细菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量检测试剂盒说明书

本文由 上海科学仪器有限公司 整理汇编

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• 细菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量检测试剂盒说明书

  细菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途细菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过底物偶氮酪蛋白受到蛋白酶水解，产生橘红色产物的吸光峰值的变化，即采用比色法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。其适用于各种细菌细胞裂解液以及培养上清样品蛋白酶的总活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景蛋白酶（protease）又称为肽酶（peptidase）或蛋白质酶（proteinase），是一类蛋白水解的酶，属于水解酶（hydrolase）家属中一员，存在于所有生物体内。通过肽键的水解，进行蛋白质的分解代谢，参与体内血液凝结、补体系统、凋亡、细胞生长和分化等一系列生理活动。蛋白酶基本分成6类，包括丝氨酸（serine）、苏氨酸（threonine）、半胱氨酸（cysteine）、谷氨酸（glutamate）、天冬氨酸（aspartate）、金属（metalloprotease）蛋白酶等；也可以分成酸性、中性和碱性蛋白酶等；还可以分成内切肽酶，例如胰蛋白酶（trypsin），和外切肽酶，例如羧基肽酶A（carboxypeptidase）。细菌蛋白酶与碳和氮循环有关；作为外毒素（exotoxin），也是细菌致病的毒力（virulence）因子；同时细菌蛋白酶可以应用于食品、制药、皮革、诊断、水处理、银回收和洁净剂工业等。同时据此用以识别革蓝氏阴性细菌，例如枯草芽孢杆菌（Bac.Subtilis）等。基于底物偶氮酪蛋白（azocasein或sulfanilamideazocasein），在细菌蛋白酶的催化水解下，产生橘红色产物，通过其吸收峰值的变化（440nm波长），来定量分析蛋白酶的总活性。其反应系统为：产品内容裂解液（ReagentA）毫升反应液（ReagentB）毫升终止液（ReagentC）毫升中和液（ReagentD）毫升阴性液（ReagentE）微升产品说明书1份保存方式保存反应液（ReagentB）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；终止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品操作的容器微型台式离心机：用于样品制备恒温水槽：用于孵育反应比色皿：用于比色的容器分光光度仪：用于比色分析实验步骤样品准备准备好500微升待测细菌（OD600＝0.4至0.8，即1至2X107细胞/毫升）转移到到1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为1000g（或3500RPM，例如EPPENDORF5415）小心抽去上清液加入xx微升裂解液（ReagentA），充分混匀QL涡旋震荡15秒置于冰槽里15分钟放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－30030.1）即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作测定准备准备好待测样品（例如细菌裂解萃取液或培养上清等），置于冰槽里设定好分光光度仪（温度为37℃）：波长440nm，并置零实验开始前，将反应液（ReagentB）置于65℃恒温水槽孵育20分钟后使用三、背景测定移取xx微升反应液（ReagentB）到新的1.5毫升离心管加入xx微升阴性液（ReagentE）上下倾倒数次，混匀在37℃温度下孵育30分钟加入xx微升终止液（ReagentC）涡旋震荡5秒在冰槽里孵育15分钟即刻放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升离心管加入xx微升中和液（ReagentD），混匀转移到比色皿里即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照样品活性测定移取xx微升反应液（ReagentB）到新的1.5毫升离心管加入100微升待测样品（蛋白总量100微克）（注意：样品需澄清）上下倾倒数次，混匀在37℃温度下孵育30分钟加入xx微升终止液（ReagentC）涡旋震荡5秒在冰槽里孵育15分钟即刻放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升离心管（注意：沉淀物为橘红色）加入xx微升中和液（ReagentD），混匀转移到比色皿里即刻放进分光光度仪检测，此为样品读数计算样品活性注意事项本产品为20次操作操作时，须戴手套终止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蚀性，注意操作安全系统检测时，背景测定只需一次样品须澄清，至关重要比色测定后，比色皿须清洗彻底建议待测样本的蛋白浓度为100微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒30030.1）如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度蛋白酶活性单位浓度定义：在37℃下，pH7.5的情况下，每单位酶在单位时间内（每分钟）产生0.01吸光值的升高变化本公司提供系列细菌生理生化检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]

