱性磷酸酶(BALP)检测试剂盒[详细]

  2015-03-17 00:00

  其它

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• 人碱性磷酸酶(ALP)ELISA Kit说明书

  人碱性磷酸酶(ALP)ELISA Kit说明书[详细]

  2014-08-21 00:00

  应用文章

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• 人碱性磷酸酶（ALP）试剂盒使用说明书

  实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人碱性磷酸酶(ALP)水平。用纯化的人碱性磷酸酶(ALP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入碱性磷酸酶(ALP)，再与HRP标记的碱性磷酸酶(ALP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的碱性磷酸酶(ALP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人碱性磷酸酶(ALP)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（240U/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。人碱性磷酸酶(ALP)试剂盒使用说明书操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120U/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60U/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30U/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15U/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液7.5U/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。人碱性磷酸酶(ALP)试剂盒使用说明书保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-09-27 10:00

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• 大鼠碱性磷酸酶elisa试剂盒使用说明书

  大鼠碱性磷酸酶elisa试剂盒使用说明书使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中碱性磷酸酶（ALP）含量。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。40IU/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液20IU/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液10IU/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液5IU/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液2.5IU/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。[详细]

  2018-10-01 10:00

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• 骨碱性磷酸酶BAP ELISA试剂盒说明书

  【产品名称】通用名称：骨碱性磷酸酶BAPELISA试剂盒英文名称：BAPELISAKit【包装规格】96人份/盒【预期用途】骨碱性磷酸酶BAPELISA试剂盒用于定量检测人血清中骨特异性碱性磷酸酶（BAP）。作为成骨细胞活性的指示剂，本试剂盒可作为管理绝经后骨质疏松和变形性骨炎的辅助工具。血清骨碱性磷酸酶（BAP）的水平被认为反映了成骨细胞的代谢状态（6，7）。骨代谢的极ng确评定对于测定骨代谢疾病的严重程度和ZLLX起着关键性的作用。血清BAP水平的测定已显示有助于评估变形性骨炎、骨软化症、原发性甲状旁腺功能亢进、肾性骨营养不良、骨质疏松症和骨转移患者（6-10）。总碱性磷酸酶测定已被认可应用于变形性骨炎的诊断和病人的监测。骨是一个动态的组织，人的一生始终贯穿着骨的生成和骨的溶解（也叫骨吸收），这个过程称之为骨重建。骨重建过程是在两种骨细胞交互作用完成的复杂过程：成骨细胞影响骨的生成，而破骨细胞影响骨的吸收（1-3）。骨形成和骨吸收是一个在正常环境下紧密耦联的相互依赖的过程（2，4）。这种耦联关系是保持骨骼生化活性不可或缺的部分，从而维持了骨组织的结构、外型及强度（2，3，5）。变形性骨炎是一种常见的骨骼紊乱，表现为正常骨细胞的局灶性增生。变形性骨炎的发病率比曾一度认为发病人群在3%-4%的中年患者和10%-15%的老年人要高出许多。这种疾病不影响年轻人。绝大部分变形性骨炎患者无临床症状，容易漏诊，除非在一些不相关原因的YL检查时出现X摄片或血清碱性磷酸酶水平异常时才发现的。这种症状的患者Z常见的症状是疼痛和畸形。资料来源：北京科瑞美科技有限公司[详细]

  2018-10-31 10:00

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• 大鼠碱性磷酸酶（ALP）Elisa试剂盒说明书

  大鼠碱性磷酸酶（ALP）酶联免疫分析试剂盒说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：96T1IU/L-40IU/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中碱性磷酸酶（ALP）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠碱性磷酸酶（ALP）水平。用纯化的大鼠碱性磷酸酶（ALP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入碱性磷酸酶（ALP），再与HRP标记的碱性磷酸酶（ALP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的碱性磷酸酶（ALP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠碱性磷酸酶（ALP）浓度。大鼠碱性磷酸酶（ALP）酶联免疫分析试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（80IU/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。大鼠碱性磷酸酶（ALP）酶联免疫分析试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。40IU/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液20IU/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液10IU/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液5IU/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液2.5IU/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。大鼠碱性磷酸酶（ALP）酶联免疫分析试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照大鼠碱性磷酸酶（ALP）酶联免疫分析试剂盒说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-23 10:00

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• 人骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒

  人骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-26 05:38

  期刊论文

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• 人碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒说明书

  人碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒说明书[详细]

  2024-09-11 18:04

  实验操作

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• 骨形态发生蛋白的研究与应用

  骨形态发生蛋白的研究与应用[详细]

  2011-06-10 00:00

  标准

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