呕吐毒素（vomitoxin）酶联免疫分析（ELISA）说明书

本文由 北京冬歌博业生物科技有限公司 整理汇编

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• 呕吐毒素（vomitoxin）酶联免疫分析（ELISA）说明书

  此说明书为PDF格式，请下载参阅！呕吐毒素（vomitoxin）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用1使用目的：本试剂盒用于各种谷物、饲料、麦芽啤酒和麦芽汁中呕吐毒素（vomitoxin）残留的定量检测。2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有呕吐毒素（vomitoxin）偶联抗原，加入呕吐毒素（vomitoxin）标准品或样品，游离呕吐毒素（vomitoxin）与微孔条上预包被的呕吐毒素（vomitoxin）偶联抗原互相竞争抗呕吐毒素（vomitoxin）抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中呕吐毒素（vomitoxin）含量成反比，通过标准曲线计算样品中呕吐毒素（vomitoxin）的含量。3试剂盒组成3.1预包被的呕吐毒素（vomitoxin）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。3.2呕吐毒素（vomitoxin）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ppb，0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb。3.3抗呕吐毒素（vomitoxin）抗体酶结合物：1瓶（6ml）。3.4显色液A：1瓶（6ml）。3.5显色液B：1瓶（6ml）。3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。3.7样本稀释液：1瓶（10×,6ml），用于样品稀释用。3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。3.9说明书一份。4需要而未提供的材料4.1设备4.1.1波长450nm酶标仪。4.1.2粉碎机。4.1.3量筒。4.1.4振荡器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相当的滤纸。4.1.7微量移液器。4.2试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。4.2.2甲醇。5贮存5.1试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻5.2未用完的微孔板应该密封干燥保存6注意事项6.1使用试剂盒前请仔细阅读说明书。6.2不要使用过期试剂盒。6.3试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。6.4标准品中含有呕吐毒素（vomitoxin），使用时应特别注意，操作时应带手套。6.5终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6.6不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。6.7不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。6.8稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果6.9混合试剂时应避免起泡。7工作液准备7.1呕吐毒素（vomitoxin）标准品溶液：0ppb，0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb7.2浓缩洗涤液：用蒸馏水按1:20（1+19）稀释备用7.3样本稀释液：用蒸馏水按1:10（1+9）稀释备用7.3显色剂：已备用，避免光线直照7.4反应终止液：已备用8样品处理：（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）一般样品处理8.1取10g粉碎的样品，加20ml70%甲醇溶液8.2QL振荡3分钟8.3用WhatmanNo1滤纸过滤8.4取100l处理后的样品，加入400l样本稀释液8.5取100μl稀释液进行分析动物组织前处理8.6准确称取1±0.05g匀浆后的组织样品到50ml的聚苯乙烯离心管中；加入3ml乙腈--丙酮提取溶液，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心5min8.7取上清液0.8ml在50℃氮气流下吹干8.8加入3.2mL样品稀释液,750rpm涡旋20s8.9取100ml用于分析饲料前处理方法8.10准确称取1±0.05g粉碎饲料样品到50ml的聚苯乙烯离心管中；加入