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组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书...
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组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒是一种旨在使用乙醛脱氢酶2敏感性YZ剂,通过检测反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)还原后峰值的,即采用比色法来测定组织裂解萃取液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解悬液样品(动物、人体等)乙醛脱氢酶2的特异活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景乙醛脱氢酶(aldehydedehydrogenase;ALDH;EC1.2.1.3),又称为乙醛NAD氧化还原酶(aldehydeNAD-oxidoreductase)是一类NAD(P)依赖性酶,催化广谱的外源性或内源性脂肪族和芳香族乙醛类底物氧化,包括乙醇、氨基酸、生物胺(biogenicamine)、维生素、固醇类、脂质、药物和环境分子等代谢产物。乙醛脱氢酶是乙醇在体内分解代谢过程中两种主要酶之一。乙醛脱氢酶把乙醛中的两个氢原子脱掉,使乙醛转化为乙酸,生成的乙酸进入脂肪酸氧化途径,Z终被氧化成二氧化碳和水。乙醛脱氢酶主要有两种同工酶:ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中,ALDH2存在于线粒体中,ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脱氢酶的缺少,使酒精不能被完全分解为水和二氧化碳,而是以乙醛继续留在体内,使人喝酒后产生恶心欲吐、昏迷不适等醉酒症状。基于来自于乙醇代谢产生的乙醛(acetaldehyde),在7-羟基-3-(4-羟苯基)-异黄酮-7-糖苷(Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside;Daidzin)存在与否的情况下,由乙醛脱氢酶2的催化作用,转化为乙酸(aceticacid)产物后,通过测定反应体系中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)的变化(340nm波长),来定量分析乙醛脱氢酶2的特异活性。乙醛脱氢酶2反应系统为:产品内容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升缓冲液(ReagentC)毫升反应液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)毫升阴性液(ReagentF)毫升专性液(ReagentG)微升产品说明书1份保存方式保存缓冲液(ReagentC)、反应液(ReagentD)、底物液(ReagentE)和专性液(ReagentG)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反应液(ReagentD)和底物液(ReagentE)避免光照;有效保证6月
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- 组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒是一种旨在使用乙醛脱氢酶2敏感性YZ剂,通过检测反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)还原后峰值的,即采用比色法来测定组织裂解萃取液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解悬液样品(动物、人体等)乙醛脱氢酶2的特异活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景乙醛脱氢酶(aldehydedehydrogenase;ALDH;EC1.2.1.3),又称为乙醛NAD氧化还原酶(aldehydeNAD-oxidoreductase)是一类NAD(P)依赖性酶,催化广谱的外源性或内源性脂肪族和芳香族乙醛类底物氧化,包括乙醇、氨基酸、生物胺(biogenicamine)、维生素、固醇类、脂质、药物和环境分子等代谢产物。乙醛脱氢酶是乙醇在体内分解代谢过程中两种主要酶之一。乙醛脱氢酶把乙醛中的两个氢原子脱掉,使乙醛转化为乙酸,生成的乙酸进入脂肪酸氧化途径,Z终被氧化成二氧化碳和水。乙醛脱氢酶主要有两种同工酶:ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中,ALDH2存在于线粒体中,ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脱氢酶的缺少,使酒精不能被完全分解为水和二氧化碳,而是以乙醛继续留在体内,使人喝酒后产生恶心欲吐、昏迷不适等醉酒症状。基于来自于乙醇代谢产生的乙醛(acetaldehyde),在7-羟基-3-(4-羟苯基)-异黄酮-7-糖苷(Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside;Daidzin)存在与否的情况下,由乙醛脱氢酶2的催化作用,转化为乙酸(aceticacid)产物后,通过测定反应体系中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)的变化(340nm波长),来定量分析乙醛脱氢酶2的特异活性。乙醛脱氢酶2反应系统为:产品内容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升缓冲液(ReagentC)毫升反应液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)毫升阴性液(ReagentF)毫升专性液(ReagentG)微升产品说明书1份保存方式保存缓冲液(ReagentC)、反应液(ReagentD)、底物液(ReagentE)和专性液(ReagentG)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反应液(ReagentD)和底物液(ReagentE)避免光照;有效保证6月[详细]
