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组织黑色素含量比色法定量检测试剂盒产品说明书
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本文由 上海哈灵生物科技有限公司 整理汇编
2024-09-11 18:03 291阅读次数
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组织黑色素含量比色法定量检测试剂盒产品说明书
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组织黑色素含量比色法定量检测试剂盒产品说明书
- 组织黑色素含量比色法定量检测试剂盒产品说明书[详细]
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2024-09-11 18:03
课件
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组织半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
- 组织半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)[详细]
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2015-05-19 00:00
期刊论文
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组织半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量
- 主要用途组织半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量检测试剂是一种旨在通过先酸性预处理,有机溶剂萃取后,在碱性条件下,与萘醌磺酸钠进行反应后,由次亚硫酸钠作用产生的红色显色产物,在分光光度仪下,即采用比色法来测定样品中半胱氨酸含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良沙利文反应(SullivanReaction)、成功实验证明的。其适用于各种组织(动物、人体等)裂解萃取液样品中半胱氨酸水平检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景L-半胱氨酸(L-cysteine;Cys;C)学名为2-氨基-3-巯基丙酸,是一种疏水性非必需α-氨基酸,分子式是HO2CCH(NH2)CH2SH或C3H7NO2S,分子量121.16,编码为UGU和UGC。其侧链是巯基(thiol),为非极性,作为亲核剂(nucleophile),参与酶类反应。氧化后,产生二硫化物和衍生物(disulfidederivative)胱氨酸(cystine),二硫化物成为蛋白质的结构形式。动物通过胱硫醚β合酶(cystathioninebetasynthase)和胱硫醚γ裂合酶(cystathionegammalyase)由丝氨酸(serine)和蛋氨酸(methionine)转化成同源半胱氨酸(homocysteine)、S-腺苷蛋氨酸(S-adenosylmethionine)、胱硫醚(cystathionine),Z后产生半胱氨酸和α-酮基丁酸(α-ketobutyrate)。而植物和细菌通过丝氨酸乙酰基转移酶(transacetylase)和O-乙酰丝氨酸巯基裂合酶(O-acetylserine(thio)lyase),由丝氨酸产生半胱氨酸和乙酸。半胱氨酸,是谷胱苷肽的前体,具有抗氧化作用、抗蛋白水解、使蛋白分子之间交联、参与硫化物代谢、与各种金属原子,例如铁、锌、铜等结合、参与蛋白质的转录后修饰、中和酒精毒性等功能。应用于食品调味和添加、化妆品防护、生物标记、药物等。血浆半胱氨酸水平用于评估心血管疾病风险;半胱氨酸和同源半胱氨酸的比例可以评价静脉血栓形成、心肌梗死、肾衰的风险。在植物中,半胱氨酸参与各种植物生理活动,例如光质流动(photoplasmicstreaming)、电子传导、光合成磷酸化、细胞分裂、维持抗坏血酸还原状态、抗寒性(frosthardiness)、调节作物成熟等。半胱氨酸代谢异常将导致胱氨酸病(cystinosis)、胱氨醇尿(cystinuria)、肝损伤、生长迟缓、毛发去色(hairdepigmentation)、水肿(edema)、嗜睡(lethargy)等。基于半胱氨酸,通过酸性预处理,有机溶剂萃取,进而在碱性条件下,与萘醌磺酸钠(1,2-naphthoquinone-4-sodiumsulfonate)进行反应,由次亚硫酸钠(sodiumhyposulfite)作用,产生显色产物,呈现红色,通过分光光度仪(505nm波长)来定量分析半胱氨酸的含量。[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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组织氧化应激活性氧羟自由基比色法定量检测试剂盒产品说明书
- 组织氧化应激活性氧羟自由基比色法定量检测试剂盒产品说明书[详细]
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2015-09-16 00:00
专利
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组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
- 组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)[详细]
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2015-05-28 00:00
期刊论文
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组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书...