4ml乙腈，1ml丙酮，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心3min8.11取上清液0.7ml在50℃氮气流下吹干8.12加入2.8mL样品稀释液,涡旋20s，混匀后取100ml用于分析牛奶前处理方法8.13取1ml牛奶样品到5ml聚苯乙烯离心管中；加入4ml样品稀释液，混匀后取100ml用于分析奶粉前处理方法8.14准确称取0.3g奶粉样品到7ml的聚苯乙烯离心管中；加入2mlPBS溶液，2ml正己烷，震荡混匀8.154000r/min以上离心5min，去除有机层和中间层，取下层溶液100ml到400ml样品稀释液8.16混匀后取100ml用于分析9酶免分析步骤9.1实验须知9.1.1实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温（25±2℃），时间约2小时。回温至室温（25±2℃）后再取出微孔条，多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存注：一定保证回温充分，否则影响检测的极ng确度和准确度。9.1.2使用后请立即将试剂放回2~8℃保存9.1.3请不要改变分析程序9.1.4请使用极ng确的微量移液器9.1.5操作一旦开始，请不要中断任何程序9.1.6ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序，请严格按照要求操作9.1.7为避免交叉污染，每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样9.1.8加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面9.2分析步骤9.2.1预先进行编号，标记B0、标准品和样品的位置，推荐进行双孔检测9.2.2取所需数量的微孔（微孔条可拆），将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存9.2.3样品稀释液、浓缩洗涤液（20×）稀释成工作液（蒸馏水或去离子水稀释）9.2.4在B0孔中加入50l0.0ppb标准品溶液9.2.5在各标准孔中加入50μl的标准品溶液9.2.6在各样品孔中加入50l样品溶液9.2.7在所有孔中加入50l的抗呕吐毒素（vomitoxin）抗体酶结合物9.2.8轻轻晃动反应板几秒钟。9.337℃温浴30min（温浴过程中不时轻拍反应板，可以减少双孔误差）9.3.1甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板5次，Z后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。9.4反应9.4.1洗涤程序完成后，立即用微量移液器在每个微孔中先加入50l显色液A，再加50l显色液B；轻微晃动反应板使之彻底混匀9.4.237℃温浴10min9.4.3每孔中加入50l终止液，混匀9.4.4在450nm下检测吸光度，结果在5min内读取。10结果计算10.1定量分析10.1.1所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值（B）除以**个标准（0标准）的吸光度值（B0）再乘以1**%，即百分吸光度值。B标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B00ppb标准溶液的平均吸光度值10.1.2以呕吐毒素（vomitoxin）浓度的对数值为X轴，百分吸光度值为Y轴，绘制标准曲线图。根据样品百分吸光度值，可从曲线上得到对应点的横坐标，即为呕吐毒素（vomitoxin）浓度的对数值，求得反对数即为测定液中呕吐毒素（vomitoxin）浓度C（ppb）10.1.3由于样品经过了预先稀释，因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。10.2半定量测定10.1.1目测半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品吸光度值的高低比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。10.1.2仪器半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品颜色深浅比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。11特异性物质交叉反应呕吐毒素（vomitoxin）1**%12试剂盒参数本试剂盒检测下限为0.1ppbB0吸光度**值应大于1.0试剂盒吸光度板内误差小于8％，板间误差小于15％。用本说明书提供的组织样本提取方法回收率大于80％。13标准曲线模式（仅供参考）试剂盒提供的标准曲线范围为0.1ppb~8.1ppb。14分析限制本试剂盒检测为阳性的样品应该用另一种方法如HPLC或GC/MS加以确证。[详细]