  2018-11-19 10:00

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• 细菌脂肪酶（LIPASE）活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途细菌脂肪酶（LIPASE）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过底物三丁酸二巯基丙醇受到脂肪酶水解，释放出巯基基团，使用Ellman试剂，产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化，即采用比色法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心改良、成功实验证明的。其适用于各种细菌细胞裂解液样品脂肪酶的总活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景脂肪酶（lipase；EC3.1.1.3）是可溶性酶蛋白分子，催化不溶性脂质分子的酯键（esterbond）的水解。许多细菌产生细胞外酶（exoenzyme），称为水解酶（hydrolase），在水分子的参与下，催化底物的水解，成为细菌生理特征之一。其中脂肪酶（Lipase），裂解脂肪分子，例如甘油三酯（triglyceride；TAG）、脂肪、油等，产生1个分子甘油（glycerol）和3个分子脂肪酸分子（fattyacid），由此用于合成细菌脂质和其它细胞成分，以及氧化产生能量。食品工业中，常用于食品发酵（rancidity），例如人造奶油（margarine）等。甚至用于厨房清洁剂和替代能源的生物催化作用。同时据此用以识别革蓝氏阴性细菌，例如枯草芽孢杆菌（Bac.Subtilis）等。细菌脂肪酶在水分子的参与下，催化三丁酸二巯基丙醇（dimercaptopropanoltributyrate；DMPTB或BALB）的水解，产生二巯基丙醇（dimercaptopropanol；DMP），并释放出巯基基团（－SH），与Ellman试剂5，5-二硫基-双（2-硝基苯甲酸）[5，5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反应后，产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通过其吸收峰值的变化（412nm波长），来定量分析脂肪酶的活性。脂肪酶反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细菌异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途细菌异柠檬酸脱氢酶（ISOCITRATEDEHYDROGENASE）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸（NADP）还原后峰值的变化，即采用比色法来测定细菌裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细菌细胞裂解悬液样品异柠檬酸脱氢酶的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景异柠檬酸脱氢酶（isocitratedehydrogenase；IDH；EC1.1.1.42）是三羧酸循环（citricacidcycle）或克雷布斯循环（Krehescycle）中的酶之一，存在于所有生物体内。细菌异柠檬酸脱氢酶有2种同工酶：同源双体，40至45Kd分子量；单体，80至100Kd分子量。在细菌体内，氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADP）依赖性异柠檬酸脱氢酶获得辅酶NADP和辅助因子锰或镁离子（Mn）的推动，脱去底物异柠檬酸的氢和二氧化碳（氧化性脱羧基作用），转化为α-酮戊二酸（α-ketoglutarate），同时生成还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADPH）。一旦磷酸化或在乙酸环境中，以及有限的葡萄糖条件下，异柠檬酸脱氢酶则失活，从而控制三羧酸循环和乙醛酸旁路（glyoxylatebypass）之间碳的流动。基于异柠檬酸脱氢酶的NADP依赖性，和作用后所产生的NADPH，通过分光光度仪的峰值变化（340nm波长），来定量分析异柠檬酸脱氢酶的活性。异柠檬酸脱氢酶反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细菌琥珀酸脱氢酶（SDH）活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途细菌琥珀酸脱氢酶（SDH）活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成电子受体染料，通过反应系统测定染料还原后峰值的降低，即采用比色法测算样品中单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细菌菌株裂解悬液和膜蛋白样品琥珀酸脱氢酶的特异性活性检测。用于衰老、能量代谢、蛋白组学、发酵分析等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景琥珀酸脱氢酶（succinatedehydrogenase；SDH；EC1.3.99.1）是三羧酸循环（tricarboxylicacidcycle；TCA）或Krebs循环中与细胞线粒体膜相关的重要元素，位于线粒体内膜，参与细胞呼吸链。细菌琥珀酸脱氢酶，又称为SdhCDAB，为膜结合性蛋白，分为周边（peripheral）和跨膜（transmembrane）部分，其中周边亲水部分由SdhA和SdhB亚体组成：SdhA亚体含有黄素蛋白（flavoprotein），是琥珀酸的活性部位；SdhB含有铁硫蛋白（iron-sulfurprotein），进行电子传递；跨膜疏水部分由SdhC和SdhD亚体组成：SdhC含有亚铁血红素-B（Heme-B），SdhD含有泛醌（ubiquinone）结合部位（Q部位）。其作用在于参与三羧酸循环（TCAcycle）和呼吸链活动。琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸（succinate）的氧化反应，产生延胡索酸（furmarate），通过黄素腺嘌呤二核苷酸（FlavinAdenineDinucleotide；FAD）传递电子。基于琥珀酸脱氢酶的反应原理，使用人工电子受体染料二氯靛酚钠（2,6-Dichloroindophenolsodium；DCIP），接受来自还原型黄素腺嘌呤二核苷酸（ReducedflavinAdenineDinucleotide；FADH2）的电子，而被还原，在分光光度仪下，其吸光值（600nm波长）的变化，来测算琥珀酸脱氢酶的活性。其反应方式为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细菌异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

  主要用途细菌异柠檬酸脱氢酶（ISOCITRATEDEHYDROGENASE）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸（NADP）还原后峰值的变化，即采用比色法来测定细菌裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细菌细胞裂解悬液样品异柠檬酸脱氢酶的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景异柠檬酸脱氢酶（isocitratedehydrogenase；IDH；EC1.1.1.42）是三羧酸循环（citricacidcycle）或克雷布斯循环（Krehescycle）中的酶之一，存在于所有生物体内。细菌异柠檬酸脱氢酶有2种同工酶：同源双体，40至45Kd分子量；单体，80至100Kd分子量。在细菌体内，氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADP）依赖性异柠檬酸脱氢酶获得辅酶NADP和辅助因子锰或镁离子（Mn）的推动，脱去底物异柠檬酸的氢和二氧化碳（氧化性脱羧基作用），转化为α-酮戊二酸（α-ketoglutarate），同时生成还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADPH）。一旦磷酸化或在乙酸环境中，以及有限的葡萄糖条件下，异柠檬酸脱氢酶则失活，从而控制三羧酸循环和乙醛酸旁路（glyoxylatebypass）之间碳的流动。基于异柠檬酸脱氢酶的NADP依赖性，和作用后所产生的NADPH，通过分光光度仪的峰值变化（340nm波长），来定量分析异柠檬酸脱氢酶的活性。异柠檬酸脱氢酶反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量检测

