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培养基的制备及灭菌
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培养基的制备及灭菌
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培养基的制备及灭菌- 培养基的制备及灭菌[详细]
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2024-09-14 09:59
实验操作
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- 培养基的灭菌及准备
- 培养基的灭菌及准备B．1大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）培养基的灭菌及准备B．1.1培养基采用大豆酪蛋白琼脂培养基，可以按以下制备，也可使用按该生产的符合要求的脱水培养基。配制后按培养基规定的经验证合格的灭菌程序灭菌。B．1.2大豆酪蛋白琼脂培养基配方酪蛋白胰酶消化物…………………………………………………………………15g大豆粉木瓜蛋白酶消化物…………………………………………………………5g氯化钠………………………………………………………………………………5g琼脂…………………………………………………………………………………15g纯化水……………………………………………………………………………1000mL取上述成分除琼脂，混合，微热溶解，调节pH值使灭菌后为7.3±0.2，加入琼脂，加热融化后，分装，灭菌，冷却至约60℃，在无菌操作要求下倾注约20mL至无菌平皿（φ90mm1））中。加盖后在室温放至凝固。B．2沙氏琼脂培养基（SDA）培养基的灭菌及准备葡萄糖………………………………………………………………………………40g酪蛋白胰酶消化物、动物组织的胃酶消化物等量混合…………………………10g琼脂…………………………………………………………………………………15g纯化水……………………………………………………………………………1000mL取上述成分除琼脂，混合，微热溶解，调节pH值使灭菌后为5.6±0.2，加入琼脂，加热融化后，分装，灭菌，冷却至约60℃，在无菌操作要求下倾注约20mL至无菌平皿（φ90mm1））中。加盖后在室温放至凝固。B．3培养基平皿培养及保存制备好的培养基平皿宜在2℃~8℃保存，一般以一周为宜或按厂商提供的标准执行。采用适宜方法在平皿上做好培养基的名称、制备日期记录的标记。1）如果用其他规格的平皿，可适当增减培养基的量，使之在平皿中形成至少2mm厚的琼脂层。[详细]
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2018-09-28 10:00
产品样册
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常用培养基制备、灭菌与消毒- 常用培养基制备、灭菌与消毒 制备、灭菌与消毒： 一、实验目的 了解培养基的配制原理;掌握配制培养基的一般方法和步骤;了解常见灭菌、清毒基本原理及方法;掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤CJ的操作方法。 二、实验原理 培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用Z广泛和Z普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的Z基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。 干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。 三、试剂与器材 1.器材 试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、培养基、分装器、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH度纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、注射器、微孔滤膜过滤器、镊子等。 2.试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂 四、实验内容 1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4.过滤CJ：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 五、关键步骤及注意事项 1.要严格按配方配制。 2.调pH不要过头。 3.干热灭菌要注意物品不要堆放过紧，注意温度的时间控制，70C以下放物、取物。 4.高压灭菌要注意物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零取物。 5.过滤CJ要注意各部件灭菌，压滤时，压力要适当，不可太猛太快，滤膜要注意清洗保存。[详细]
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2018-09-27 10:00
产品样册
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- 制备培养基的小技巧