- 组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒是一种旨在使用乙醛脱氢酶2敏感性YZ剂,通过检测反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)还原后峰值的,即采用比色法来测定组织裂解萃取液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解悬液样品(动物、人体等)乙醛脱氢酶2的特异活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景乙醛脱氢酶(aldehydedehydrogenase;ALDH;EC1.2.1.3),又称为乙醛NAD氧化还原酶(aldehydeNAD-oxidoreductase)是一类NAD(P)依赖性酶,催化广谱的外源性或内源性脂肪族和芳香族乙醛类底物氧化,包括乙醇、氨基酸、生物胺(biogenicamine)、维生素、固醇类、脂质、药物和环境分子等代谢产物。乙醛脱氢酶是乙醇在体内分解代谢过程中两种主要酶之一。乙醛脱氢酶把乙醛中的两个氢原子脱掉,使乙醛转化为乙酸,生成的乙酸进入脂肪酸氧化途径,Z终被氧化成二氧化碳和水。乙醛脱氢酶主要有两种同工酶:ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中,ALDH2存在于线粒体中,ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脱氢酶的缺少,使酒精不能被完全分解为水和二氧化碳,而是以乙醛继续留在体内,使人喝酒后产生恶心欲吐、昏迷不适等醉酒症状。基于来自于乙醇代谢产生的乙醛(acetaldehyde),在7-羟基-3-(4-羟苯基)-异黄酮-7-糖苷(Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside;Daidzin)存在与否的情况下,由乙醛脱氢酶2的催化作用,转化为乙酸(aceticacid)产物后,通过测定反应体系中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)的变化(340nm波长),来定量分析乙醛脱氢酶2的特异活性。乙醛脱氢酶2反应系统为:产品内容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升缓冲液(ReagentC)毫升反应液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)毫升阴性液(ReagentF)毫升专性液(ReagentG)微升产品说明书1份保存方式保存缓冲液(ReagentC)、反应液(ReagentD)、底物液(ReagentE)和专性液(ReagentG)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反应液(ReagentD)和底物液(ReagentE)避免光照;有效保证6月[详细]
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2018-11-08 10:00
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组织基质金属蛋白酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书
- 主要用途组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过含硫多肽底物以及特定YZ剂存在与否的情况下,受到MMP2的水解,释放出巯基,进而使用Ellman试剂,产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化,即采用比色法来测定组织裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解萃取液样品(动物、人体)、部分或完全纯化酶样品中基质金属蛋白酶2的特异活性定量检测,以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,安全可靠。技术背景基质金属蛋白酶(Matrixmetalloproteinases;MMPs)是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的总称,因含有金属(锌、钙)离子而得名。其功能在于分解细胞外基质成分。迄今为止发现的MMPs至少有28种,几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质(extracellularmatrix)成分,同时参与胚胎发育、形态形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、组织再吸收(tissueresorption)、疾病发生,例如关节炎、癌细胞浸入转移等。根据降解的底物不同可将MMPs分为4大类:(1)胶原酶:MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和蛋白多糖;(2)明胶酶(Ⅳ型胶原酶):MMP2、MMP9,又称明胶酶A、B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和弹性纤维;(3)基质溶解素:MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12,主要作用于纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ胶原及MMP1、MMP8、MMP9;(4)膜型金属蛋白酶:MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP,主要作用于明胶、Ⅳ型胶原、MMP2。体内绝大多数细胞并不储备MMPs,当需要MMPs的信号传递到细胞后才临时合成,合成的MMPs以无活性的酶原(proenzyme)形式分泌到细胞外,随后被多种蛋白酶和非蛋白酶水解以及热处理激活,一种激活的MMPs可激活另一种MMPs,形成瀑布效应。基质金属蛋白酶-2,又称明胶酶A(gelatinase-A)或IV型胶原酶(typeIVcollagenase),其前体分子量为72kDa,激活后分子量为62和56kDa。它在血清或细胞上清中浓度通常为10至200纳克/毫升。它的作用目标是天然和变性胶原蛋白(collagens)、纤维连接蛋白(fibronectin)、弹性纤维蛋白(elastin)、层粘连蛋白-5(laminin-5)、前体肿瘤坏死因子-α(pro-TNF-α)和神经(蛋白)聚糖(neurocan)。基质金属蛋白酶-2与肿瘤发展与转移、血管形成、动脉粥样硬化等疾病有关。基于含硫多肽(thiopeptide)底物Ac-PLG(2-mercapto-4-methyl-pentanoyl)-LG-OC2H5,在特异性YZ剂OA-Hy存在与否的条件下,受到MMP2的水解,释放出巯基(sulfhydrylgroup),进而与Ellman试剂5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反应后,产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通过其吸收峰值的变化(412nm波长),来定量测定组织基质金属蛋白酶2的特异活性。基质金属蛋白酶2反应系统为:[详细]