  主要用途细胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA，受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，释放黄色对硝基苯胺，产生吸光峰值的变化，即采用比色法来测定细胞裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取液样品（动物、人体、昆虫等）半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3）的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景半胱氨酸蛋白酶（Cysteine-requiringAspartateprotease；CASPASE），或称半胱天冬蛋白酶，是调节细胞凋亡的一类蛋白酶家属。半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3；EC3.4.22.56）是半胱氨酸蛋白酶家属中CED-3（CellDeathGeneNumber3；秀丽隐杆线虫细胞死亡基因数3）分支的一种，又称CPP32（CysteineProteinaseProtein32kd；半胱氨酸蛋白酶蛋白32）、apopain（凋亡素）、Yama（印度传说中的死亡之神）等。半胱氨酸蛋白酶-3前体为32kd，被切离为17kd和11kd而激活细胞凋亡。其底物是多聚ADP-核糖多聚酶（poly（ADP-ribose）polymerase；PARP）、半胱氨酸蛋白酶激活DNA酶YZ剂（ICAD）等。半胱氨酸蛋白酶-3的活性检测用来评价细胞或组织的凋亡状况。基于人工合成的四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA（acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-p-Nithoaniline；乙酰天冬氨酰谷氨酰颉氨酰天冬氨酰对硝基苯胺）受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，释放有色对硝基苯胺，在分光光度仪（405nm波长）下，测定吸光峰值的变化，来定量测定半胱氨酸蛋白酶-3的活性。半胱氨酸蛋白酶-3反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细菌丙酮酸激酶（PK）总活性比色法定量检测试剂盒

  细菌丙酮酸激酶总活性光度法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途细菌丙酮酸激酶总活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶的酶偶联反应系统中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用光度法来测定细菌裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细菌细胞裂解萃取悬液样品丙酮酸激酶的总活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景丙酮酸激酶（PyruvateKinase；PK；EC2.7.1.40），全称为ATP-丙酮酸磷酸转移酶（ATP:pyruvatephosphotransferase），是细胞代谢的调节酶，催化细胞糖酵解的Z后反应：将磷酸烯醇丙酮酸（phosphoenolpyruvate；PEP）转化成丙酮酸（pyruvate），同时产生ATP。丙酮酸激酶在糖酵解中活性，而在葡糖生成过程中活性降低。细菌丙酮酸激酶为同源四聚体（homotetramer），240Kd分子量，分成两种类型：一种是诱导型（inducible），由果糖-2,6-二磷酸（Fructose-2,6-bisphosphate；F2,6BP）激活；一种是结构型（constitutive），由AMP激活。基于磷酸烯醇丙酮酸转化成丙酮酸后，通过乳酸脱氢酶系统，测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD）的峰值变化（340nm波长），来定量分析丙酮酸激酶的活性。丙酮酸激酶反应系统为：产品内容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升缓冲液（ReagentC）毫升反应液（ReagentD）毫升底物液（ReagentE）毫升阴性液（ReagentF）微升产品说明书1份保存方式保存裂解液（ReagentB）、反应液（ReagentD）和底物液（ReagentE）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品制备和保存的容器15毫升锥形离心管：用于样品制备的容器超声仪：用于细菌裂解（微型）台式离心机：用于样品操作比色皿或96孔板：用于光度分析的容器分光光度仪或酶标仪：用于光度分析[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 细菌异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  细菌异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-04-08 00:00

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• 细菌琥珀酸脱氢酶（SDH）活性比色法定量检测试剂盒产品说明书 （中文版）

  细菌琥珀酸脱氢酶（SDH）活性比色法定量检测试剂盒产品说明书 （中文版）[详细]

  2015-01-05 00:00

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• Ca-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