- 制备培养基的小技巧1.培养基可按制备也可使用按生产的符合规定的商品化成品培养基，脱水培养基除附有和使用说明外还应注明有效期、贮存条件、适用性试验的质控菌株和用途。配制时应按使用说明上的要求操作，受潮结块不能使用，以确保培养基的质量符合要求。2.配制培养基使用的容器应是玻璃器皿或搪瓷器皿如搪瓷筒、量筒、漏斗、三角烧瓶、刻度吸管、试管、培养皿等。使用的器皿应洗净，用蒸馏水冲净，烘干后方可使用。禁用金属容器如铁、铜、铝容器，避免金属离子与培养基成分结合，生成有害物质，影响细菌生长。3.培养基若于非洁净的玻璃器皿中制备，可能导致YJ物质进入培养基中。YJ物质可能是残留的玻璃器皿清洁用的清洁剂或之前玻璃器皿所盛装的物质。因此。应使用纯化水完全冲洗玻璃器皿以消除清洁剂和外来物质的残留，并进行清除污物的确认。4.配制培养基Z常用的溶剂是纯化水，特殊情况下需要用去离子水和蒸馏水，对热敏感的培养基应用灭菌水和无菌容器配制与分装，配制时若需加热助溶应注意温度不要过高。5.对配制培养基的过程作详细的记录，记录内容包括：配制日期、培养基名称、成分、配制数量、质量监控结果等进行全面详细记录。友情推荐：上海劲马实验设备有限公司上海恒远生物科技有限公司[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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- 牛肉膏蛋白胨培养基的灭菌八步骤
- 牛肉膏蛋白胨培养基的灭菌八步骤[详细]
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2015-04-29 00:00
操作手册
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Masterclave——培养基自动制备仪- Masterclave——培养基自动制备仪[详细]
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2016-06-03 00:00
标准
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- 实验室自己动手制备培养基的方法要求
- 实验室自己动手制备培养基的方法要求[详细]
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2015-06-04 00:00
安装说明
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- 全自动培养基制备仪产品样册
- 全自动培养基制备仪产品样册[详细]
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2016-10-20 09:17
课件
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- 超赞超全的培养基制备流程在这里
- 培养基是我公司的主要产品线之一，在前面的技术分享内容中，相关培养基的制备方法、要求、保存、种类等也为大家介绍过不少。在今天的内容中，上海沪鼎生物公司为您带来了Zxin的培养基制备流程，可以表示为：称量药品→溶解→调节PH值→溶化琼脂→过滤分装→包扎标记→灭菌→摆斜面或倒平板。超赞超全的培养基制备流程在这里！1.称量药品：根据培养基配方依次准确称取各种药品，放入适当大小的烧杯中，琼脂不要加入。蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速。2.溶解：用量筒取一定量(约占总量的1/2)蒸馏水倒入盛有药品的烧杯中，在放有石棉网的电炉上小火加热，并用玻璃棒搅拌，以防液体溢出。待各种药品完全溶解后，停止加热，补足水分。如果配方中有淀粉，则先将淀粉用少量冷水调成糊状，并在火上加热搅拌，然后加足水分及其他原料，待完全溶化后，补足水分。3.调节PH值：根据培养基对PH值的要求，用50g/LNaOH或5%(体积分数)HCl溶液调至所需的PH值。测定PH值可用PH试纸或酸度计等。4.溶化琼脂：固体或半固体培养基须加入一定量的琼脂，将盛有培养基的器皿置于电炉上一面搅拌一面加热，直至琼脂完全溶化后才能停止搅拌，并补足水分(水需预热)。注意控制火力不要使培养基溢出或烧焦。5.过滤分装：先将过滤分装装置安装好。如果是液体培养基，玻璃漏斗中放一层滤纸；如果是固体或半固体培养基，则须在漏斗中放多层纱布，或两层纱布夹一层薄薄的脱脂棉趁热进行过滤。过滤后立即进行分装。分装时注意不要使培养基沾染在瓶口或管口，以免浸湿棉塞，引起污染。液体分装高度以试管高度的1/4左右为宜。固体分装量为管高的1/5，半固体分装量一般以试管高度的1/3为宜，分装三角瓶，以不超过三角瓶容积的一半为宜。6.包扎标记：培养基分装后加好棉塞或试管帽，再包上一层防潮纸，用棉绳系好。在包装纸上标明培养基名称、制备组别和实验者姓名、日期等。7.灭菌：上述培养基应按培养基配方中规定的条件及时进行灭菌。普通培养基为121℃，20min，以保证灭菌效果和不损伤培养基的有效成分。如需要作斜面固体培养基，则灭菌后立即摆放成斜面。斜面长度一般以不超过试管长度的1/2为宜；半固体培养基灭菌后，垂直冷凝成半固体深层琼脂。[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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- 德国Systec全自动培养基制备分装系统
- 德国Systec全自动培养基制备分装系统[详细]
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2014-01-10 00:00
实验操作
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- 样品的采取及制备
- 样品的采取及制备[详细]
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2007-01-14 00:00
期刊论文
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- 高压灭菌器做九管法灭菌时如何避免气泡残留在培养基