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2018-11-08 10:00
产品样册
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植物游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒产品说明书
- 植物游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途植物游离氨基酸含量比色法定量检测试剂是一种旨在通过显色染料茚三酮与游离氨基酸的氨基发生反应,在热处理下,产生蓝色复合物,由分光光度仪比色分析,定量检测样品中游离氨基酸含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心设计、成功实验证明的。适用于各种植物组织,包括种子(seed)、叶片(leaf)、根(root)等裂解悬液样品的游离氨基酸含量检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测准确。技术背景氨基酸(aminoacid或α-aminoacid)是一种含有胺和羧基功能基团的分子,为生物体中Z必须的元素。根据其侧链的不同,分成四类(弱酸、弱碱、极性、非极性)和20种各种不同的氨基酸;根据其光学异构体(opticalisomers),又分成L型和D型。L-氨基酸是构成蛋白质的主要结构分子。氨基酸是多肽、蛋白质和辅酶等的组成单位,具有各种代谢作用和营养价值。基于游离氨基酸的游离氨基与茚三酮(ninhydrin)反应,产生中间产物酮酸(ketoacid)和氨分子,进而在热处理下,进行脱羧基过程(仅发生于游离氨基酸),同时产生蓝色复合物,在分光光度仪(570nm波长)下,呈现吸光峰值的变化,来定量分析游离氨基酸的总含量。其反应系统如下:产品内容清理液(ReagentA)毫升萃取液(ReagentB)毫升缓冲液(ReagentC)毫升反应液(ReagentD)毫升标准液(ReagentE)微升产品说明书1份保存方式保存萃取液(ReagentB)和标准液(ReagentE)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反应液(ReagentD)具有挥发性,严格密闭瓶盖,避免光照;有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于标准液配制和样品操作的容器15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器干式恒温仪:用于反应孵育DOUNCE匀浆器:用于裂解组织微型台式离心机:用于样品操作比色皿:用于比色分析的容器分光光度仪:用于比色分析实验步骤一、样品准备准备好新鲜的植物组织(叶片、谷粒、种子等),并秤重以确定1克组织重量(选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管(选择步骤)加入xx毫升清理液(ReagentA)清洗1次即刻用刀片切碎组织放进一个预冷的15毫升锥形离心管加入预冷的xx毫升萃取液(ReagentB)涡旋震荡5秒,充分混匀即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用匀浆棒匀化组织(约80下)将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管,放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为5000g(或7500RPM,例如eppendorf5415)小心移出上清液(注意:不要触碰沉淀物)到另一个新的预冷的1.5毫升离心管(选择步骤)如果上清液含有肉眼可见的残渣,重复离心5分钟一次,速度为5000g(或7500RPM,例如eppendorf5415)移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-30030.1)放进-70℃的冰箱里保存或置于冰槽里备用二、标准样品配制准备好5个1.5毫升离心管,标记为1至5号管分别加入xx微升缓冲液(ReagentC)到1至5号管移取xx微升标准液(ReagentE)到1号管,混匀小心移取xx微升1号管稀释的标准液(ReagentE)到2号管,混匀小心移取xx微升2号管稀释的标准液(ReagentE)到3号管,混匀小心移取xx微升3号管稀释的标准液(ReagentE)到4号管,混匀将1至5号管放进冰槽里备用;标准管浓度见下表管号缓冲液(ReagentC)标准液(ReagentE)标准氨基酸浓度1xx微升xx微升xx微摩尔/升2xx微升xx微升1号管xx微摩尔/升3xx微升xx微升2号管xx微摩尔/升4xx微升xx微升3号管xx微摩尔/升5xx微升00微摩尔/升标准曲线测定加入xx微升缓冲液(ReagentC)到1.5毫升离心管加入xx微升上述配制的标准液(ReagentE)加入xx微升反应液(ReagentD)涡旋震荡15秒放进90℃干式恒温仪孵育5分钟,避免光照放进冰槽里1分钟转移到比色皿即刻放进分光光度仪检测(波长570nm):获得吸光读数重复实验步骤1至8四次构建标准曲线:纵座标(Y轴)为吸光读数;横座标(X轴)为标准氨基酸浓度(微摩尔/升)样品测定加入xx微升缓冲液(ReagentC)到1.5毫升离心管加入500微升待测样品加入xx微升反应液(ReagentD)涡旋震荡15秒放进90℃干式恒温仪孵育5分钟,避免光照放进冰槽里1分钟转移到比色皿即刻放进分光光度仪检测(波长570nm):获得吸光读数根据标准曲线获得样品对应氨基酸浓度(微摩尔/升)浓度计算根据标准曲线获得样品对应氨基酸浓度(微摩尔/升)X稀释倍数=(微摩尔/升)注意事项本产品为25次操作,包括标准样品避免使用Tris缓冲液、尿素等胺类物质处理样品操作时,须戴手套系统操作时,标准样品测定只需1次反应液(ReagentD)具有挥发性,严格密闭瓶盖,避免光照孵育时,避免光照本公司提供系列氨基酸检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]
