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纯化线粒体琥珀酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
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纯化线粒体琥珀酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途纯化线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成电子受体染料,通过反应系统测定染料还原后峰值的降低,即采用比色法测算样品中单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种纯化线粒体裂解悬液样品琥珀酸脱氢酶的特异性活性检测。用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。技术背景琥珀酸脱氢酶(succinatedehydrogenase;SDH;EC1.3.99.1)是三羧酸循环(tricarboxylicacidcycle;TCA)或Krebs循环中与细胞线粒体膜相关的重要元素,位于线粒体内膜,参与细胞呼吸链。琥珀酸脱氢酶由27kd和70kd两个单体组成。其功能在于催化琥珀酸(succinate)的氧化反应,产生延胡索酸(furmarate),通过黄素腺嘌呤二核苷酸(FlavinAdenineDinucleotide;FAD)传递电子。基于琥珀酸脱氢酶的反应原理,使用人工电子受体染料二氯靛酚钠(2,6-Dichloroindophenolsodium;DCIP),接受来自还原型黄素腺嘌呤二核苷酸(ReducedflavinAdenineDinucleotide;FADH2)的电子,而被还原,在分光光度仪下,其吸光值(600nm波长)的变化,来测算琥珀酸脱氢酶的活性。其反应方式为:产品内容清理液(ReagentA)XX毫升裂解液(ReagentB)XX毫升缓冲液(ReagentC)XX毫升反应液(ReagentD)XX毫升底物液(ReagentE)XX毫升阴性液(ReagentF)XX微升产品说明书1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融;反应液(ReagentD)含有毒性物质,避免直接用手接触;底物液(ReagentE),避免光照;有效保证3月用户自备15毫升锥形离心管:用于样品制备的容器1.5毫升离心管:用于样品制备和保存的容器4℃(微型)台式离心机:用于样品处理DOUNCE匀浆器:用于裂解组织恒温培养箱或恒温水槽:用于反应物孵育比色皿:用于比色测定的容器分光光度仪:用于比色分析实验步骤实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液置入冰槽里融化;底物液(ReagentE)注意避光。然后进行下列操作。一、样品准备手术取出动物组织,并秤重以确定200毫克组织重量(选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管(选择步骤)加入XX毫升清理液(ReagentA)清洗(选择步骤)抽去清洗液移入到一个液氮冻存管即刻放进液氮罐过夜次日从液氮罐里取出,即刻(Z快速度)用研磨棒碾碎组织成粉末状(注意:切莫使组织冻融)放进一个15毫升锥形离心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液(ReagentB)涡旋震荡5秒,充分混匀即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器在冰槽里用匀浆棒匀化组织(约20至40下)(注意:参见注意事项8)将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为1500g小心移出上清液到另一个新的预冷的1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液(ReagentB),混匀颗粒群移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-GMS30030.1)放进-70℃的冰箱里保存或置于冰槽里备用二、测定准备准备好待测样品,置于冰槽里设定好分光光度仪(温度为25℃):波长600nm,间隔60秒,读数6次(共5分钟),并置零缓冲液(ReagentC)在室温下均衡温度背景对照测定移取XX微升缓冲液(ReagentC)到新的比色皿加入XX微升反应液(ReagentD)加入XX微升底物液(ReagentE)放进25℃培养箱里静置3分钟
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纯化线粒体琥珀酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
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细菌琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒
- 主要用途细菌琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成电子受体染料,通过反应系统测定染料还原后峰值的降低,即采用比色法测算样品中单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细菌菌株裂解悬液和膜蛋白样品琥珀酸脱氢酶的特异性活性检测。用于衰老、能量代谢、蛋白组学、发酵分析等研究。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。技术背景琥珀酸脱氢酶(succinatedehydrogenase;SDH;EC1.3.99.1)是三羧酸循环(tricarboxylicacidcycle;TCA)或Krebs循环中与细胞线粒体膜相关的重要元素,位于线粒体内膜,参与细胞呼吸链。