- 大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一。而检测食品中大肠菌群的方法中，国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准，国家标准的三步九管法，即乳糖发酵试验、分离培养、证实试验。由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，即：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。1.乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。2.分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。3.证实试验：挑取平板上的可疑菌落，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。在乳糖发酵试验工作中，经常可以看到在发酵倒管内极微少的气泡（有时比小米粒还小），有时可以遇到在初发酵时产酸或沿管壁有缓缓上浮的小气泡。实验表明大肠菌群的产气量，多者可以使发酵倒管全部充满气体，少者可以产生比小米粒还小的气泡。在试验过程中，会用到高压灭菌器来进行灭菌，九管法灭菌时，大肠菌在高温下会产生气泡，如果用的是ALP高压力灭菌锅，可以通过进入工程师菜单，调整在升温过程中的排气时间，可以有效的排走残留在培养基中的气泡。[详细]
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2024-09-11 19:53
产品样册
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- 德国Systec全自动培养基制备分装系统产品样册
- 德国Systec全自动培养基制备分装系统产品样册[详细]
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2016-10-20 10:18
标准
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- 德国systec培养基自动制备分装系统产品样册
- 德国systec培养基自动制备分装系统产品样册[详细]
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2024-09-14 04:14
实验操作
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- 金属分离柱的制备及应用
- 金属分离柱的制备及应用[详细]
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2012-02-07 00:00
实验操作
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- 铜及铜合金的金相制备
- 铜及铜合金的金相制备[详细]
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2008-08-19 00:00
期刊论文
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- 超纯水机的制备工艺及使用说明
- 超纯水机的制备工艺及使用说明[详细]
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2012-06-28 00:00
标准
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- 铝及铝合金的金相制备
- 铝及铝合金的金相制备[详细]
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2024-09-28 17:30
课件
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- 免疫核糖核酸的制备及检定
- 免疫核糖核酸的制备及检定[详细]
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2024-09-28 07:01
产品样册
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- 抗体催化的化学反应及制备
- 抗体催化的化学反应：由抗体催化的化学反应特异性高于酶，但催化速率低于常规的酶，只有l010倍。但有一些未发现催化剂的反应，如DielsAlder反应也能被抗体催化。常规酶一般不能催化胺键水解，抗体酶能使胺键水解的速度增加25万倍。讫今为止，已发现和证明的由抗体催化的化学反应不下40种。 抗体催化的制备：抗体酶是抗原决定簇处于转换态结构的抗体。因为转换态分子极不稳定无法制备抗体，所以催化性抗体的获得主要是通过设计稳定的转换态的类似物作为半抗原，与载体蛋白交联后，免疫动物，获得针对半抗原的抗体，从中筛选具有催化活性的抗体。筛选催化性单克隆抗体所用的ELISA与筛选一般抗体的方法不完全一样，应根据催化反应的特点而进行适当的修改。经典的方法是先筛选出与底物或半抗原结合的抗体，然后从中再筛选出有催化活力的抗体，这种方法费时费力。利用催化性抗体对底物的催化活性，对底物进行适当修饰，使催化反应的产物可直接表现抗体的催化活性，这样可以简化检测步骤。 转换态类似物半抗原的设计，必须了解催化反应的转换态模型的结构特点。催化抗体的抗原结合位点上与转换态互补的某些催化基团的形成，能稳定转换态分子。此外有人把单克隆抗体分子用化学修饰方法引入一些活性基团，提高催化性抗体的催化与亲和效率。应用噬菌体抗体文库也可以筛选催化性抗体，可省去制备转换态类似物的复杂过程，直接用底物从文库中筛选有催化活性的抗体片段。如用半抗原免疫后制备的文库或文库经过多次混杂重组，则可以得到更高的亲和力的催化性抗体。抗独特型抗体也用于催化性抗体的制备，用酶作为抗原免疫小鼠获得能够封闭酶活性位点的单克隆抗体，将这个抗体用蛋白酶除去Fc片段，用Fab免疫其他品系的小鼠或家兔，得到的抗体具有相应的酶催化活性。[详细]
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2024-09-28 07:04
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