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2024-09-30 10:02
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组织酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量检测试剂盒
- 主要用途组织酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过酪氨酸酶反应系统中底物酪氨酸氧化后,产生多巴色素,呈现吸光峰值的变化,即采用比色法来测定组织裂解悬液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体和动物组织,尤其是皮肤、眼睛和黑色素瘤组织裂解悬液样品中酪氨酸酶的活性检测,以及YZ剂筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景酪氨酸酶(tyrosinase;EC1.14.18.1)是一种单酚单加氧酶(monophenolmonooxygenase),又称为单酚酶(monophenolase)或单酚二羟基苯丙氨酸:O2氧化还原酶(monophenoldihydroxyphenylalanin:O2oxidoreductase),具有双功能的含铜糖蛋白,广泛存在于植物、酵母和动物组织中,其蛋白结构、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人体酪氨酸酶是一个跨膜蛋白,而催化结构域在黑色素细胞(melanocyte)或色素细胞的黑色素器(melanosome)里。酪氨酸酶通过催化L-酪氨酸(L-tyrosine)等的o-羟基化(o-hydroxylation)反应变成L-多巴(L-dopamine),进而氧化产生黑色素底物多巴醌(dopaquinone),从而由多巴色素(dopachrome)转化为黑色素(melanin)中的真黑素(eumelanin),以及其它色素,包括毛发和眼睛色素。紫外线可以激活酪氨酸酶活性,严重时,会引起色素沉着(hyperpigmentation)。酪氨酸酶基因突变将导致I型眼皮肤白化病(oculocutaneousalbinism)。酪氨酸酶YZ剂成为增白化妆品的重要元素。基于底物酪氨酸,在酪氨酸酶的催化下,产生多巴色素,通过其吸光值的变化(475nm波长),来定量测定酪氨酸酶的活性。其反应系统为:[详细]
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2018-11-18 10:00
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组织硫代酸反应物(TBARS)比色法定量检测试剂盒 产品说明书(中文版)
- 组织硫代酸反应物(TBARS)比色法定量检测试剂盒 产品说明书(中文版)[详细]
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2015-01-04 00:00
期刊论文
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组织硫代酸反应物(TBARS)比色法定量检测试剂盒
- 组织硫代酸反应物(TBARS)比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途组织硫代酸反应物(TBARS)比色法定量检测试剂是一种旨在通过TBARS(硫代酸反应物)技术,检测与之反应的丙二醛,其产物丙二醛双硫代酸加合物,在分光光度仪下,检测其吸光峰值的变化,即采用比色法测定组织样品中硫代酸反应物含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物组织(人体、动物、昆虫等)中硫代酸反应物的含量检测。广泛用于组织氧化应急研究,特别是脂质过氧化的分析。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,重复性好。技术背景脂质过氧化反应(lipidperoxidation;LPO)是动物和植物细胞损伤的一种机制,也是评价细胞和组织氧化应急的标志。含有两个或以上双键(doublebond)的多聚不饱和脂肪酸(PolyunsaturatedFattyAcid)对自由基以及其它活性氧化族高度敏感,导致产生脂质过氧自由基LOO+(lipidperoxylradical),使脂类氧化(lipidoxidation)。脂质过氧化自由基LOO+同时通过攻击分子内双键,经环化、裂解形成环状内过氧化物(cyclicendoperoxide),例如丙二醛(malondialdehyde;MDA)和4-羟基壬烯酸(4-hydroxynonenal;HNE)等氢过氧化物(hydroperoxide)和醛(aldehyde),为自然产生的脂质过氧化产物,属于硫代酸反应物(TBARS)混合物。硫代酸反应物含量增加,表明氧化应急增强。作为脂质过氧化性低分子量终端产物之一的丙二醛,广泛用于脂质过氧化反应的指标,即硫代酸反应物(thiobarbituricacidreactivesubstance;TBARS)表述为丙二醛等类物(MDAequivalentlent),以评价脂质氧化或氧化应急程度。在丁羟甲苯(ButylatedHydroxytoluene;BHT)和EDTA的参与帮助减少干扰性脂类氧化的情况下,丙二醛与硫代酸(thiobarbituricacid;TBA)进行反应,产生丙二醛双硫代酸加合物(MDA-TBA2),通过分光光度仪(532nm波长)来定量分析硫代酸反应物的含量,其反应方式为:[详细]
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2018-11-08 10:00
产品样册
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组织沉默调节蛋白1活性比色法定量检测试剂盒