  2018-09-03 10:00

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• 呕吐毒素（vomitoxin）检测说明书

  呕吐毒素（vomitoxin）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用1使用目的：本试剂盒用于各种谷物、饲料、麦芽啤酒和麦芽汁中呕吐毒素（vomitoxin）残留的定量检测。2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有呕吐毒素（vomitoxin）偶联抗原，加入呕吐毒素（vomitoxin）标准品或样品，游离呕吐毒素（vomitoxin）与微孔条上预包被的呕吐毒素（vomitoxin）偶联抗原互相竞争抗呕吐毒素（vomitoxin）抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中呕吐毒素（vomitoxin）含量成反比，通过标准曲线计算样品中呕吐毒素（vomitoxin）的含量。3试剂盒组成3.1预包被的呕吐毒素（vomitoxin）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。3.2呕吐毒素（vomitoxin）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ppb，0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb。3.3抗呕吐毒素（vomitoxin）抗体酶结合物：1瓶（6ml）。3.4显色液A：1瓶（6ml）。3.5显色液B：1瓶（6ml）。3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。3.7样本稀释液：1瓶（10×,6ml），用于样品稀释用。3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。3.9说明书一份。4需要而未提供的材料4.1设备4.1.1波长450nm酶标仪。4.1.2粉碎机。4.1.3量筒。4.1.4振荡器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相当的滤纸。4.1.7微量移液器。4.2试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。4.2.2甲醇。5贮存5.1试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻5.2未用完的微孔板应该密封干燥保存6注意事项6.1使用试剂盒前请仔细阅读说明书。6.2不要使用过期试剂盒。6.3试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。6.4标准品中含有呕吐毒素（vomitoxin），使用时应特别注意，操作时应带手套。6.5终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6.6不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。6.7不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。6.8稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果6.9混合试剂时应避免起泡。7工作液准备7.1呕吐毒素（vomitoxin）标准品溶液：0ppb，0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb7.2浓缩洗涤液：用蒸馏水按1:20（1+19）稀释备用7.3样本稀释液：用蒸馏水按1:10（1+9）稀释备用7.3显色剂：已备用，避免光线直照7.4反应终止液：已备用8样品处理：（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）一般样品处理8.1取10g粉碎的样品，加20ml70%甲醇溶液8.2QL振荡3分钟8.3用WhatmanNo1滤纸过滤8.4取100l处理后的样品，加入400l样本稀释液8.5取100μl稀释液进行分析动物组织前处理8.6准确称取1±0.05g匀浆后的组织样品到50ml的聚苯乙烯离心管中；加入3ml乙腈--丙酮提取溶液，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心5min8.7取上清液0.8ml在50℃氮气流下吹干8.8加入3.2mL样品稀释液,750rpm涡旋20s8.9取100ml用于分析饲料前处理方法8.10准确称取1±0.05g粉碎饲料样品到50ml的聚苯乙烯离心管中；加入4ml乙腈，1ml丙酮，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心3min8.11取上清液0.7ml在50℃氮气流下吹干8.12加入2.8mL样品稀释液,涡旋20s，混匀后取100ml用于分析牛奶前处理方法8.13取1ml牛奶样品到5ml聚苯乙烯离心管中；加入4ml样品稀释液，混匀后取100ml用于分析奶粉前处理方法8.14准确称取0.3g奶粉样品到7ml的聚苯乙烯离心管中；加入2mlPBS溶液，2ml正己烷，震荡混匀8.154000r/min以上离心5min，去除有机层和中间层，取下层溶液100ml到400ml样品稀释液8.16混匀后取100ml用于分析9酶免分析步骤9.1实验须知9.1.1实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温（25±2℃），时间约2小时。回温至室温（25±2℃）后再取出微孔条，多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存注：一定保证回温充分，否则影响检测的极ng确度和准确度。9.1.2使用后请立即将试剂放回2~8℃保存9.1.3请不要改变分析程序9.1.4请使用极ng确的微量移液器9.1.5操作一旦开始，请不要中断任何程序9.1.6ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序，请严格按照要求操作9.1.7为避免交叉污染，每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样9.1.8加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面9.2分析步骤9.2.1预先进行编号，标记B0、标准品和样品的位置，推荐进行双孔检测9.2.2取所需数量的微孔（微孔条可拆），将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存9.2.3样品稀释液、浓缩洗涤液（20×）稀释成工作液（蒸馏水或去离子水稀释）9.2.4在B0孔中加入50l0.0ppb标准品溶液9.2.5在各标准孔中加入50μl的标准品溶液9.2.6在各样品孔中加入50l样品溶液9.2.7在所有孔中加入50l的抗呕吐毒素（vomitoxin）抗体酶结合物9.2.8轻轻晃动反应板几秒钟。9.337℃温浴30min（温浴过程中不时轻拍反应板，可以减少双孔误差）9.3.1甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板5次，Z后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。9.4反应9.4.1洗涤程序完成后，立即用微量移液器在每个微孔中先加入50l显色液A，再加50l显色液B；轻微晃动反应板使之彻底混匀9.4.237℃温浴10min9.4.3每孔中加入50l终止液，混匀9.4.4在450nm下检测吸光度，结果在5min内读取。10结果计算10.1定量分析10.1.1所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值（B）除以**个标准（0标准）的吸光度值（B0）再乘以1**%，即百分吸光度值。B标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B00ppb标准溶液的平均吸光度值10.1.2以呕吐毒素（vomitoxin）浓度的对数值为X轴，百分吸光度值为Y轴，绘制标准曲线图。根据样品百分吸光度值，可从曲线上得到对应点的横坐标，即为呕吐毒素（vomitoxin）浓度的对数值，求得反对数即为测定液中呕吐毒素（vomitoxin）浓度C（ppb）10.1.3由于样品经过了预先稀释，因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。10.2半定量测定10.1.1目测半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品吸光度值的高低比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。10.1.2仪器半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品颜色深浅比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。11特异性物质交叉反应呕吐毒素（vomitoxin）1**%12试剂盒参数本试剂盒检测下限为0.1ppbB0吸光度**值应大于1.0试剂盒吸光度板内误差小于8％，板间误差小于15％。用本说明书提供的组织样本提取方法回收率大于80％。13标准曲线模式（仅供参考）试剂盒提供的标准曲线范围为0.1ppb~8.1ppb。14分析限制本试剂盒检测为阳性的样品应该用另一种方法如HPLC或GC/MS加以确证。[详细]