  Ca-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，机体在缺氧及等状态下，ATP酶受到损伤，活力下降。ATP酶活力的大小是各种细胞能量代谢及功能有无损伤的重要指标。本测试盒可测钠钾ATP酶、钙镁ATP酶的活性。样品为各种组织及红细胞等，本法的Zda特点是样品前处理不需要高速离心机，方法简便、快速。产品内容缓冲液（ReagentA）6毫升反应液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升阴性液（ReagentD）6毫升标准品（reagentE）6微升产品说明书1份保存方式保存反应液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于反应液配制的容器微型台式离心机：用于样品制备比色皿或酶标板：用于比色的容器分光光度仪：用于比色分析酶标仪：用于微量样品比色分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的反应液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后进行下列操作。样品准备选择一：血浆样品1．准备好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g4．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分（注意：避免触碰白色液体层）5．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存6．（选择步骤）移取50微升进行蛋白定量测定选择二：血清样品1．准备好不含抗凝剂的储存管2．抽取2毫升血液，置于储存管里3．室温下，静置30分钟，直至血液凝结4．放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为5000g5．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分（注意：避免触碰白色液体层）6．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存7．（选择步骤）移取50微升进行蛋白定量测定选择三：组织样本准确称取组织重量，按照重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，去上清液待测。二、测定准备1.准备好上述待测样品，置于冰槽里2.设定好分光光度仪（温度为37℃）：波长440nm三、样本测定1．在96孔酶标板上做好相应标记：背景对照，标准品孔和样品孔2．分别移取50微升缓冲液（ReagentA）到相应孔中3．设定标准品孔(加入50微升标准品），样本孔(加入50微升样本)阴性液孔(加入50微升阴性液（ReagentD）4．分别加入50微升反应液（ReagentB）5．轻轻摇动96孔酶标板6．在37℃温度下孵育2分钟7．放进酶标仪，置零8．取出酶标板，分别加入50微升底物液（ReagentC）9．轻轻摇动酶标板10．即刻放进酶标仪检测，包括（0分钟初始读数和5分钟读数）四，样本计算样本活性=样本OD值/标准OD值*标品浓度[详细]

  2024-09-29 05:34

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• Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒说明书

  Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒说明书主要用途ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，机体在缺氧及等状态下，ATP酶受到损伤，活力下降。ATP酶活力的大小是各种细胞能量代谢及功能有无损伤的重要指标。本测试盒可测钠钾ATP酶、钙镁ATP酶的活性。样品为各种组织及红细胞等，本法的Zda特点是样品前处理不需要高速离心机，方法简便、快速。产品内容缓冲液（ReagentA）6毫升反应液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升阴性液（ReagentD）6毫升标准品（reagentE）6微升产品说明书1份保存方式保存反应液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于反应液配制的容器微型台式离心机：用于样品制备比色皿或酶标板：用于比色的容器分光光度仪：用于比色分析酶标仪：用于微量样品比色分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的反应液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后进行下列操作。样品准备选择一：血浆样品1．准备好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g4．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分（注意：避免触碰白色液体层）5．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存6．（选择步骤）移取50微升进行蛋白定量测定选择二：血清样品1．准备好不含抗凝剂的储存管2．抽取2毫升血液，置于储存管里3．室温下，静置30分钟，直至血液凝结4．放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为5000g5．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分（注意：避免触碰白色液体层）6．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存7．（选择步骤）移取50微升进行蛋白定量测定选择三：组织样本准确称取组织重量，按照重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，去上清液待测。二、测定准备1.准备好上述待测样品，置于冰槽里2.设定好分光光度仪（温度为37℃）：波长440nm三、样本测定1．在96孔酶标板上做好相应标记：背景对照，标准品孔和样品孔2．分别移取50微升缓冲液（ReagentA）到相应孔中3．设定标准品孔(加入50微升标准品），样本孔(加入50微升样本)阴性液孔(加入50微升阴性液（ReagentD）4．分别加入50微升反应液（ReagentB）5．轻轻摇动96孔酶标板6．在37℃温度下孵育2分钟7．放进酶标仪，置零8．取出酶标板，分别加入50微升底物液（ReagentC）9．轻轻摇动酶标板10．即刻放进酶标仪检测，包括（0分钟初始读数和5分钟读数）四，样本计算样本活性=样本OD值/标准OD值*标品浓度[详细]

  2024-09-29 11:52

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• 植物α-淀粉酶（α-AMYLASE）活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途植物α-淀粉酶（α-AMYLASE）活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用具有还原力的黄色3,5-二硝基水杨酸与受到α-淀粉酶中性环境下水解产生的还原基团分子反应，生成强烈吸光的3-氨基-5-硝基水杨酸，即采用比色法测定其还原后峰值的升高变化，以此测定样品中α-淀粉酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适合于各种新鲜植物组织，包括叶片（leaf）、谷粒（grain）、种子（seed）等裂解萃取液样品α-淀粉酶的活性检测。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景淀粉酶（AMYLASE）属于糖苷水解酶类（glycosidehydrolase）。淀粉酶通过水解方式，分解淀粉的α－1，4链接，释放出葡萄糖、麦芽糖（maltose）、麦芽三糖（maltotriose）、糊精（dextrin）等简单糖分子。淀粉酶分成三类：α-淀粉酶、β-淀粉酶和γ-淀粉酶。其中α淀粉酶（EC3.2.1.1），又称为α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶（α-1,4-glucan4-glucanohydrolase）或糖原酶（glycogenase），是钙离子依赖性钙金属蛋白酶（calciummetalloenzyme），分解淀粉为葡萄糖、麦芽糖（maltose）、麦芽三糖（maltotriose）、糊精（dextrin）等，为主要的消化酶，尤其在人体中，例如唾液和胰淀粉酶等。β淀粉酶（EC3.2.1.2），又称为α-1,4-葡聚糖麦芽糖水解酶（1,4-α-D-glucanmaltohydrolase）或糖基淀粉酶（saccharogenamylase），分解淀粉为葡萄糖等。植物、真菌、细菌等均能产生，而人体组织不含有。γ-淀粉酶（EC3.2.1.2），又称为α-1,4-葡聚糖葡萄糖苷酶（Glucan1,4-α-glucosidase）或溶酶体α-葡萄糖苷酶（lysosomalα-glucosidase），在酸性环境下分解淀粉为葡萄糖。淀粉是一种复杂分子，由多聚糖直链淀粉（amylose）和支链淀粉（amylopectin）构成。植物和细菌产生大多数淀粉。在淀粉酶的催化作用下，分解产生简单糖分子，作为能源储存，植物用于光合作用。植物和细菌性淀粉酶常用于工业，包括烘培食物和乳制品的制造，以及酒精和纸材的生产。基于淀粉，在中性环境下，通过α-淀粉酶的水解，释放出麦芽糖等含有游离的还原性基团（例如酮基等），进一步使用具有还原力的黄色3,5-二硝基水杨酸（3,5-Dinitrosalicylicacid；DNS）与之反应，产生红棕色的3-氨基-5-硝基水杨酸（3-amino-5-nitrosalicylicacid），在分光光度仪（540nm波长）下测定，以定量分析α-淀粉酶的活性。其反应方式为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-05-28 00:00