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2018-11-08 10:00
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组织乙醛脱氢酶2活性光度法定量检测试剂盒
- 主要用途组织乙醛脱氢酶2活性光度法定量检测试剂盒是一种旨在使用乙醛脱氢酶2敏感性YZ剂,通过检测反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)还原后峰值的,即采用光度法来测定组织裂解萃取液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解悬液样品(动物、人体等)乙醛脱氢酶2的特异活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景乙醛脱氢酶(aldehydedehydrogenase;ALDH;EC1.2.1.3),又称为乙醛NAD氧化还原酶(aldehydeNAD-oxidoreductase)是一类NAD(P)依赖性酶,催化广谱的外源性或内源性脂肪族和芳香族乙醛类底物氧化,包括乙醇、氨基酸、生物胺(biogenicamine)、维生素、固醇类、脂质、药物和环境分子等代谢产物。乙醛脱氢酶是乙醇在体内分解代谢过程中两种主要酶之一。乙醛脱氢酶把乙醛中的两个氢原子脱掉,使乙醛转化为乙酸,生成的乙酸进入脂肪酸氧化途径,Z终被氧化成二氧化碳和水。乙醛脱氢酶主要有两种同工酶:ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中,ALDH2存在于线粒体中,ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脱氢酶的缺少,使酒精不能被完全分解为水和二氧化碳,而是以乙醛继续留在体内,使人喝酒后产生恶心欲吐、昏迷不适等醉酒症状。基于来自于乙醇代谢产生的乙醛(acetaldehyde),在7-羟基-3-(4-羟苯基)-异黄酮-7-糖苷(Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside;Daidzin)存在与否的情况下,由乙醛脱氢酶2的催化作用,转化为乙酸(aceticacid)产物后,通过测定反应体系中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)的变化(340nm波长),来定量分析乙醛脱氢酶2的特异活性。乙醛脱氢酶2反应系统为:[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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组织乙醛脱氢酶2活性光度法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
- 组织乙醛脱氢酶2活性光度法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)[详细]
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2014-12-30 00:00
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组织基质金属蛋白酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书
- 主要用途组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过含硫多肽底物以及特定YZ剂存在与否的情况下,受到MMP2的水解,释放出巯基,进而使用Ellman试剂,产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化,即采用比色法来测定组织裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解萃取液样品(动物、人体)、部分或完全纯化酶样品中基质金属蛋白酶2的特异活性定量检测,以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,安全可靠。技术背景基质金属蛋白酶(Matrixmetalloproteinases;MMPs)是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的总称,因含有金属(锌、钙)离子而得名。其功能在于分解细胞外基质成分。迄今为止发现的MMPs至少有28种,几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质(extracellularmatrix)成分,同时参与胚胎发育、形态形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、组织再吸收(tissueresorption)、疾病发生,例如关节炎、癌细胞浸入转移等。根据降解的底物不同可将MMPs分为4大类:(1)胶原酶:MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和蛋白多糖;(2)明胶酶(Ⅳ型胶原酶):MMP2、MMP9,又称明胶酶A、B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和弹性纤维;(3)基质溶解素:MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12,主要作用于纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ胶原及MMP1、MMP8、MMP9;(4)膜型金属蛋白酶:MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP,主要作用于明胶、Ⅳ型胶原、MMP2。体内绝大多数细胞并不储备MMPs,当需要MMPs的信号传递到细胞后才临时合成,合成的MMPs以无活性的酶原(proenzyme)形式分泌到细胞外,随后被多种蛋白酶和非蛋白酶水解以及热处理激活,一种激活的MMPs可激活另一种MMPs,形成瀑布效应。基质金属蛋白酶-2,又称明胶酶A(gelatinase-A)或IV型胶原酶(typeIVcollagenase),其前体分子量为72kDa,激活后分子量为62和56kDa。它在血清或细胞上清中浓度通常为10至200纳克/毫升。