细菌琥珀酸脱氢酶,又称为SdhCDAB,为膜结合性蛋白,分为周边(peripheral)和跨膜(transmembrane)部分,其中周边亲水部分由SdhA和SdhB亚体组成:SdhA亚体含有黄素蛋白(flavoprotein),是琥珀酸的活性部位;SdhB含有铁硫蛋白(iron-sulfurprotein),进行电子传递;跨膜疏水部分由SdhC和SdhD亚体组成:SdhC含有亚铁血红素-B(Heme-B),SdhD含有泛醌(ubiquinone)结合部位(Q部位)。其作用在于参与三羧酸循环(TCAcycle)和呼吸链活动。琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸(succinate)的氧化反应,产生延胡索酸(furmarate),通过黄素腺嘌呤二核苷酸(FlavinAdenineDinucleotide;FAD)传递电子。基于琥珀酸脱氢酶的反应原理,使用人工电子受体染料二氯靛酚钠(2,6-Dichloroindophenolsodium;DCIP),接受来自还原型黄素腺嘌呤二核苷酸(ReducedflavinAdenineDinucleotide;FADH2)的电子,而被还原,在分光光度仪下,其吸光值(600nm波长)的变化,来测算琥珀酸脱氢酶的活性。其反应方式为:[详细]
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乳酸脱氢酶(LDH)总活性终点比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
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2015-05-22 00:00
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线粒体呼吸链复合物I活性比色法定量检测试剂盒
- 主要用途线粒体呼吸链复合物I(NADH-辅酶Q还原酶)活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成辅酶Q同功类似物和特异性YZ剂,通过反应系统测定样品中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适合于各种纯化线粒体样品(动物、人体、酵母)以及细胞或组织裂解悬液样品的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-辅酶Q还原酶的特异性活性检测。其用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。技术背景线粒体呼吸链复合物I,通常称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸辅酶Q还原酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase;NADH-CoQreductase),又称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase;NADHdehydrogenase),是线粒体电子传递链中Zda的结构成分:含有30至40多个多肽结构。其特征性的酶活性是鱼藤酮敏感的NADH-辅酶Q还原酶(NADH:QReductase)。复合物I催化线粒体内电子由供体NADH传递到内膜上辅酶Q受体(泛醌;ubiquinone)的能量转移反应,为整个呼吸链反应系统的**步。基于辅酶Q底物,在鱼藤酮存在与否的情况下,通过NADH-辅酶Q还原酶的催化,转化成还原型泛醌(CoQH2),同时还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),在分光光度仪下产生吸收峰值的变化(340nm波长),由此定量测定NADH-辅酶Q还原酶的特异活性。其反应系统是:[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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组织乙醛脱氢酶2活性光度法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
- 组织乙醛脱氢酶2活性光度法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)[详细]
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2014-12-30 00:00
安装说明
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乳酸脱氢酶(LDH)总活性终点比色法定量检测试剂盒
- 主要用途乳酸脱氢酶(LDH)总活性终点比色法定量检测试剂是一种旨在通过乳酸脱氢酶反应系统中反应完成后还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用终点比色法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞和组织裂解萃取样品(动物、人体、植物、昆虫等)乳酸脱氢酶(LDH)的总活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景乳酸脱氢酶是一种氧化还原酶,催化丙酮酸和乳酸的互相转化反应。乳酸脱氢酶由4个亚单位构成,有两种类型:肌肉型和心肌型。根据其亚单位成分,分为5种同功酶。乳酸脱氢酶的活性检测用来评价细胞或组织的损害状况。基于丙酮酸(pyruvate)底物在乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase;LDH)的催化下,转化成乳酸(lactate),同时还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),完全反应后,在分光光度仪下产生吸收峰值的变化(340nm波长)由此定量测定乳酸脱氢酶的活性。乳酸脱氢酶反应系统为:lactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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