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• 组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书...

  组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒是一种旨在使用乙醛脱氢酶2敏感性YZ剂，通过检测反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）还原后峰值的，即采用比色法来测定组织裂解萃取液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解悬液样品（动物、人体等）乙醛脱氢酶2的特异活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景乙醛脱氢酶（aldehydedehydrogenase；ALDH；EC1.2.1.3），又称为乙醛NAD氧化还原酶（aldehydeNAD-oxidoreductase）是一类NAD（P）依赖性酶，催化广谱的外源性或内源性脂肪族和芳香族乙醛类底物氧化，包括乙醇、氨基酸、生物胺（biogenicamine）、维生素、固醇类、脂质、药物和环境分子等代谢产物。乙醛脱氢酶是乙醇在体内分解代谢过程中两种主要酶之一。乙醛脱氢酶把乙醛中的两个氢原子脱掉，使乙醛转化为乙酸，生成的乙酸进入脂肪酸氧化途径，Z终被氧化成二氧化碳和水。乙醛脱氢酶主要有两种同工酶：ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中，ALDH2存在于线粒体中，ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脱氢酶的缺少，使酒精不能被完全分解为水和二氧化碳，而是以乙醛继续留在体内，使人喝酒后产生恶心欲吐、昏迷不适等醉酒症状。基于来自于乙醇代谢产生的乙醛（acetaldehyde），在7-羟基-3-（4-羟苯基）-异黄酮-7-糖苷（Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside；Daidzin）存在与否的情况下，由乙醛脱氢酶2的催化作用，转化为乙酸（aceticacid）产物后，通过测定反应体系中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide；NAD）转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）的变化（340nm波长），来定量分析乙醛脱氢酶2的特异活性。乙醛脱氢酶2反应系统为：产品内容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升缓冲液（ReagentC）毫升反应液（ReagentD）毫升底物液（ReagentE）毫升阴性液（ReagentF）毫升专性液（ReagentG）微升产品说明书1份保存方式保存缓冲液（ReagentC）、反应液（ReagentD）、底物液（ReagentE）和专性液（ReagentG）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；反应液（ReagentD）和底物液（ReagentE）避免光照；有效保证6月[详细]

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• 组织基质金属蛋白酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

  主要用途组织基质金属蛋白酶2（MMP-2）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过含硫多肽底物以及特定YZ剂存在与否的情况下，受到MMP2的水解，释放出巯基，进而使用Ellman试剂，产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化，即采用比色法来测定组织裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解萃取液样品（动物、人体）、部分或完全纯化酶样品中基质金属蛋白酶2的特异活性定量检测，以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，安全可靠。技术背景基质金属蛋白酶（Matrixmetalloproteinases；MMPs）是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的总称，因含有金属（锌、钙）离子而得名。其功能在于分解细胞外基质成分。迄今为止发现的MMPs至少有28种，几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质（extracellularmatrix）成分，同时参与胚胎发育、形态形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、组织再吸收（tissueresorption）、疾病发生，例如关节炎、癌细胞浸入转移等。根据降解的底物不同可将MMPs分为4大类：（1）胶原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和蛋白多糖；（2）明胶酶（Ⅳ型胶原酶）：MMP2、MMP9，又称明胶酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和弹性纤维；（3）基质溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12，主要作用于纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ胶原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金属蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明胶、Ⅳ型胶原、MMP2。体内绝大多数细胞并不储备MMPs，当需要MMPs的信号传递到细胞后才临时合成，合成的MMPs以无活性的酶原（proenzyme）形式分泌到细胞外，随后被多种蛋白酶和非蛋白酶水解以及热处理激活，一种激活的MMPs可激活另一种MMPs，形成瀑布效应。基质金属蛋白酶-2，又称明胶酶A（gelatinase-A）或IV型胶原酶（typeIVcollagenase），其前体分子量为72kDa，激活后分子量为62和56kDa。它在血清或细胞上清中浓度通常为10至200纳克/毫升。它的作用目标是天然和变性胶原蛋白（collagens）、纤维连接蛋白（fibronectin）、弹性纤维蛋白（elastin）、层粘连蛋白-5（laminin-5）、前体肿瘤坏死因子-α（pro-TNF-α）和神经（蛋白）聚糖（neurocan）。基质金属蛋白酶-2与肿瘤发展与转移、血管形成、动脉粥样硬化等疾病有关。基于含硫多肽（thiopeptide）底物Ac-PLG（2-mercapto-4-methyl-pentanoyl）-LG-OC2H5，在特异性YZ剂OA-Hy存在与否的条件下，受到MMP2的水解，释放出巯基（sulfhydrylgroup），进而与Ellman试剂5，5-二硫基-双（2-硝基苯甲酸）[5，5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反应后，产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通过其吸收峰值的变化（412nm波长），来定量测定组织基质金属蛋白酶2的特异活性。基质金属蛋白酶2反应系统为：[详细]