它的作用目标是天然和变性胶原蛋白(collagens)、纤维连接蛋白(fibronectin)、弹性纤维蛋白(elastin)、层粘连蛋白-5(laminin-5)、前体肿瘤坏死因子-α(pro-TNF-α)和神经(蛋白)聚糖(neurocan)。基质金属蛋白酶-2与肿瘤发展与转移、血管形成、动脉粥样硬化等疾病有关。基于含硫多肽(thiopeptide)底物Ac-PLG(2-mercapto-4-methyl-pentanoyl)-LG-OC2H5,在特异性YZ剂OA-Hy存在与否的条件下,受到MMP2的水解,释放出巯基(sulfhydrylgroup),进而与Ellman试剂5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反应后,产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通过其吸收峰值的变化(412nm波长),来定量测定组织基质金属蛋白酶2的特异活性。基质金属蛋白酶2反应系统为:[详细]
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2018-11-08 10:00
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乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒说明书
- 乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒说明书[详细]
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2018-11-08 10:00
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细菌异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书
- 主要用途细菌异柠檬酸脱氢酶(ISOCITRATEDEHYDROGENASE)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸(NADP)还原后峰值的变化,即采用比色法来测定细菌裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细菌细胞裂解悬液样品异柠檬酸脱氢酶的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景异柠檬酸脱氢酶(isocitratedehydrogenase;IDH;EC1.1.1.42)是三羧酸循环(citricacidcycle)或克雷布斯循环(Krehescycle)中的酶之一,存在于所有生物体内。细菌异柠檬酸脱氢酶有2种同工酶:同源双体,40至45Kd分子量;单体,80至100Kd分子量。在细菌体内,氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADP)依赖性异柠檬酸脱氢酶获得辅酶NADP和辅助因子锰或镁离子(Mn)的推动,脱去底物异柠檬酸的氢和二氧化碳(氧化性脱羧基作用),转化为α-酮戊二酸(α-ketoglutarate),同时生成还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADPH)。一旦磷酸化或在乙酸环境中,以及有限的葡萄糖条件下,异柠檬酸脱氢酶则失活,从而控制三羧酸循环和乙醛酸旁路(glyoxylatebypass)之间碳的流动。基于异柠檬酸脱氢酶的NADP依赖性,和作用后所产生的NADPH,通过分光光度仪的峰值变化(340nm波长),来定量分析异柠檬酸脱氢酶的活性。异柠檬酸脱氢酶反应系统为:[详细]
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2018-11-18 10:00
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组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
- 组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)[详细]
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2015-05-28 00:00
期刊论文
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细菌异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒
- 主要用途细菌异柠檬酸脱氢酶(ISOCITRATEDEHYDROGENASE)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸(NADP)还原后峰值的变化,即采用比色法来测定细菌裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细菌细胞裂解悬液样品异柠檬酸脱氢酶的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景异柠檬酸脱氢酶(isocitratedehydrogenase;IDH;EC1.1.1.42)是三羧酸循环(citricacidcycle)或克雷布斯循环(Krehescycle)中的酶之一,存在于所有生物体内。细菌异柠檬酸脱氢酶有2种同工酶:同源双体,40至45Kd分子量;单体,80至100Kd分子量。在细菌体内,氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADP)依赖性异柠檬酸脱氢酶获得辅酶NADP和辅助因子锰或镁离子(Mn)的推动,脱去底物异柠檬酸的氢和二氧化碳(氧化性脱羧基作用),转化为α-酮戊二酸(α-ketoglutarate),同时生成还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADPH)。一旦磷酸化或在乙酸环境中,以及有限的葡萄糖条件下,异柠檬酸脱氢酶则失活,从而控制三羧酸循环和乙醛酸旁路(glyoxylatebypass)之间碳的流动。基于异柠檬酸脱氢酶的NADP依赖性,和作用后所产生的NADPH,通过分光光度仪的峰值变化(340nm波长),来定量分析异柠檬酸脱氢酶的活性。异柠檬酸脱氢酶反应系统为:[详细]