  2024-09-28 06:59

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• 呕吐毒素（vomitoxin）快速检测ELISA试剂盒操作流程图

  呕吐毒素（vomitoxin）快速检测ELISA试剂盒操作流程图[详细]

  2015-04-23 00:00

  标准

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• 呕吐毒素ELISA检测试剂盒

  呕吐毒素ELISA检测试剂盒[详细]

  2024-09-28 13:20

  专利

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• 呕吐毒素免疫亲和柱说明书

  资料名称：呕吐毒素免疫亲和柱说明书 适用产品：呕吐毒素免疫亲和柱 正文语言：中文 文件编号：BP016-2 文件版本：2.0 文件格式：PDF 文件大小：0. 8MB 内容简介：呕吐毒素免疫亲和柱适用于基质复杂、限量要求低的样品中呕吐毒素检测的净化。可以进行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA等定量分析，适合谷物、食品和饲料等样品。[详细]

  2024-10-06 01:43

  其它

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• 呕吐毒素免疫亲和柱

  呕吐毒素免疫亲和柱[详细]

  2012-08-23 00:00

  期刊论文

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• 呕吐毒素快速检测卡

  订货号：R5904产品名称：呕吐毒素快速检测卡产品英文名称：QUICKDON包装：25次产品介绍：请下载产品说明：呕吐毒素快速检测卡，免疫色谱法，5分钟出结果，检测限1ppm可以调节稀释比例，改变检测限[详细]

  2018-09-15 10:00

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• 黄曲霉毒素（AF）酶联免疫分析ELISA试剂盒

  黄曲霉毒素（AF）酶联免疫分析ELISA试剂盒试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1使用目的：本试剂盒用于检测饲料和谷物中黄曲霉毒素（AF）含量。2实验原理本试剂盒采用直接竞争ELISA方法，在微孔板包被有黄曲霉毒素（AF）偶联抗原，加入黄曲霉毒素（AF）标准品或样品，游离黄曲霉毒素（AF）与微孔条上预包被的黄曲霉毒素（AF）偶联抗原互相竞争抗黄曲霉毒素（AF）抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中黄曲霉毒素（AF）含量成反比，通过标准曲线计算样品中黄曲霉毒素（AF）的含量。3试剂盒组成3.1预包被的黄曲霉毒素（AF）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。3.2黄曲霉毒素（AF）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ng/ml，0.1ng/ml,0.3ng/ml,0.9ng/ml,2.7ng/ml,8.1ng/ml。3.3抗黄曲霉毒素（AF）抗体酶结合物：1瓶（6ml）。3.4显色液A：1瓶（6ml）。3.5显色液B：1瓶（6ml）。3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。3.7样本稀释液：1瓶（10×,6ml），用于样品稀释用。3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。3.9说明书一份。4需要而未提供的材料4.1设备4.1.1波长450nm酶标仪。4.1.2粉碎机。4.1.3量筒。4.1.4振荡器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相当的滤纸。4.1.7微量移液器。4.2试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。4.2.2甲醇。5贮存5.1试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻5.2未用完的微孔板应该密封干燥保存6注意事项6.1使用试剂盒前请仔细阅读说明书。6.2不要使用过期试剂盒。26.3试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。6.4标准品中含有黄曲霉毒素（AF），使用时应特别注意，操作时应带手套。6.5终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6.6不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。6.7不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。[详细]