- 主要用途组织沉默调节蛋白1(SIRT1)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过比色探针对硝基苯胺标记人工合成的乙酰化p53多肽底物,经过SIRT1脱乙酰基后,被位点特异性氨基肽酶水解,释放黄色对硝基苯胺,即采用比色法来测定组织裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解萃取液样品(动物、人体)、核蛋白样品、部分或完全纯化酶样品中SIRT1的活性定量检测,以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景人体组蛋白脱乙酰基酶(histonedeacetylase;HDAC)家属分成三类共20多个蛋白:种类I(classI)与酵母Rpd3蛋白同源,包括HDAC1、2、3、8,存在于细胞核中;种类II(classII)与酵母Hda1蛋白同源,包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR,存在于细胞核和细胞浆里;上述两大种类的蛋白分子催化结构域含有锌,且曲古菌素A(trichostatinA;TSA)敏感。种类III(classIII)为NAD+辅助因子必需,又称为sirtuins,与酵母Sir2(SilentInformationRegulator2)同源,包括SIRT1至7等,为曲古菌素A(trichostatinA;TSA)不敏感型赖氨酸脱乙酰基酶(lysyl-deacetylase)。催化赖氨酸脱乙酰基反应,以及由NAD+和乙酰(acetyl)基团转化产生的烟酰胺(nicotinamide)和O-乙酰ADP核糖(O-acetyl-ADP-ribose)。SIRT1位于细胞核内,与酵母Sir2同源性Z高。其功能在于调节p53活性和YZ细胞凋亡。基于人工合成的乙酰化p53(379至382氨基酸位点)多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys(Ac)具有抗氨基肽酶切离的功能,首先使用比色染料对硝基苯胺(p-Nitroaniline;p-NA)来标记乙酰化p53多肽底物,其次进行脱乙酰化,Z后底物进一步在氨基肽酶的催化酶解,释放出具有强烈吸光值的黄色对硝基苯胺(波长405nm),由此来定量测定沉默调节蛋白1的活性。用户自备磷酸盐缓冲溶液(PBS):用于清洗组织样品15毫升锥形离心管:用于样品处理的容器1.5毫升离心管:用于样品操作和保存的容器(微型)台式离心机:用于组织细胞预处理培养箱:用于反应物孵育96孔板或100微升1厘米光径比色皿:用于反应和比色的容器酶标仪或分光光度仪:用于比色分析注意事项1.本产品为20次操作,包括背景对照2.操作时,须戴手套3.系统操作过程中,背景测定只需1次4.样品须澄清,至关重要5.样品处理时,避免使用蛋白酶YZ剂、PMSF、烷基胺(alkylamine)等6.孵育反应完成后即刻进行比色测定7.滤波器可以使用波长400nm替代405nm8.测定值由低到高变化;酶动法测定可以持续60分钟9.测定值吸光读数越高,表明酶活性越高10.比色测定后,比色皿须清洗彻底11.待测样本为核蛋白样品,其蛋白浓度为50微克/20微升;待测样本为组织裂解悬液,其蛋白浓度为200微克/20微升(本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒30030.1)12.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度13.沉默调节蛋白1单位活性定义为:在30℃,pH8.0条件下,每分钟内能够释放1微摩尔对硝基苯酚所需的酶量作为一个活性单位14.本公司提供系列组蛋白脱乙酰基酶检测试剂产品质量标准1.本产品经鉴定性能稳定2.本产品经鉴定检测敏感[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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MTS比色法细胞繁殖定量检测试剂盒产品说明书
- MTS比色法细胞繁殖定量检测试剂盒产品说明书[详细]
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2016-03-10 00:00
报价单
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Ca-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书
- Ca-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上,是生物膜上的一种蛋白酶,机体在缺氧及等状态下,ATP酶受到损伤,活力下降。ATP酶活力的大小是各种细胞能量代谢及功能有无损伤的重要指标。本测试盒可测钠钾ATP酶、钙镁ATP酶的活性。样品为各种组织及红细胞等,本法的Zda特点是样品前处理不需要高速离心机,方法简便、快速。产品内容缓冲液(ReagentA)6毫升反应液(ReagentB)6毫升底物液(ReagentC)6毫升阴性液(ReagentD)6毫升标准品(reagentE)6微升产品说明书1份保存方式保存反应液(ReagentB)和底物液(ReagentC)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;底物液(ReagentC)避免光照,有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于反应液配制的容器微型台式离心机:用于样品制备比色皿或酶标板:用于比色的容器分光光度仪:用于比色分析酶标仪:用于微量样品比色分析实验步骤实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的反应液(ReagentB)和底物液(ReagentC)置入冰槽里融化。底物液(ReagentC)避免光照。然后进行下列操作。样品准备选择一:血浆样品1.准备好ACD抗凝管(注意:避免使用肝素或EDTA抗凝管)2.抽取2毫升血液,置于抗凝管里3.放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为5000g4.小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分(注意:避免触碰白色液体层)5.即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存6.(选择步骤)移取50微升进行蛋白定量测定选择二:血清样品1.准备好不含抗凝剂的储存管2.抽取2毫升血液,置于储存管里3.室温下,静置30分钟,直至血液凝结4.放进4℃微型台式离心机离心15分钟,速度为5000g5.小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分(注意:避免触碰白色液体层)6.