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• 细胞基质金属蛋白酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

  主要用途细胞基质金属蛋白酶2（MMP-2）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过含硫多肽底物以及特定YZ剂存在与否的情况下，受到MMP2的水解，释放出巯基，进而使用Ellman试剂，产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化，即采用比色法来测定细胞裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取液样品（动物、人体）、部分或完全纯化酶样品中基质金属蛋白酶2的特异活性定量检测，以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，安全可靠。技术背景基质金属蛋白酶（Matrixmetalloproteinases；MMPs）是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的总称，因含有金属（锌、钙）离子而得名。其功能在于分解细胞外基质成分。迄今为止发现的MMPs至少有28种，几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质（extracellularmatrix）成分，同时参与胚胎发育、形态形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、组织再吸收（tissueresorption）、疾病发生，例如关节炎、癌细胞浸入转移等。根据降解的底物不同可将MMPs分为4大类：（1）胶原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和蛋白多糖；（2）明胶酶（Ⅳ型胶原酶）：MMP2、MMP9，又称明胶酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和弹性纤维；（3）基质溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12，主要作用于纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ胶原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金属蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明胶、Ⅳ型胶原、MMP2。体内绝大多数细胞并不储备MMPs，当需要MMPs的信号传递到细胞后才临时合成，合成的MMPs以无活性的酶原（proenzyme）形式分泌到细胞外，随后被多种蛋白酶和非蛋白酶水解以及热处理激活，一种激活的MMPs可激活另一种MMPs，形成瀑布效应。基质金属蛋白酶-2，又称明胶酶A（gelatinase-A）或IV型胶原酶（typeIVcollagenase），其前体分子量为72kDa，激活后分子量为62和56kDa。它在血清或细胞上清中浓度通常为10至200纳克/毫升。它的作用目标是天然和变性胶原蛋白（collagens）、纤维连接蛋白（fibronectin）、弹性纤维蛋白（elastin）、层粘连蛋白-5（laminin-5）、前体肿瘤坏死因子-α（pro-TNF-α）和神经（蛋白）聚糖（neurocan）。基质金属蛋白酶-2与肿瘤发展与转移、血管形成、动脉粥样硬化等疾病有关。基于含硫多肽（thiopeptide）底物Ac-PLG（2-mercapto-4-methyl-pentanoyl）-LG-OC2H5，在特异性YZ剂OA-Hy存在与否的条件下，受到MMP2的水解，释放出巯基（sulfhydrylgroup），进而与Ellman试剂5,5-二硫基-双（2-硝基苯甲酸）[5,5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反应后，产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通过其吸收峰值的变化（412nm波长），来定量测定细胞基质金属蛋白酶2的特异活性。基质金属蛋白酶2反应系统为：[详细]