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2018-11-18 10:00
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细菌琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒
- 主要用途细菌琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成电子受体染料,通过反应系统测定染料还原后峰值的降低,即采用比色法测算样品中单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细菌菌株裂解悬液和膜蛋白样品琥珀酸脱氢酶的特异性活性检测。用于衰老、能量代谢、蛋白组学、发酵分析等研究。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。技术背景琥珀酸脱氢酶(succinatedehydrogenase;SDH;EC1.3.99.1)是三羧酸循环(tricarboxylicacidcycle;TCA)或Krebs循环中与细胞线粒体膜相关的重要元素,位于线粒体内膜,参与细胞呼吸链。细菌琥珀酸脱氢酶,又称为SdhCDAB,为膜结合性蛋白,分为周边(peripheral)和跨膜(transmembrane)部分,其中周边亲水部分由SdhA和SdhB亚体组成:SdhA亚体含有黄素蛋白(flavoprotein),是琥珀酸的活性部位;SdhB含有铁硫蛋白(iron-sulfurprotein),进行电子传递;跨膜疏水部分由SdhC和SdhD亚体组成:SdhC含有亚铁血红素-B(Heme-B),SdhD含有泛醌(ubiquinone)结合部位(Q部位)。其作用在于参与三羧酸循环(TCAcycle)和呼吸链活动。琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸(succinate)的氧化反应,产生延胡索酸(furmarate),通过黄素腺嘌呤二核苷酸(FlavinAdenineDinucleotide;FAD)传递电子。基于琥珀酸脱氢酶的反应原理,使用人工电子受体染料二氯靛酚钠(2,6-Dichloroindophenolsodium;DCIP),接受来自还原型黄素腺嘌呤二核苷酸(ReducedflavinAdenineDinucleotide;FADH2)的电子,而被还原,在分光光度仪下,其吸光值(600nm波长)的变化,来测算琥珀酸脱氢酶的活性。其反应方式为:[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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细菌异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
- 细菌异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)[详细]
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2015-04-08 00:00
期刊论文
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细菌琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒产品说明书 (中文版)
- 细菌琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒产品说明书 (中文版)[详细]
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2015-01-05 00:00
期刊论文
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纯化线粒体琥珀酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
- 纯化线粒体琥珀酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途纯化线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成电子受体染料,通过反应系统测定染料还原后峰值的降低,即采用比色法测算样品中单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种纯化线粒体裂解悬液样品琥珀酸脱氢酶的特异性活性检测。用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。技术背景琥珀酸脱氢酶(succinatedehydrogenase;SDH;EC1.3.99.1)是三羧酸循环(tricarboxylicacidcycle;TCA)或Krebs循环中与细胞线粒体膜相关的重要元素,位于线粒体内膜,参与细胞呼吸链。琥珀酸脱氢酶由27kd和70kd两个单体组成。其功能在于催化琥珀酸(succinate)的氧化反应,产生延胡索酸(furmarate),通过黄素腺嘌呤二核苷酸(FlavinAdenineDinucleotide;FAD)传递电子。基于琥珀酸脱氢酶的反应原理,使用人工电子受体染料二氯靛酚钠(2,6-Dichloroindophenolsodium;DCIP),接受来自还原型黄素腺嘌呤二核苷酸(ReducedflavinAdenineDinucleotide;FADH2)的电子,而被还原,在分光光度仪下,其吸光值(600nm波长)的变化,来测算琥珀酸脱氢酶的活性。其反应方式为:产品内容清理液(ReagentA)XX毫升裂解液(ReagentB)XX毫升缓冲液(ReagentC)XX毫升反应液(ReagentD)XX毫升底物液(ReagentE)XX毫升阴性液(ReagentF)XX微升产品说明书1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融;反应液(ReagentD)含有毒性物质,避免直接用手接触;底物液(ReagentE),避免光照;有效保证3月用户自备15毫升锥形离心管:用于样品制备的容器1.5毫升离心管:用于样品制备和保存的容器4℃(微型)台式离心机:用于样品处理DOUNCE匀浆器:用于裂解组织恒温培养箱或恒温水槽:用于反应物孵育比色皿:用于比色测定的容器分光光度仪:用于比色分析实验步骤实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液置入冰槽里融化;底物液(ReagentE)注意避光。