  2018-09-19 10:01

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• 呕吐毒素（ （ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇） elisa说明书-beacon

  适用Beacon脱氧雪腐镰刀菌烯醇检测试剂盒利用竞争酶联免疫吸附原理定量检测小麦，大麦，麦芽，玉米及燕麦中的呕吐毒素。检测原理Beacon脱氧雪腐镰刀菌烯醇检测试剂盒是基于竞争性酶联免疫吸附检测法。用水震荡萃取已粉碎的样品中的DON,过滤水相萃取物，然后进行免疫学检测。加入呕吐毒素的酶标记物到已加有标准或样品的测试孔中，抗体被加入后反应开始，样品及酶标记物竞争结合连接在微孔上的抗体，10分钟培养后，倒掉孔中的溶液，洗掉微孔中未的结合呕吐毒素和酶标记物。加入无色的底物溶液，孵育5分钟，所有结合的酶标记物使底物转化成蓝色物质。加入停止液然后读取吸光度值，未知浓度样品与标准吸光度值进行比较，就可以得到样品的呕吐毒素浓度。特异性Beacon脱氧雪腐镰刀菌烯醇检测试剂盒对于脱氧雪腐镰刀菌烯醇有很强的特异性，以下表格展示了与其他形式的交叉反应率。[详细]

  2018-12-15 10:00

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• 玉米、酱油中呕吐毒素的免疫亲和柱方法（Copure® 呕吐毒素免疫 亲和柱）

  玉米、酱油中呕吐毒素的免疫亲和柱方法（Copure® 呕吐毒素免疫 亲和柱）[详细]

  2024-09-14 05:36

  应用文章

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• 酶标仪检测饲料中呕吐毒素的方案！

  酶标仪检测饲料中呕吐毒素是基于竞争性酶联免疫吸附检测法。用水震荡萃取粉碎样品中的DON,过滤水相萃取物，然后进行免疫学检测。加入呕吐毒素的酶标记物到已加有标准或样品的测试孔中，抗体被加入后反应开始，样品及酶标记物竞争结合连接在微孔上的抗体，10分钟培养后，倒掉孔中的溶液，洗掉微孔中未结合的呕吐毒素和酶标记物。加入无色的底物溶液，培养5分钟，所有结合的酶标记物使底物转化成蓝色物质。加入停止液然后读取吸光度值，未知浓度样品与标准吸光度值进行比较，就可以得到样品的呕吐毒素浓度。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 呕吐毒素的高效液相色谱HPLC检测方案

  呕吐毒素的GX液相色谱HPLC检测方案[详细]

  2024-10-09 03:18

  实验操作

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• 大肠杆菌不耐热肠毒素（LT）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

  大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T10pg/ml-240pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定幼儿食品样本中大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)含量。大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)酶联免疫分析试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)水平。用纯化的大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)，再与HRP标记的大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)浓度。试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)酶联免疫分析试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-09-27 10:00

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• 魏氏梭菌毒素酶联免疫分析试剂盒使用说明书

  魏氏梭菌毒素酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。96T魏氏梭菌毒素酶联免疫分析使用目的：本试剂盒用于测定相关样本中魏氏梭菌毒素表达。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中魏氏梭菌毒素表达。用纯化的魏氏梭菌毒素抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中魏氏梭菌毒素相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的魏氏梭菌毒素抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中魏氏梭菌毒素的存在与否。标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。魏氏梭菌毒素酶联免疫分析计算和结果判定：试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10临界值（CUTOFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定：样品OD值<临界值（CUTOFF）者为魏氏梭菌毒素阴性阳性判定：样品OD值≥临界值（CUTOFF）者为魏氏梭菌毒素阳性。注意事项1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5．底物请避光保存。6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。魏氏梭菌毒素酶联免疫分析保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-04 10:00