即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存7.(选择步骤)移取50微升进行蛋白定量测定选择三:组织样本准确称取组织重量,按照重量(g):体积(ml)=1:9的比例,加入9倍的是PBS或者生理盐水,冰水浴条件下机械匀浆,2500转/分,离心10分钟,去上清液待测。二、测定准备1.准备好上述待测样品,置于冰槽里2.设定好分光光度仪(温度为37℃):波长440nm三、样本测定1.在96孔酶标板上做好相应标记:背景对照,标准品孔和样品孔2.分别移取50微升缓冲液(ReagentA)到相应孔中3.设定标准品孔(加入50微升标准品),样本孔(加入50微升样本)阴性液孔(加入50微升阴性液(ReagentD)4.分别加入50微升反应液(ReagentB)5.轻轻摇动96孔酶标板6.在37℃温度下孵育2分钟7.放进酶标仪,置零8.取出酶标板,分别加入50微升底物液(ReagentC)9.轻轻摇动酶标板10.即刻放进酶标仪检测,包括(0分钟初始读数和5分钟读数)四,样本计算样本活性=样本OD值/标准OD值*标品浓度[详细]
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2024-09-29 05:34
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组织肉毒碱棕榈酰转移酶I活性比色法定量检测试剂盒产品说明书
- 主要用途组织肉毒碱棕榈酰转移酶I(CARNITINEPALMITOYL-TRANSFERASEI)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过肉碱和脂酰辅酶A以及特定YZ剂反应系统中释放出巯基辅酶A,使用Ellman试剂,产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化,即采用比色法来测定组织裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解悬液样品(动物、人体等)肉毒碱棕榈酰转移酶I的特异活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景脂肪酸β氧化过程(β-oxidation)在动物组织的线粒体发生的脂肪酸代谢通路,可概括为活化、转移、β氧化及Z后经三羧酸循环被彻底氧化生成CO2和H2O,并释放能量等四个阶段。大于10个碳(C10)的活化型长链脂酰辅酶A是不能直接透过线粒体内膜,需要借助肉碱(camitine),即L-3羟-4-三甲基铵丁酸,而被转运入线粒体内,在线粒体内膜的外侧及内侧分别有肉碱脂酰转移酶(carnitinepalmitoyltransferase;CPT;EC2.3.1.21)I和Ⅱ。位于内膜外侧的酶Ⅰ,促进脂酰CoA转化为脂酰肉碱,后者可借助线粒体内膜上的转位酶(或载体),转运到内膜内侧,然后,在酶Ⅱ催化下脂酰肉碱释放肉碱到胞浆,留下脂酰CoA。由此位于胞浆的活化脂肪酸―脂酰CoA穿过线粒体内膜进入基质而被氧化分解。肉碱脂酰转移酶缺失症导致机体无法代谢脂肪酸。基于肉碱和脂酰辅酶A在丙二酰辅酶A(malonylCoA)存在与否的条件下,通过肉碱脂酰转移酶的作用,产生脂酰肉碱,并释放出巯基辅酶A(CoA-SH),与Ellman试剂5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反应后,产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通过其吸收峰值的变化(412nm波长),来定量分析丙二酰辅酶A敏感性肉碱脂酰转移酶I的特异活性。肉碱脂酰转移酶I反应系统为:[详细]
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2018-11-18 10:00
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细胞脂质比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
- 细胞脂质比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)[详细]
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2015-05-12 00:00
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细胞弹性蛋白含量比色法(TPPS)定量检测试剂盒产品说明书
- 细胞弹性蛋白含量比色法(TPPS)定量检测试剂盒产品说明书主要用途细胞弹性蛋白含量比色法(TPPS)定量检测试剂是一种旨在通过酸性加热萃取并转化为可溶性弹性蛋白,与四苯基卟吩四磺酸染料结合,在碱性条件下,释放棕红色染料,酸性处理后,由分光光度仪比色分析,定量检测细胞样品中弹性蛋白含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可以用于检测各种弹性蛋白,包括原弹性蛋白(tropoelastin)、致山黧豆中毒弹性蛋白(lathyrogenic)、α弹性蛋白、k-弹性蛋白等。适用于各种细胞(动物、人体等)或培养上清弹性蛋白水平检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测准确。技术背景弹性蛋白(elastin)是一种不溶性的非极性的碱性蛋白,具有高度抗拉能力(tensilestrength),存在于大动脉、气管、支气管、韧带等结缔组织细胞间。弹性蛋白由多肽二价交联随机扭绞(randomlykinked)组成,通过锁链素(desmosine)和异锁链素(isodesmosine)相连。动物细胞上的原弹性蛋白(tropoelastin)为单体,可溶性,分子量为62至72Kd。与微纤丝(microfibril)糖蛋白结合,形成弹性基质(matrix)或弹性组织筏(raft),构成细胞膜表面。通过酸性加热萃取弹性蛋白,并转化为可溶性衍生物,α弹性蛋白、k-弹性蛋白等,进而使用四苯基卟吩四磺酸(5,10,15,20-tetraphenylporphin-21H,23H-tetra-sulfonate;TPPS)染料与弹性蛋白发生温克尔曼反应(Winkelmanreaction)结合,然后在碱性条件下释放出棕红色染料,酸性处理后,呈现绿色,通过分光光度仪(445nm波长)测定,分析弹性蛋白的含量。