然后进行下列操作。一、样品准备手术取出动物组织,并秤重以确定200毫克组织重量(选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管(选择步骤)加入XX毫升清理液(ReagentA)清洗(选择步骤)抽去清洗液移入到一个液氮冻存管即刻放进液氮罐过夜次日从液氮罐里取出,即刻(Z快速度)用研磨棒碾碎组织成粉末状(注意:切莫使组织冻融)放进一个15毫升锥形离心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液(ReagentB)涡旋震荡5秒,充分混匀即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器在冰槽里用匀浆棒匀化组织(约20至40下)(注意:参见注意事项8)将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为1500g小心移出上清液到另一个新的预冷的1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液(ReagentB),混匀颗粒群移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-GMS30030.1)放进-70℃的冰箱里保存或置于冰槽里备用二、测定准备准备好待测样品,置于冰槽里设定好分光光度仪(温度为25℃):波长600nm,间隔60秒,读数6次(共5分钟),并置零缓冲液(ReagentC)在室温下均衡温度背景对照测定移取XX微升缓冲液(ReagentC)到新的比色皿加入XX微升反应液(ReagentD)加入XX微升底物液(ReagentE)放进25℃培养箱里静置3分钟[详细]
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2018-11-08 10:00
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细胞基质金属蛋白酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书
- 主要用途细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过含硫多肽底物以及特定YZ剂存在与否的情况下,受到MMP2的水解,释放出巯基,进而使用Ellman试剂,产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化,即采用比色法来测定细胞裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取液样品(动物、人体)、部分或完全纯化酶样品中基质金属蛋白酶2的特异活性定量检测,以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,安全可靠。技术背景基质金属蛋白酶(Matrixmetalloproteinases;MMPs)是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的总称,因含有金属(锌、钙)离子而得名。其功能在于分解细胞外基质成分。迄今为止发现的MMPs至少有28种,几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质(extracellularmatrix)成分,同时参与胚胎发育、形态形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、组织再吸收(tissueresorption)、疾病发生,例如关节炎、癌细胞浸入转移等。根据降解的底物不同可将MMPs分为4大类:(1)胶原酶:MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和蛋白多糖;(2)明胶酶(Ⅳ型胶原酶):MMP2、MMP9,又称明胶酶A、B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和弹性纤维;(3)基质溶解素:MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12,主要作用于纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ胶原及MMP1、MMP8、MMP9;(4)膜型金属蛋白酶:MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP,主要作用于明胶、Ⅳ型胶原、MMP2。体内绝大多数细胞并不储备MMPs,当需要MMPs的信号传递到细胞后才临时合成,合成的MMPs以无活性的酶原(proenzyme)形式分泌到细胞外,随后被多种蛋白酶和非蛋白酶水解以及热处理激活,一种激活的MMPs可激活另一种MMPs,形成瀑布效应。基质金属蛋白酶-2,又称明胶酶A(gelatinase-A)或IV型胶原酶(typeIVcollagenase),其前体分子量为72kDa,激活后分子量为62和56kDa。它在血清或细胞上清中浓度通常为10至200纳克/毫升。它的作用目标是天然和变性胶原蛋白(collagens)、纤维连接蛋白(fibronectin)、弹性纤维蛋白(elastin)、层粘连蛋白-5(laminin-5)、前体肿瘤坏死因子-α(pro-TNF-α)和神经(蛋白)聚糖(neurocan)。基质金属蛋白酶-2与肿瘤发展与转移、血管形成、动脉粥样硬化等疾病有关。基于含硫多肽(thiopeptide)底物Ac-PLG(2-mercapto-4-methyl-pentanoyl)-LG-OC2H5,在特异性YZ剂OA-Hy存在与否的条件下,受到MMP2的水解,释放出巯基(sulfhydrylgroup),进而与Ellman试剂5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反应后,产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通过其吸收峰值的变化(412nm波长),来定量测定细胞基质金属蛋白酶2的特异活性。基质金属蛋白酶2反应系统为:[详细]
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2018-11-08 10:00