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• 细胞PTEN活性定磷比色法定量检测试剂盒产品说明书

  细胞PTEN活性定磷比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途细胞PTEN活性定磷比色法定量检测试剂是一种旨在使用特异性合成底物磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3），在PTEN去磷酸化后，释放出游离磷酸根，与孔雀绿染料发生显色反应后，采用比色法测定其峰值的变化，以此进行测算单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细胞裂解悬液样品的PTEN活性及其YZ剂的检测。广泛应用于细胞凋亡、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景细胞张力蛋白同源在10号染色体缺失性磷酸酶（phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen；PTEN；EC3.1.3.67），又称为多发性晚期肿瘤突变基因1（mutatedinmultipleadvancedcancers1；MMAC1），是一个肿瘤YZ基因，位于染色体10q23.3，转录产物515kb，蛋白产物175氨基酸。PTEN蛋白含有一酪蛋白磷酸酶的功能区和约175个氨基酸左右的与骨架蛋白张力蛋白（tenasin）、辅助蛋白（auxilin）同源的区域，是一种双重特异性磷酸酶，能使酪氨酸、丝氨酸、苏氨酸、磷酯酰肌醇（phosphoinositide）等去磷酸化。PTEN具有调节细胞周期、防止细胞过度生长和分开裂解、参与细胞凋亡、粘附、迁移、浸润，控制细胞内磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate；PIP3）水平，调控Akt/PKB信号通路等功能。PTEN基因突变和缺失将导致肿瘤发生、发展和转移，以及多发性错构瘤综合征（Cowdensyndrome）等。基于底物磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸，在PTEN的催化下，水解产生磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2），同时释放出游离磷酸根，进而与孔雀绿染料发生显色反应产生其峰值的变化（660nm波长），以此测算PTEN的活性。产品内容清理液（ReagentA）120毫升裂解液（ReagentB）10毫升缓冲液（ReagentC）1毫升阴性液（ReagentD）1毫升反应液（ReagentE）200微升终止液（ReagentF）1毫升显色液（ReagentG）4毫升标准液（ReagentH）500微升产品说明书1份保存方式保存裂解液（ReagentB）、缓冲液（ReagentC）、反应液（ReagentE）和显色液（ReagentG）在－20℃冰箱里，避免反复冻融；其余的保存在4℃冰箱里；终止液（ReagentF）和显色液（ReagentG）具有腐蚀性，避免直接用手接触；显色液（ReagentG）避免光照，有效保证6月用户自备15毫升离心管：用于样品处理的容器1.5毫升离心管：用于样品处理和保存的容器细胞刮脱棒：用于贴壁细胞脱离（微型）台式离心机：用于样品收集培养箱：用于孵育反应物比色皿：用于比色的容器分光光度仪：用于比色分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液放进冰槽里融化。然后进行下列操作。样品准备准备好25cm2细胞培养瓶或60mm细胞培养皿的待测培养细胞（5X106细胞）小心加入3毫升预冷的清理液（ReagentA），覆盖生长表面小心抽去清理液使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞加入3毫升清理液（ReagentA），混匀细胞移入到预冷的15毫升锥形离心管（注意：悬浮细胞从这一步骤开始）放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为300g小心抽去上清液加入500微升裂解液（ReagentB），充分混匀转移到预冷的1.5毫升离心管QL涡旋震荡15秒置于冰槽里孵育30分钟放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管移取2微升进行蛋白定量测定（注意：建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－HL30030.1）即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作二、测定准备准备好待测样品（例如细胞裂解萃取液等），置于冰槽里（注意：样品须澄清）设定好分光光度仪（温度为30℃）：波长为660nm，并置零准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管按下表分别加入阴性液（ReagentD）和标准液（ReagentH）到每个离心管，混匀将1至5号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表管号阴性液（ReagentD）标准液（ReagentH）测定体系标准磷浓度10100微升20微摩尔/升225微升75微升15微摩尔/升350微升50微升10微摩尔/升475微升25微升5微摩尔/升5100微升00标准曲线测定移取20微升阴性液（ReagentD）到新的比色皿加入5微升上述配制的标准液在37℃温度下孵育10分钟加入8微升终止液（ReagentF），混匀加入100微升显色液（ReagentG），混匀室温下静置15分钟，避免光照即刻放进分光光度仪检测：获得吸光读数重复实验步骤1至7四次构建标准曲线：纵座标（Y轴）为吸光单位（A）；横座标（X轴）为标准磷浓度（微摩尔/升）样品背景测定移取20微升缓冲液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待测样品（总量100微克细胞裂解萃取液蛋白）在37℃温度下孵育10分钟加入8微升终止液（ReagentF），混匀加入100微升显色液（ReagentG），混匀室温下静置15分钟，避免光照即刻放进分光光度仪检测：获得吸光读数根据标准曲线获得样品背景对应磷浓度样品活性测定移取10微升缓冲液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待测样品（总量100微克细胞裂解萃取液蛋白）在37℃温度下孵育2分钟加入10微升反应液（ReagentE）在37℃温度下孵育10分钟加入8微升终止液（ReagentF），混匀加入100微升显色液（ReagentG），混匀室温下静置15分钟，避免光照即刻放进分光光度仪检测：获得吸光读数根据标准曲线获得样品活性对应磷浓度计算样品活性{[根据标准曲线获得样品活性对应磷浓度（微摩尔/升）根据标准曲线获得样品背景对应磷浓度（微摩尔/升）]X5（体系倍数）X样品稀释倍数}÷10（反应时间；分钟）＝纳摩尔磷/毫升/分钟÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝纳摩尔磷/毫克/分钟注意事项本产品为25次操作，包括5次标准测定操作时，避免污染母液操作时，须戴手套终止液（ReagentF）和显色液（ReagentG）具有腐蚀性，避免直接用手接触样品切忌使用磷酸缓冲液和脱氧胆酸纳处理比色测定后，比色皿须清洗彻底如果用户没有660nm波长，可以使用600至660nm的任一波长替代显示绿色表明具有较强酶活性空白对照读数应小于0.2建议待测样本蛋白浓度为100微克/5微升；如果样本酶活性过低或过高，则可以增加或降低样本量；（本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－HL30030.1）钙调神经磷酸酶活性单位浓度定义：在37℃温度下，pH8.0的情况下，每单位酶在单位时间内（每分钟）释放1微摩尔的磷本公司提供系列磷酸化酶检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测准确[详细]