产品内容萃取液(ReagentA)毫升沉淀液(ReagentB)毫升清理液(ReagentC)毫升染色液(ReagentD)毫升浓缩液(ReagentE)毫升解离液(ReagentF)毫升强化液(ReagentG)毫升标准液(ReagentH)毫升稀释液(ReagentI)毫升产品说明书1份保存方式保存标准液(ReagentH)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;染色液(ReagentD)避免光照;试剂具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于标准液配制和样品制备的容器15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器细胞刮脱棒:用于细胞脱离平式摇荡仪:用于样品操作干式恒温仪:用于样品孵育微型台式离心机:用于样品操作200微升1厘米光径比色皿或96孔板:用于比色分析的容器分光光度仪或酶标仪:用于比色分析实验步骤一、样品预处理1)细胞上清处理移取300微升细胞培养上清到1.5毫升离心管加入xx微升萃取液(ReagentA)涡旋振荡15秒放进100℃干式恒温仪孵育60分钟置于室温下15分钟冷却放进微型台式离心机离心10分钟,速度为10000g小心移取400微升上清液到新的1.5毫升离心管加入xx微升4℃预冷的沉淀液(ReagentB)在冰槽里孵育30分钟,期间每隔10分钟涡旋振荡15秒放进微型台式离心机离心10分钟,速度为10000g小心抽去上清液,确保无液体残留;沉淀颗粒透明且肉眼难以看见置于冰槽里备用2)细胞处理准备好25cm2细胞培养瓶或60mm细胞培养皿的待测培养细胞(1至5X106细胞)小心抽去培养液小心加入xx毫升清理液(ReagentC),覆盖生长表面小心抽去清理液使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞(注意:可以使用胰酶消化)加入xx毫升清理液(ReagentC),混匀细胞移入到预冷的15毫升锥形离心管(注意:悬浮细胞从这一步骤开始)放进台式离心机离心5分钟,速度为300g小心抽去上清液,但保留300微升,混匀细胞颗粒群转移到1.5毫升离心管加入xx微升萃取液(ReagentA)涡旋振荡15秒放进100℃干式恒温仪孵育60分钟置于室温下15分钟冷却放进微型台式离心机离心10分钟,速度为10000g小心移取400微升上清液到新的1.5毫升离心管(注意:上清液可能会呈现黄色)加入xx微升4℃预冷的沉淀液(ReagentB)在冰槽里孵育30分钟,期间每隔10分钟涡旋振荡15秒放进微型台式离心机离心10分钟,速度为10000g小心抽去上清液(注意:确保无液体残留;沉淀颗粒透明且肉眼难以看见)置于冰槽里备用二、标准样品配制准备好5个1.5毫升离心管,标记为1至4号管分别加入xx微升稀释液(ReagentI)到1至4号管移取xx微升标准液(ReagentH)到1号管,混匀小心移取xx微升1号管稀释的标准液(ReagentH)到2号管,混匀小心移取xx微升2号管稀释的标准液(ReagentH)到3号管,混匀小心抽去xx微升3号管稀释的标准液(ReagentH)将1至4号管放进冰槽里备用;标准管浓度见下表管号稀释液(ReagentI)标准液(ReagentH)标准弹性蛋白含量1xx微升xx微升xx微克2xx微升xx微升1号管xx微克3xx微升xx微升2号管xx微克4xx微升背景读数0分别加入xx微升4℃预冷的沉淀液(ReagentB)到上述标准管里在冰槽里孵育30分钟,期间每隔10分钟涡旋振荡15秒放进微型台式离心机离心10分钟,速度为10000g小心抽去上清液(注意:确保无液体残留;沉淀颗粒透明且肉眼难以看见)置于冰槽里备用标准曲线测定分别加入xx微升染色液(ReagentD)到上述配制的标准液(ReagentH)里(注意:用枪头抽打使沉淀颗粒溶解)分别加入xx微升浓缩液(ReagentE)涡旋振荡混匀室温下,孵育60分钟,期间每隔15分钟涡旋振荡15秒放进微型台式离心机离心10分钟,速度为10000g小心抽去上清液(注意:确保没有液体残留)加入xx微升解离液(ReagentF)用枪头抽打使沉淀颗粒溶解,并辅以涡旋震荡(注意:确保充分溶解)加入xx微升强化液(ReagentG),混匀(注意:呈现绿色)转移到新的200微升1厘米光径的比色皿或96孔板即刻放进分光光度仪或酶标仪检测(波长445nm):获得标准样品吸光读数重复实验步骤1至11四次构建标准曲线:纵座标(Y轴)为吸光读数;横座标(X轴)为标准弹性蛋白含量(微克)(注意:标准样品吸光读数背景读数)样品测定加入xx微升染色液(ReagentD)到上述配制的待测样品管里(注意:用枪头抽打使沉淀颗粒溶解)分别加入xx微升浓缩液(ReagentE)涡旋振荡混匀室温下,孵育60分钟,期间每隔15分钟涡旋振荡15秒放进微型台式离心机离心10分钟,速度为10000g小心抽去上清液(注意:确保没有液体残留)加入xx微升解离液(ReagentF)用枪头抽打使沉淀颗粒溶解,并辅以涡旋震荡(注意:确保充分溶解)加入xx微升强化液(ReagentG),混匀(注意:呈现绿色)转移到新的200微升1厘米光径的比色皿或96孔板即刻放进分光光度仪或酶标仪检测(波长445nm):获得样品吸光读数根据上述标准曲线获得样品对应弹性蛋白含量(微克)(注意:待测样品吸光读数背景读数)浓度计算注意事项本产品为25次操作,包括标准样品本产品检测范围为5至100微克弹性蛋白操作时,须戴手套系统操作时,标准样品测定只需1次弹性蛋白沉淀颗粒微小透明,肉眼难以看见操作需要非常细致,包括避免液体残留、颗粒溶解等,否则会产生误差试剂具有腐蚀性,严格注意操作安全孵育时,避免光照如果样品弹性蛋白含量过低,可以浓缩样品或增加样品量样品浓度可以表述为:微克弹性蛋白/细胞量;微克弹性蛋白/细胞总蛋白等通常1X105细胞含有40微克弹性蛋白本公司提供系列弹性蛋白检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]
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2018-11-19 10:00
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细菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量检测试剂盒说明书