产品样册
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组织酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量检测试剂盒
- 主要用途组织酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过酪氨酸酶反应系统中底物酪氨酸氧化后,产生多巴色素,呈现吸光峰值的变化,即采用比色法来测定组织裂解悬液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体和动物组织,尤其是皮肤、眼睛和黑色素瘤组织裂解悬液样品中酪氨酸酶的活性检测,以及YZ剂筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景酪氨酸酶(tyrosinase;EC1.14.18.1)是一种单酚单加氧酶(monophenolmonooxygenase),又称为单酚酶(monophenolase)或单酚二羟基苯丙氨酸:O2氧化还原酶(monophenoldihydroxyphenylalanin:O2oxidoreductase),具有双功能的含铜糖蛋白,广泛存在于植物、酵母和动物组织中,其蛋白结构、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人体酪氨酸酶是一个跨膜蛋白,而催化结构域在黑色素细胞(melanocyte)或色素细胞的黑色素器(melanosome)里。酪氨酸酶通过催化L-酪氨酸(L-tyrosine)等的o-羟基化(o-hydroxylation)反应变成L-多巴(L-dopamine),进而氧化产生黑色素底物多巴醌(dopaquinone),从而由多巴色素(dopachrome)转化为黑色素(melanin)中的真黑素(eumelanin),以及其它色素,包括毛发和眼睛色素。紫外线可以激活酪氨酸酶活性,严重时,会引起色素沉着(hyperpigmentation)。酪氨酸酶基因突变将导致I型眼皮肤白化病(oculocutaneousalbinism)。酪氨酸酶YZ剂成为增白化妆品的重要元素。基于底物酪氨酸,在酪氨酸酶的催化下,产生多巴色素,通过其吸光值的变化(475nm波长),来定量测定酪氨酸酶的活性。其反应系统为:[详细]
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2018-11-18 10:00
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乳酸脱氢酶(LDH)总活性终点比色法定量检测试剂盒
- 主要用途乳酸脱氢酶(LDH)总活性终点比色法定量检测试剂是一种旨在通过乳酸脱氢酶反应系统中反应完成后还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用终点比色法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞和组织裂解萃取样品(动物、人体、植物、昆虫等)乳酸脱氢酶(LDH)的总活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景乳酸脱氢酶是一种氧化还原酶,催化丙酮酸和乳酸的互相转化反应。乳酸脱氢酶由4个亚单位构成,有两种类型:肌肉型和心肌型。根据其亚单位成分,分为5种同功酶。乳酸脱氢酶的活性检测用来评价细胞或组织的损害状况。基于丙酮酸(pyruvate)底物在乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase;LDH)的催化下,转化成乳酸(lactate),同时还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),完全反应后,在分光光度仪下产生吸收峰值的变化(340nm波长)由此定量测定乳酸脱氢酶的活性。乳酸脱氢酶反应系统为:lactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)[详细]
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2018-11-18 10:00
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乳酸脱氢酶(LDH)总活性终点比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
- 乳酸脱氢酶(LDH)总活性终点比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)[详细]
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2015-05-22 00:00
安装说明
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组织沉默调节蛋白1活性比色法定量检测试剂盒
- 主要用途组织沉默调节蛋白1(SIRT1)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过比色探针对硝基苯胺标记人工合成的乙酰化p53多肽底物,经过SIRT1脱乙酰基后,被位点特异性氨基肽酶水解,释放黄色对硝基苯胺,即采用比色法来测定组织裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解萃取液样品(动物、人体)、核蛋白样品、部分或完全纯化酶样品中SIRT1的活性定量检测,以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景人体组蛋白脱乙酰基酶(histonedeacetylase;HDAC)家属分成三类共20多个蛋白:种类I(classI)与酵母Rpd3蛋白同源,包括HDAC1、2、3、8,存在于细胞核中;种类II(classII)与酵母Hda1蛋白同源,包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR,存在于细胞核和细胞浆里;上述两大种类的蛋白分子催化结构域含有锌,且曲古菌素A(trichostatinA;TSA)敏感。种类III(classIII)为NAD+辅助因子必需,又称为sirtuins,与酵母Sir2(SilentInformationRegulator2)同源,包括SIRT1至7等,为曲古菌素A(trichostatinA;TSA)不敏感型赖氨酸脱乙酰基酶(lysyl-deacetylase)。