  2018-11-19 10:00

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• 组织酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途组织酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过酪氨酸酶反应系统中底物酪氨酸氧化后，产生多巴色素，呈现吸光峰值的变化，即采用比色法来测定组织裂解悬液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体和动物组织，尤其是皮肤、眼睛和黑色素瘤组织裂解悬液样品中酪氨酸酶的活性检测，以及YZ剂筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景酪氨酸酶（tyrosinase；EC1.14.18.1）是一种单酚单加氧酶（monophenolmonooxygenase），又称为单酚酶（monophenolase）或单酚二羟基苯丙氨酸：O2氧化还原酶（monophenoldihydroxyphenylalanin：O2oxidoreductase），具有双功能的含铜糖蛋白，广泛存在于植物、酵母和动物组织中，其蛋白结构、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人体酪氨酸酶是一个跨膜蛋白，而催化结构域在黑色素细胞（melanocyte）或色素细胞的黑色素器（melanosome）里。酪氨酸酶通过催化L-酪氨酸（L-tyrosine）等的o-羟基化（o-hydroxylation）反应变成L-多巴（L-dopamine），进而氧化产生黑色素底物多巴醌（dopaquinone），从而由多巴色素（dopachrome）转化为黑色素（melanin）中的真黑素（eumelanin），以及其它色素，包括毛发和眼睛色素。紫外线可以激活酪氨酸酶活性，严重时，会引起色素沉着（hyperpigmentation）。酪氨酸酶基因突变将导致I型眼皮肤白化病（oculocutaneousalbinism）。酪氨酸酶YZ剂成为增白化妆品的重要元素。基于底物酪氨酸，在酪氨酸酶的催化下，产生多巴色素，通过其吸光值的变化（475nm波长），来定量测定酪氨酸酶的活性。其反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细胞酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途细胞酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过酪氨酸酶反应系统中底物酪氨酸氧化后，产生多巴色素，呈现吸光峰值的变化，即采用比色法来测定细胞裂解悬液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体和动物细胞，尤其是黑色素细胞和黑色素瘤细胞裂解悬液样品中酪氨酸酶的活性检测，以及YZ剂筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景酪氨酸酶（tyrosinase；EC1.14.18.1）是一种单酚单加氧酶（monophenolmonooxygenase），又称为单酚酶（monophenolase）或单酚二羟基苯丙氨酸：O2氧化还原酶（monophenoldihydroxyphenylalanin：O2oxidoreductase），具有双功能的含铜糖蛋白，广泛存在于植物、酵母和动物组织中，其蛋白结构、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人体酪氨酸酶是一个跨膜蛋白，而催化结构域在黑色素细胞（melanocyte）或色素细胞的黑色素器（melanosome）里。酪氨酸酶通过催化L-酪氨酸（L-tyrosine）等的o-羟基化（o-hydroxylation）反应变成L-多巴（L-dopamine），进而氧化产生黑色素底物多巴醌（dopaquinone），从而由多巴色素（dopachrome）转化为黑色素（melanin）中的真黑素（eumelanin），以及其它色素，包括毛发和眼睛色素。紫外线可以激活酪氨酸酶活性，严重时，会引起色素沉着（hyperpigmentation）。酪氨酸酶基因突变将导致I型眼皮肤白化病（oculocutaneousalbinism）。酪氨酸酶YZ剂成为增白化妆品的重要元素。基于底物酪氨酸，在酪氨酸酶的催化下，产生多巴色素，通过其吸光值的变化（475nm波长），来定量测定酪氨酸酶的活性。其反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细胞丙酮酸激酶总活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途细胞丙酮酸激酶总活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶的酶偶联反应系统中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用比色法来测定细胞裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取悬液样品（动物、人体、植物、昆虫等）丙酮酸激酶的总活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景丙酮酸激酶（PyruvateKinase；PK）是细胞代谢的调节酶，催化细胞糖酵解的Z后反应：将磷酸烯醇丙酮酸（phosphoenolpyruvate；PEP）转化成丙酮酸（pyruvate），同时产生ATP。丙酮酸激酶由4个相同的亚单位构成，在肝组织、肌肉组织和红细胞中有不同类型的异构体。果糖-2，6-二磷酸（Fructose-2，6-bisphosphate；F2，6BP）是该酶的激活剂，而ATP、蛋氨酸（alanine）、乙酰辅酶A（Acetyl-CoA）是该酶的YZ剂。丙酮酸激酶的活性检测用来评价细胞或组织，包括红细胞的损害状况。基于磷酸烯醇丙酮酸转化成丙酮酸后，通过乳酸脱氢酶系统，测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD）的峰值变化（340nm波长），来定量分析丙酮酸激酶的活性。丙酮酸激酶反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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