- 细菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途细菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过底物偶氮酪蛋白受到蛋白酶水解,产生橘红色产物的吸光峰值的变化,即采用比色法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。其适用于各种细菌细胞裂解液以及培养上清样品蛋白酶的总活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景蛋白酶(protease)又称为肽酶(peptidase)或蛋白质酶(proteinase),是一类蛋白水解的酶,属于水解酶(hydrolase)家属中一员,存在于所有生物体内。通过肽键的水解,进行蛋白质的分解代谢,参与体内血液凝结、补体系统、凋亡、细胞生长和分化等一系列生理活动。蛋白酶基本分成6类,包括丝氨酸(serine)、苏氨酸(threonine)、半胱氨酸(cysteine)、谷氨酸(glutamate)、天冬氨酸(aspartate)、金属(metalloprotease)蛋白酶等;也可以分成酸性、中性和碱性蛋白酶等;还可以分成内切肽酶,例如胰蛋白酶(trypsin),和外切肽酶,例如羧基肽酶A(carboxypeptidase)。细菌蛋白酶与碳和氮循环有关;作为外毒素(exotoxin),也是细菌致病的毒力(virulence)因子;同时细菌蛋白酶可以应用于食品、制药、皮革、诊断、水处理、银回收和洁净剂工业等。同时据此用以识别革蓝氏阴性细菌,例如枯草芽孢杆菌(Bac.Subtilis)等。基于底物偶氮酪蛋白(azocasein或sulfanilamideazocasein),在细菌蛋白酶的催化水解下,产生橘红色产物,通过其吸收峰值的变化(440nm波长),来定量分析蛋白酶的总活性。其反应系统为:产品内容裂解液(ReagentA)毫升反应液(ReagentB)毫升终止液(ReagentC)毫升中和液(ReagentD)毫升阴性液(ReagentE)微升产品说明书1份保存方式保存反应液(ReagentB)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;终止液(ReagentC)和中和液(ReagentD)具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于样品操作的容器微型台式离心机:用于样品制备恒温水槽:用于孵育反应比色皿:用于比色的容器分光光度仪:用于比色分析实验步骤样品准备准备好500微升待测细菌(OD600=0.4至0.8,即1至2X107细胞/毫升)转移到到1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为1000g(或3500RPM,例如EPPENDORF5415)小心抽去上清液加入xx微升裂解液(ReagentA),充分混匀QL涡旋震荡15秒置于冰槽里15分钟放进4℃微型台式离心机离心15分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-30030.1)即刻放进-70℃保存或置于冰槽里继续后续操作测定准备准备好待测样品(例如细菌裂解萃取液或培养上清等),置于冰槽里设定好分光光度仪(温度为37℃):波长440nm,并置零实验开始前,将反应液(ReagentB)置于65℃恒温水槽孵育20分钟后使用三、背景测定移取xx微升反应液(ReagentB)到新的1.5毫升离心管加入xx微升阴性液(ReagentE)上下倾倒数次,混匀在37℃温度下孵育30分钟加入xx微升终止液(ReagentC)涡旋震荡5秒在冰槽里孵育15分钟即刻放进4℃微型台式离心机离心15分钟,速度为3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升离心管加入xx微升中和液(ReagentD),混匀转移到比色皿里即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照样品活性测定移取xx微升反应液(ReagentB)到新的1.5毫升离心管加入100微升待测样品(蛋白总量100微克)(注意:样品需澄清)上下倾倒数次,混匀在37℃温度下孵育30分钟加入xx微升终止液(ReagentC)涡旋震荡5秒在冰槽里孵育15分钟即刻放进4℃微型台式离心机离心15分钟,速度为3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升离心管(注意:沉淀物为橘红色)加入xx微升中和液(ReagentD),混匀转移到比色皿里即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数计算样品活性注意事项本产品为20次操作操作时,须戴手套终止液(ReagentC)和中和液(ReagentD)具有腐蚀性,注意操作安全系统检测时,背景测定只需一次样品须澄清,至关重要比色测定后,比色皿须清洗彻底建议待测样本的蛋白浓度为100微克/100微升(本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒30030.1)如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度蛋白酶活性单位浓度定义:在37℃下,pH7.5的情况下,每单位酶在单位时间内(每分钟)产生0.01吸光值的升高变化本公司提供系列细菌生理生化检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]
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2018-11-19 10:00
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组织糖胺多糖(GAG)总含量阿尔新蓝(alcian blue)比色法定量检测试剂盒 产品说明书(中文版)
- 组织糖胺多糖(GAG)总含量阿尔新蓝(alcian blue)比色法定量检测试剂盒 产品说明书(中文版)[详细]
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2015-08-25 00:00
期刊论文
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组织糖胺多糖(GAG)总含量阿尔新蓝(alcian blue)比色法定量检测试剂盒 产品说明书(中文版)
- 组织糖胺多糖(GAG)总含量阿尔新蓝(alcian blue)比色法定量检测试剂盒 产品说明书(中文版)[详细]
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2015-01-16 00:00
应用文章
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