催化赖氨酸脱乙酰基反应,以及由NAD+和乙酰(acetyl)基团转化产生的烟酰胺(nicotinamide)和O-乙酰ADP核糖(O-acetyl-ADP-ribose)。SIRT1位于细胞核内,与酵母Sir2同源性Z高。其功能在于调节p53活性和YZ细胞凋亡。基于人工合成的乙酰化p53(379至382氨基酸位点)多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys(Ac)具有抗氨基肽酶切离的功能,首先使用比色染料对硝基苯胺(p-Nitroaniline;p-NA)来标记乙酰化p53多肽底物,其次进行脱乙酰化,Z后底物进一步在氨基肽酶的催化酶解,释放出具有强烈吸光值的黄色对硝基苯胺(波长405nm),由此来定量测定沉默调节蛋白1的活性。用户自备磷酸盐缓冲溶液(PBS):用于清洗组织样品15毫升锥形离心管:用于样品处理的容器1.5毫升离心管:用于样品操作和保存的容器(微型)台式离心机:用于组织细胞预处理培养箱:用于反应物孵育96孔板或100微升1厘米光径比色皿:用于反应和比色的容器酶标仪或分光光度仪:用于比色分析注意事项1.本产品为20次操作,包括背景对照2.操作时,须戴手套3.系统操作过程中,背景测定只需1次4.样品须澄清,至关重要5.样品处理时,避免使用蛋白酶YZ剂、PMSF、烷基胺(alkylamine)等6.孵育反应完成后即刻进行比色测定7.滤波器可以使用波长400nm替代405nm8.测定值由低到高变化;酶动法测定可以持续60分钟9.测定值吸光读数越高,表明酶活性越高10.比色测定后,比色皿须清洗彻底11.待测样本为核蛋白样品,其蛋白浓度为50微克/20微升;待测样本为组织裂解悬液,其蛋白浓度为200微克/20微升(本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒30030.1)12.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度13.沉默调节蛋白1单位活性定义为:在30℃,pH8.0条件下,每分钟内能够释放1微摩尔对硝基苯酚所需的酶量作为一个活性单位14.本公司提供系列组蛋白脱乙酰基酶检测试剂产品质量标准1.本产品经鉴定性能稳定2.本产品经鉴定检测敏感[详细]
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2018-11-18 10:00
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Ca-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书
- Ca-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上,是生物膜上的一种蛋白酶,机体在缺氧及等状态下,ATP酶受到损伤,活力下降。ATP酶活力的大小是各种细胞能量代谢及功能有无损伤的重要指标。本测试盒可测钠钾ATP酶、钙镁ATP酶的活性。样品为各种组织及红细胞等,本法的Zda特点是样品前处理不需要高速离心机,方法简便、快速。产品内容缓冲液(ReagentA)6毫升反应液(ReagentB)6毫升底物液(ReagentC)6毫升阴性液(ReagentD)6毫升标准品(reagentE)6微升产品说明书1份保存方式保存反应液(ReagentB)和底物液(ReagentC)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;底物液(ReagentC)避免光照,有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于反应液配制的容器微型台式离心机:用于样品制备比色皿或酶标板:用于比色的容器分光光度仪:用于比色分析酶标仪:用于微量样品比色分析实验步骤实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的反应液(ReagentB)和底物液(ReagentC)置入冰槽里融化。底物液(ReagentC)避免光照。然后进行下列操作。样品准备选择一:血浆样品1.准备好ACD抗凝管(注意:避免使用肝素或EDTA抗凝管)2.抽取2毫升血液,置于抗凝管里3.放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为5000g4.小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分(注意:避免触碰白色液体层)5.即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存6.(选择步骤)移取50微升进行蛋白定量测定选择二:血清样品1.准备好不含抗凝剂的储存管2.抽取2毫升血液,置于储存管里3.室温下,静置30分钟,直至血液凝结4.放进4℃微型台式离心机离心15分钟,速度为5000g5.小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分(注意:避免触碰白色液体层)6.即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存7.(选择步骤)移取50微升进行蛋白定量测定选择三:组织样本准确称取组织重量,按照重量(g):体积(ml)=1:9的比例,加入9倍的是PBS或者生理盐水,冰水浴条件下机械匀浆,2500转/分,离心10分钟,去上清液待测。二、测定准备1.准备好上述待测样品,置于冰槽里2.设定好分光光度仪(温度为37℃):波长440nm三、样本测定1.在96孔酶标板上做好相应标记:背景对照,标准品孔和样品孔2.分别移取50微升缓冲液(ReagentA)到相应孔中3.设定标准品孔(加入50微升标准品),样本孔(加入50微升样本)阴性液孔(加入50微升阴性液(ReagentD)4.分别加入50微升反应液(ReagentB)5.轻轻摇动96孔酶标板6.在37℃温度下孵育2分钟7.放进酶标仪,置零8.取出酶标板,分别加入50微升底物液(ReagentC)9.轻轻摇动酶标板10.即刻放进酶标仪检测,包括(0分钟初始读数和5分钟读数)四,样本计算样本活性=样本OD值/标准OD值*标品浓度[详细]
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2024-09-29 05:34