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• 呕吐毒素残留快速检测试纸条的研制

  呕吐毒素残留快速检测试纸条的研制[详细]

  2015-12-22 00:00

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• 拟除虫菊酯酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书

  1使用目的：本试剂盒用于蔬菜、水果、相应食物、水及中毒残留物中拟除虫菊酯(Pyrethroids)残留的定量检测。2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有拟除虫菊酯(Pyrethroids)偶联抗原，加入拟除虫菊酯(Pyrethroids)标准品或样品，游离拟除虫菊酯(Pyrethroids)与微孔条上预包被的拟除虫菊酯(Pyrethroids)偶联抗原互相竞争抗拟除虫菊酯(Pyrethroids)抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中拟除虫菊酯(Pyrethroids)含量成反比，通过标准曲线计算样品中拟除虫菊酯(Pyrethroids)的含量。3试剂盒组成3.1预包被的拟除虫菊酯(Pyrethroids)偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。3.2拟除虫菊酯(Pyrethroids)标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ng/ml,0.025ng/ml,0.1ng/ml,0.25ng/ml,1ng/ml,4ng/ml。3.3抗拟除虫菊酯(Pyrethroids)抗体酶结合物：1瓶（6ml）。3.4显色液A：1瓶（6ml）。3.5显色液B：1瓶（6ml）。3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。3.7样本稀释液：1瓶（10×,6ml），用于样品稀释用。3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。3.9说明书一份。4需要而未提供的材料4.1设备4.1.1波长450nm酶标仪。4.1.2粉碎机。4.1.3量筒。4.1.4振荡器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相当的滤纸。4.1.7微量移液器。4.2试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。4.2.2甲醇。5贮存5.1试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻5.2未用完的微孔板应该密封干燥保存6注意事项6.1使用试剂盒前请仔细阅读说明书。6.2不要使用过期试剂盒。6.3试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。6.4标准品中含有拟除虫菊酯(Pyrethroids)，使用时应特别注意，操作时应带手套。6.5终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6.6不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。6.7不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。6.8稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果6.9混合试剂时应避免起泡。7工作液准备7.1拟除虫菊酯(Pyrethroids)标准品溶液：0ng/ml,0.025ng/ml,0.1ng/ml,0.25ng/ml,1ng/ml,4ng/ml7.2浓缩洗涤液：用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用7.3样本稀释液：用蒸馏水按1:10(1+9)稀释备用7.3显色剂：已备用，避免光线直照7.4反应终止液：已备用8样品处理程序（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）8.1取10g粉碎的样品，加20ml70%甲醇溶液8.2QL振荡3分钟8.3用WhatmanNo1滤纸过滤8.4取25l处理后的样品，加入25l样本稀释液于反应孔中（样本稀释倍数为2）9酶免分析步骤9.1实验须知9.1.1实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温（25±2℃），时间约2小时。回温至室温（25±2℃）后再取出微孔条，多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存注：一定保证回温充分，否则影响检测的极ng确度和准确度。9.1.2使用后请立即将试剂放回2~8℃保存9.1.3请不要改变分析程序9.1.4请使用极ng确的微量移液器9.1.5操作一旦开始，请不要中断任何程序9.1.6ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序，请严格按照要求操作9.1.7为避免交叉污染，每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样9.1.8加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面9.2分析步骤9.2.1预先进行编号，标记B0、标准品和样品的位置，推荐进行双孔检测9.2.2取所需数量的微孔（微孔条可拆），将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存9.2.3样品稀释液（10×）、浓缩洗涤液（20×）稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)9.2.4在B0孔中加入50l0.0ng/ml标准品溶液9.2.5在各标准孔中加入50l的标准品溶液9.2.6在各样品孔中加入50l样品溶液9.2.7在所有孔中加入50l的抗拟除虫菊酯(Pyrethroids)抗体酶结合物9.2.8轻轻晃动反应板几秒钟。9.337℃温浴30min（温浴过程中不时轻拍反应板，可以减少双孔误差）9.3.1甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板5次，Z后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。9.4反应9.4.1洗涤程序完成后，立即用微量移液器在每个微孔中先加入50l显色液A，再加50l显色液B；轻微晃动反应板使之彻底混匀9.4.237℃温浴10min9.4.3每孔中加入50l终止液，混匀9.4.4在450nm下检测吸光度，结果在5min内读取。10结果计算10.1定量分析10.1.1所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值（B）除以**个标准（0标准）的吸光度值（B0）再乘以1**%，即百分吸光度值。B标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B00g/L标准溶液的平均吸光度值10.1.2以拟除虫菊酯(Pyrethroids)浓度的对数值为X轴，百分吸光度值为Y轴，绘制标准曲线图。根据样品百分吸光度值，可从曲线上得到对应点的横坐标，即为拟除虫菊酯(Pyrethroids)浓度的对数值，求得反对数即为测定液中拟除虫菊酯(Pyrethroids)浓度C（ng/ml）10.1.3由于样品经过了预先稀释，因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。10.2半定量测定10.1.1目测半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品吸光度值的高低比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。10.1.2仪器半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品颜色深浅比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。11特异性物质交叉反应拟除虫菊酯(Pyrethroids)1**%12试剂盒参数本试剂盒检测下限为0.005ng/mlB0吸光度**值应大于1.0试剂盒吸光度板内误差小于8％，板间误差小于15％。用本说明书提供的组织样本提取方法回收率大于80％。13标准曲线模式（仅供参考）试剂盒提供的标准曲线范围为0ng/ml~4ng/ml。414分析限制本试剂盒检测为阳性的样品应该用另一种方法如HPLC或GC/MS加以确证。[详细]