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组织黑色素含量比色法定量检测试剂盒产品说明书
- 组织黑色素含量比色法定量检测试剂盒产品说明书[详细]
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2024-09-11 18:03
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细菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量检测试剂盒说明书
- 细菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途细菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过底物偶氮酪蛋白受到蛋白酶水解,产生橘红色产物的吸光峰值的变化,即采用比色法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。其适用于各种细菌细胞裂解液以及培养上清样品蛋白酶的总活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景蛋白酶(protease)又称为肽酶(peptidase)或蛋白质酶(proteinase),是一类蛋白水解的酶,属于水解酶(hydrolase)家属中一员,存在于所有生物体内。通过肽键的水解,进行蛋白质的分解代谢,参与体内血液凝结、补体系统、凋亡、细胞生长和分化等一系列生理活动。蛋白酶基本分成6类,包括丝氨酸(serine)、苏氨酸(threonine)、半胱氨酸(cysteine)、谷氨酸(glutamate)、天冬氨酸(aspartate)、金属(metalloprotease)蛋白酶等;也可以分成酸性、中性和碱性蛋白酶等;还可以分成内切肽酶,例如胰蛋白酶(trypsin),和外切肽酶,例如羧基肽酶A(carboxypeptidase)。细菌蛋白酶与碳和氮循环有关;作为外毒素(exotoxin),也是细菌致病的毒力(virulence)因子;同时细菌蛋白酶可以应用于食品、制药、皮革、诊断、水处理、银回收和洁净剂工业等。同时据此用以识别革蓝氏阴性细菌,例如枯草芽孢杆菌(Bac.Subtilis)等。基于底物偶氮酪蛋白(azocasein或sulfanilamideazocasein),在细菌蛋白酶的催化水解下,产生橘红色产物,通过其吸收峰值的变化(440nm波长),来定量分析蛋白酶的总活性。其反应系统为:产品内容裂解液(ReagentA)毫升反应液(ReagentB)毫升终止液(ReagentC)毫升中和液(ReagentD)毫升阴性液(ReagentE)微升产品说明书1份保存方式保存反应液(ReagentB)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;终止液(ReagentC)和中和液(ReagentD)具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于样品操作的容器微型台式离心机:用于样品制备恒温水槽:用于孵育反应比色皿:用于比色的容器分光光度仪:用于比色分析实验步骤样品准备准备好500微升待测细菌(OD600=0.4至0.8,即1至2X107细胞/毫升)转移到到1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为1000g(或3500RPM,例如EPPENDORF5415)小心抽去上清液加入xx微升裂解液(ReagentA),充分混匀QL涡旋震荡15秒置于冰槽里15分钟放进4℃微型台式离心机离心15分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-30030.1)即刻放进-70℃保存或置于冰槽里继续后续操作测定准备准备好待测样品(例如细菌裂解萃取液或培养上清等),置于冰槽里设定好分光光度仪(温度为37℃):波长440nm,并置零实验开始前,将反应液(ReagentB)置于65℃恒温水槽孵育20分钟后使用三、背景测定移取xx微升反应液(ReagentB)到新的1.5毫升离心管加入xx微升阴性液(ReagentE)上下倾倒数次,混匀在37℃温度下孵育30分钟加入xx微升终止液(ReagentC)涡旋震荡5秒在冰槽里孵育15分钟即刻放进4℃微型台式离心机离心15分钟,速度为3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升离心管加入xx微升中和液(ReagentD),混匀转移到比色皿里即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照样品活性测定移取xx微升反应液(ReagentB)到新的1.5毫升离心管加入100微升待测样品(蛋白总量100微克)(注意:样品需澄清)上下倾倒数次,混匀在37℃温度下孵育30分钟加入xx微升终止液(ReagentC)涡旋震荡5秒在冰槽里孵育15分钟即刻放进4℃微型台式离心机离心15分钟,速度为3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升离心管(注意:沉淀物为橘红色)加入xx微升中和液(ReagentD),混匀转移到比色皿里即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数计算样品活性注意事项本产品为20次操作操作时,须戴手套终止液(ReagentC)和中和液(ReagentD)具有腐蚀性,注意操作安全系统检测时,背景测定只需一次样品须澄清,至关重要比色测定后,比色皿须清洗彻底建议待测样本的蛋白浓度为100微克/100微升(本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒30030.1)如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度蛋白酶活性单位浓度定义:在37℃下,pH7.5的情况下,每单位酶在单位时间内(每分钟)产生0.01吸光值的升高变化本公司提供系列细菌生理生化检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]
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2018-11-19 10:00
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