  2024-09-28 06:59

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• 应用方案 | 小麦粉中呕吐毒素检测的固相萃取方法

  应用方案 | 小麦粉中呕吐毒素检测的固相萃取方法[详细]

  2024-09-14 19:11

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• 粮油中呕吐毒素检测的固相萃取 方法（Copure® HLB）

  粮油中呕吐毒素检测的固相萃取 方法（Copure® HLB）[详细]

  2024-09-29 05:26

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• 拟除虫菊酯酶联免疫分析（ELISA）

  拟除虫菊酯酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1使用目的：本试剂盒用于蔬菜、水果、相应食物、水及中毒残留物中拟除虫菊酯（Pyrethroids）残的定量检测。2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有拟除虫菊酯（Pyrethroids）偶联抗原，加入拟除虫菊酯（Pyrethroids）标准品或样品，游离拟除虫菊酯（Pyrethroids）与微孔条上预包被的拟除虫菊酯（Pyrethroids）偶联抗原互相竞争抗拟除虫菊酯（Pyrethroids）抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中拟除虫菊酯（Pyrethroids）含量成反比，通过标准曲线计算样品中拟除虫菊（Pyrethroids）的含量。3试剂盒组成3.1预包被的拟除虫菊酯（Pyrethroids）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。3.2拟除虫菊酯（Pyrethroids）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ng/ml,0.025ng/ml,0.1ng/ml,0.25ng/ml,1ng/ml,4ng/ml。3.3抗拟除虫菊酯（Pyrethroids）抗体酶结合物：1瓶（6ml）。3.4显色液A：1瓶（6ml）。3.5显色液B：1瓶（6ml）。3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。3.7样本稀释液：1瓶（10×,6ml），用于样品稀释用。3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。3.9说明书一份。[详细]

  2018-09-19 10:01

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• 对硫磷酶联免疫分析（ELISA）

  对硫磷酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1使用目的：本试剂盒用于饲料、，谷类、蔬菜，水果，肉类及水等样本中对硫磷（parathion）残留的定量检测。2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有对硫磷（parathion）偶联抗原，加入对硫磷（parathion）标准品或样品，游离对硫磷（parathion）与微孔条上预包被的对硫磷（parathion）偶联抗原互相竞争抗对硫磷（parathion）抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中对硫（parathion）含量成反比，通过标准曲线计算样品中对硫磷（parathion）的含量。[详细]

  2018-09-19 10:01

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